广东省自然科学基金(9151051501000021)
- 作品数：8 被引量：116H指数：3
- 相关作者：翁文骏方建培许吕宏陈胜华徐达传更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院南华大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外扩增CD4^+ CD25^+ Treg细胞的效果比较及体外免疫抑制功能鉴定被引量：1
- 2013年
- 本研究比较3种不同细胞组分扩增CD4+CD25+Treg的效果并鉴定其免疫抑制功能。用免疫磁珠分选法从小鼠脾细胞中分选出CD4+T细胞、CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞,负载CD3/CD28克隆抗体MACSiBead联合IL-2共同刺激,分别对CD4+T细胞、CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞进行体外扩增培养,流式细胞术检测扩增后CD4+CD25+Treg细胞的比例及Foxp3基因的表达,用混合淋巴细胞反应(MLR)检测CD4+CD25+Treg对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用,CCK-8方法检测细胞抑制率。结果表明:经过2周培养,3组细胞均有明显的扩增。CD4+T细胞组扩增倍数为(77.8±5.32)倍,CD4+CD25+Treg细胞的比例由(6.61±1.00)%增加到(15.33±1.31)%。CD4+CD25-T细胞组扩增迅速,倍数为(95.20±7.67)倍,CD4+CD25+Treg细胞的比例由培养前(0.37±0.13)%增加到(9.84±0.98)%。磁珠分选后的CD4+CD25+Treg细胞的扩增倍数为(41.20±6.92)倍,细胞纯度由(86.75±1.25)%下降到(85.32±1.62)%,Foxp3表达由(76.92±1.13)%下降到(75.33±2.11)%,扩增前后的细胞纯度和Foxp3表达,差异无统计学意义(P>0.05)。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+Treg细胞对CD4+CD25-T细胞增殖有明显的抑制作用,对效应性T细胞增殖的抑制效能与其细胞数呈正相关。结论:本研究在体外成功扩增了小鼠CD4+CD25+Treg细胞,并且具有免疫抑制功能,其中CD4+CD25+Treg细胞组扩增的CD4+CD25+Treg细胞数量多,细胞纯度高。
- 翁文骏潘莉方建培许吕宏
- 关键词：CD4+T细胞CD4+CD25+TREG细胞CD4+
- 血管三维重建与传统解剖学方法的对比研究被引量：7
- 2009年
- 目的:将显示血管等结构的三维重建方法与传统的解剖学方法进行比较,评价其优劣。方法:新鲜成人下肢标本各2侧,分别从动脉与静脉灌注显影剂,CT扫描后利用三维软件进行分割与重建;解剖扫描后的标本,分别显示其血管系统。将三维图形与标本照片进行比较。结果:利用三维软件可分割与重建出独立的骨、血管、皮肤、肌肉,所重建的图形可以分别单独显示,也可以组合显示。可从不同角度与层面观察血管的走行、分布、吻合等情况,但有显示误差,不适合数据采集。剥制标本上可清晰地观察到血管系统,可观察任一支血管的来源、走行、分布与吻合等情况,可以进行数据测量,但不能同时显示多层结构。结论:血管灌注结合三维重建的方法对于观察人体血管的三维状态、不同角度与不同层面的走行与分布具有优势,但不能完全替代传统的剥制标本。
- 陈胜华唐茂林徐达传丁红梅刘畅李泽宇田喜光
- 关键词：三维重建血管血管造影
