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ZNF403,一个新的细胞周期调节因子的功能研究(英文)被引量：1: 2013年; ZNF403和LCRG1是人类基因ZNF403的2个不同转录剪切本.以往的研究表明LCRG1在喉癌细胞株Hep-2中具有抑瘤特性.本研究旨在探明ZNF403和LCRG1不同剪切本之间的关系以及在肿瘤细胞中对ZNF403的功能进行研究.首先,采用实时荧光定量PCR对这2个转录本的相对表达水平进行分析,结果表明,ZNF403表达水平在不同细胞株中明显高于LCRG1(>10倍),为该基因的主要转录表达产物.随后分别采用MTT细胞生长分析法和裸鼠体内成瘤实验在体外和体内对ZNF403的功能进行分析,结果显示ZNF403的基因沉默可以同时在体内和体外抑制喉癌细胞Hep-2细胞的生长.为了探明其作用机制,本研究还采用细胞信息学、流式细胞周期分析术和高通量PCR点阵分析方法进一步分析,结果表明,ZNF403的基因沉默可显著抑制细胞DNA的复制并延缓细胞周期进入到有丝分裂期.同时发现ZNF403可调节一系列的细胞周期调节蛋白如MCM2、p21、ATM、MRE11A等.综上研究提示ZNF403为一新的细胞周期调节因子,其功能的缺失与肿瘤发生发展密切相关.; 关瑞侯德富饶翔关勇军欧阳咏梅余艳辉Jim HU陈主初; 关键词：选择性剪切细胞周期 AHR

激光捕获显微切割纯化的人结肠癌组织的定量蛋白质组学研究被引量：3: 2017年; 为分析结肠上皮癌变进程中的差异表达蛋白质,筛选结肠癌诊断候选标志物,先采用激光捕获显微切割技术(LCM)纯化人正常结肠组织和结肠癌组织,再采用同位素标记对蛋白质进行相对和绝对定量(i TRAQ),然后结合强阳离子柱分离和反相液质联用(2D-LC-MS/MS)鉴定差异表达蛋白质。试验共鉴定了1 042个非冗余蛋白,筛选出与人结肠癌变相关的差异蛋白162个,其中在结肠癌中表达上调的蛋白质68个,表达下调的蛋白质94个,功能分析表明,这些差异蛋白质涉及内质网蛋白质加工、糖酵解/糖原异生、黏着斑细胞连接、调节微丝组装和细胞外基质受体相互作用等分子功能。进一步采用Western blotting及免疫组织化学技术(IHC)验证了其中差异蛋白S100A9的表达,证实了定量蛋白质组学结果的可靠性。研究表明:差异表达蛋白质与结肠癌变相关,并有可能成为结肠癌诊断的候选分子标志物,为进一步深入研究这些蛋白质在结肠癌发生和发展进程中的分子机制,为结肠癌的发病机制研究提供新线索。; 李国庆李园园李茂玉梁旭俊肖哲锋邵美英彭芳张鹏飞陈永恒陈主初; 关键词：结肠癌生物标志物激光捕获显微切割技术

5-羟色胺2B受体Nanodisc及其配体结合活性研究自组装: 2017年; 目的探索生物纳米盘（Nanodisc）在G蛋白偶联受体（GPCR）体外功能和药物筛选研究方面的应用。方法将重组表达获得的5-羟色胺2B受体（5-HT2BR）组装到Nanodisc中；利用蛋白质凝胶电泳和凝胶排阻层析对组装结果进行评估；通过表面等离子共振（SPR）对组装后的受体活性进行验证。结果5-HT2BR成功的进行了高效的Nanodisc自组装，且组装过后，5-HT2BR仍保持了与其拮抗剂SB204741的结合活性。结论为开发靶向5-HT2BR的特异性药物筛选提供了新的研究思路，同时也为运用Nanodisc技术在GPCR的结构、功能及药物筛选方面的研究奠定了基础。; 代书炎彭芳李俊瞿灵芝蒋龙英陈小娟郭明邵美英陈永恒; 关键词：受体药物评价临床前

NR4A1 DNA结合域的表达纯化被引量：1: 2015年; 目的:寻求一种核受体家族蛋白NR4A1 DNA结合域(NR4A1 DNA binding domain,NR4A1-DBD)表达纯化的方法。方法:构建融合蛋白PET28a-NR4A1-DBD表达载体,分别通过镍亲和层析、阳离子交换层析及凝胶过滤的方法对目的蛋白进行纯化。结果:PET28a-NR4A1-DBD蛋白在低温诱导(24℃)时多以可溶性形式存在,通过此纯化,可达到每升培养基产生2~3 mg蛋白,纯度高达95%以上。结论:镍亲和层析是一种可靠、实用的蛋白表达纯化方法,后续使用阳离子交换层析及凝胶过滤可以进一步提高蛋白纯度。; 闫宁宁李俊陈小娟陈永恒陈林陈主初; 关键词：层析阳离子交换纯化

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国家自然科学基金(81272971)