- CD4^+ CD25^+调节性T细胞对致敏小鼠异基因造血干细胞移植影响被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对异基因造血干细胞(HSC)在致敏小鼠植入的影响,为临床应用异基因造血干细胞移植(HSCT)治疗致敏受者免疫排斥提供实验依据。BALB/c小鼠分为5组:致敏组、致敏及移植前7 d应用5×105Treg组、致敏及移植前13及7 d应用5×105Treg组、未致敏小鼠移植组(给予等体积的PBS对照)和正常小鼠空白对照组。每组动物15只。移植当天给予致死量8 Gy照射,然后将荧光标记的C57BL/6小鼠骨髓干细胞(BMSC)经尾静脉注入BALB/6小鼠内。在不同时间点取血或器官组织用流式细胞仪检测荧光细胞归巢情况,同时记录生存状况,监测造血重建水平。结果表明,移植后12及24 h,应用Treg组与致敏组相比,不同组织中荧光细胞归巢数量明显增多(P<0.05);致敏组和空白对照组小鼠均于照射后6-13 d死亡,而分别应用5×105Treg 1次及2次组小鼠中位生存期分别为15和16 d,与致敏组相比,差异均具有统计学意义(P<0.001);两Treg细胞组之间相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用Treg能诱导致敏受鼠对异基因HSC一定程度的免疫耐受,抑制免疫杀伤,延长其生存期,但未能完全诱导免疫耐受,最后致敏小鼠仍因HSC排斥而死亡。
- 叶启翔翁文骏许吕宏方建培
- 关键词：造血干细胞移植
- 致敏小鼠调节性T细胞对其致敏水平及免疫功能的影响被引量：1
- 2014年
- 【目的】探讨致敏小鼠调节性T细胞对其致敏水平及免疫功能的影响。【方法】免疫磁珠法从致敏小鼠脾细胞中分选出CD4+CD25+Treg细胞,流式细胞术检测分选后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3基因的表达。实验分组:正常对照组、致敏对照组和输注组,输注组以不同方式向致敏小鼠体内输注CD4+CD25+Treg(5×105/只·次),流式检测在处理后的第21天检测各组血清中与供者反应性抗体结合的供者脾脏细胞百分比、CD4+CD25+Treg、记忆性T细胞和效应性T细胞的比例。ELISA法检测各组小鼠血清中Th1类细胞因子(IFN-r、IL-2)和Th2类(IL-4、IL-10)细胞因子水平。【结果】分选出CD4+CD25+Treg细胞纯度平均达到87%,细胞活性大于97%,高表达Foxp3基因。致敏对照组的CD4+CD25+Treg细胞、记忆性T细胞、效应性T细胞和血清IFN-r水平较正常对照组升高,致敏对照组的血清IL-4、IL-10水平较正常对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);输注组CD4+CD25+Treg、记忆性T细胞比例、血清IL-4、IL-10水平较致敏对照组高;输注组效应性T细胞比例、血清IFN-r水平较致敏对照组低,且差异有统计学意义(P<0.05)。输注组小鼠血清中与供者反应性抗体结合的供者脾脏细胞百分比与致敏对照组的比较,差异无统计学意义(P>0.05)【结论】成功分选出致敏后的调节性T细胞,致敏促使免疫细胞免疫记忆,Th1细胞活化增强,Th2细胞活化受到抑制。向致敏动物体内输注CD4+CD25+Treg可降低细胞免疫,诱导Th1/Th2细胞因子向Th2偏移,但供者反应性抗体水平未降低。
- 翁文骏潘莉方建培许吕宏叶启翔
- 关键词：CD4+CD25+TREG细胞免疫磁珠分选
- 脐带血异基因造血干细胞移植后噬血细胞性淋巴组织细胞增生症1例临床分析被引量：1
- 2011年
- 目的探讨异基因造血干细胞移植后噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)的临床特征、诊断及治疗。方法回顾性分析1例急性髓系白血病非血缘相关脐带血造血干细胞移植(AML-URD-UCBT)患儿术后并发HLH的临床特点并复习相关文献。结果患儿移植术后第6天(+6 d,下同)出现皮肤、肝脏、肠道急性移植物抗宿主病(aGVHD),先后给予糖皮质激素、环孢素A(CsA)、赛尼哌、霉酚酸酯(MMF)、他克莫司(FK506)等免疫抑制治疗后,aGVHD症状好转,但+26 d后出现活动性巨细胞病毒(CMV)感染合并HLH,给予静脉注射用丙种球蛋白、无环鸟苷、更昔洛韦抗CMV治疗,输红细胞、血小板、血浆、纤维蛋白原等支持治疗,参照HLH-2004方案予依托泊苷、糖皮质激素及CsA治疗后,+61 d检测血CMV早期/晚期基质蛋白(CMV-PP65)转阴,+55、+63 d骨髓象未见噬血细胞,呈HLH完全缓解骨髓象,临床症状及血常规等实验室指标好转;+83 d检测血CMV-PP65及CMV脱氧核糖核酸(CMV-DNA)转阳,+86 d因严重肺部感染、肺出血、消化道出血及多器官功能衰竭而死亡。结论异基因造血干细胞移植后aGVHD及抗aGVHD的免疫抑制治疗,是引起移植后CMV感染相关HLH的危险因素;HLH-2004方案未考虑到异基因造血干细胞移植后HLH的特殊性,需进一步研究有针对性的治疗方案,以提高疗效。
- 翁文骏方建培陈纯黎阳黄科薛红漫徐宏贵郭海霞
- 关键词：异基因造血干细胞移植巨细胞病毒感染噬血细胞性淋巴组织细胞增生症
- 儿童造血干细胞移植后噬血细胞性淋巴组织细胞增生症2例并文献分析
- 2012年
- 目的对造血干细胞移植术后噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(post-HSCT-HLH)的临床特点进行总结,以提高对该病的认识,改善治疗效果。方法对中山大学孙逸仙纪念医院2005年1月和2006年8月收治的2例儿童post-HSCT-HLH及医学引文索引(MEDLINE)检索到的11例患儿,共13例进行回顾性分析。结果 post-HSCT-HLH诊断时的年龄中位数为7.5岁(2～16岁),13例中7例存在诱发HLH感染的因素。临床表现主要为发热(13/13)、肝脾肿大(5/6)、植入失败、植入延迟或植入继发失败(13/13)、骨髓见"噬血现象"(13/13)、高血清铁蛋白血症(13/13)、血清乳酸脱氢酶(LDH)水平升高(8/9)、甘油三酯升高(5/5)、低纤维蛋白原血症(4/5)、可溶性白介素-2受体升高(8/8)、自然杀伤细胞比例下降(2/2)。post-HSCT-HLH治疗包括:积极控制感染,可选用激素、免疫球蛋白、小剂量、短疗程依泊托苷(VP16)及予第二次造血干细胞移植,应用上述方法治疗的10例均能完全缓解,其中3例随访1年以上仍无病存活,予标准"HLH2004"方案的3例患儿均于发病1年内死亡。结论 post-HSCT-HLH是一种少见且危险的并发症,需及时准确诊断,选用激素、免疫球蛋白、小剂量、短疗程VP16及予第二次造血干细胞移植,治疗效果较好;HLH2004方案不适合post-HSCT-HLH。
- 翁文骏方建培许吕宏张亚停徐宏贵黄科郭海霞黎阳
- 关键词：造血干细胞移植噬血细胞性淋巴组织细胞增生症儿童
- 减停免疫抑制剂诱发移植物抗宿主病治疗儿童ABO血型不合移植后纯红细胞再生障碍性贫血1例及文献复习被引量：3
- 2012年
- 目的探讨ABO血型不合移植后合并纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的发生机制及治疗对策。方法报道1例重型地中海贫血患儿接受ABO血型不合的无关供者外周血造血干细胞移植(URD-PBSCT)后合并PRCA病例并进行文献复习。结果患儿接受ABO血型不合的URD-PBSCT获得成功后出现PRCA,依赖红细胞输注伴ABO血型抗体滴度显著升高,通过减停免疫抑制剂诱发移植物抗宿主病(GVHD)后,ABO血型抗体滴度显著下降,网织红细胞、血红蛋白和骨髓象随之恢复正常。结论免疫紊乱及ABO血型抗体是ABO血型不合移植后PRCA的最可能原因,减停免疫抑制剂诱发GVHD是治疗ABO血型不合移植后PRCA的一种优先考虑的选择,但需要注意GVHD的有效控制。
- 翁文骏陈志峰夏修贤方建培
- 关键词：贫血移植物抗宿主病
- 以旋股外侧动脉降支为蒂分叶股前外侧肌皮瓣设计的解剖学研究被引量：102
- 2010年
- 目的为以旋股外侧动脉降支为蒂的分叶股前外侧肌皮瓣的设计与临床应用提供解剖学基础。方法新鲜下肢标本20侧,动脉灌注红色乳胶,重点观察动脉进入股外侧肌的部位,及其在股外侧肌内的分支、分布与吻合情况。结果 (1)80.8%的降支发自旋股外侧动脉,外径(3.7±0.9)mm,于股直肌深面,沿股外侧肌前缘下降,在起始下方(9.0±3.5)cm处分为内、外两侧支。(2)外侧支营养股外侧肌,肌外血管蒂长(8.1±3.3)cm,在股外侧肌中段肌内行走的全程发出6.6支口径1.0mm的肌支或肌皮支,平均支间距(1.9±0.9)cm。(3)股前外侧部出现皮支(2.5±1.2)支,外径(0.8±0.3)mm,其中肌间隙穿支占23.8%,而肌皮穿支占76.2%。57.7%(15侧)肢体有高位皮动脉出现。结论 (1)可以设计以旋股外侧动脉降支为蒂的分叶股前外侧肌皮瓣,并用不同部位的血管支的距离来调整肌瓣和肌皮瓣的叶间距离,修复不同的创面。(2)以旋股外侧动脉降支为蒂的分叶股前外侧肌皮瓣是临床修复复杂创面的一种极佳选择。
- 陈胜华徐达传周小兵安高钟光明吴坤成
- 关键词：旋股外侧动脉降支股前外侧皮瓣
