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抑制PI3K信号通路促进TRAIL诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡: 2014年; 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对癌细胞有独特的细胞毒性作用,而对正常细胞没有影响.但乳腺癌细胞耐受TRAIL诱导凋亡.本研究探索磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞耐受TRAIL的影响.采用MTT法、显微照相以及DAPI染色观察TRAIL对MCF-7细胞生长的抑制作用以及诱导细胞凋亡状况;流式细胞分析细胞凋亡的情况;激光共聚焦显微镜观察多聚ADP核糖多聚酶-1(poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)的迁移和定位;Western印迹分析死亡受体、caspase-3/8、磷酸化的AKT[pAKT(Ser473)]、Src和PARP-1等蛋白质表达.结果显示,小剂量TRAIL(<80 nmol/L)和Ly294002(<40μmol/L)对MCF-7细胞生长没有显著的抑制作用,但是大剂量TRAIL(160 nmol/L)和Ly294002(80μmol/L)则能抑制MCF-7细胞生长;低剂量Ly294002协同TRAIL抑制MCF-7细胞生长,并诱导细胞凋亡;Ly294002和TRAIL共同作用能促进PARP-1从胞浆进入细胞核;蛋白质表达分析显示,MCF-7细胞均表达死亡受体DR4、DR5、诱骗受体DcR1和DcR2、以及caspase-8,但是不表达caspase-3;Ly294002和TRAIL共同作用也能抑制pAKT(Ser473)和Src的表达,并且导致PARP-1断裂.本研究结果提示,抑制PI3K信号可增加MCF-7细胞对TRAIL诱导的敏感性;MCF-7细胞通过PI3K/AKT途径促进Src的表达耐受TRAIL的细胞毒性作用;Ly294002联合TRAIL是一种新的药物组合方式治疗乳腺癌.; 朱明月李伟夏华鲁琰董栩陈栘郭峻莉符史干谢协驹李孟森; 关键词：乳腺癌细胞凋亡 PI3K信号通路

抑制PI3K信号促进TRAIL诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡: 目的:研究磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径对人乳腺癌细胞MCF-7耐受肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor relat...; 朱明月李伟夏华鲁琰董栩陈栘郭峻莉符史干谢协驹李孟森; 关键词：乳腺癌细胞; 文献传递

甲胎蛋白调节肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2表达及其对Bel 7402细胞耐受该配体的影响被引量：3: 2010年; 目的研究甲胎蛋白（AFP）对肝癌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）受体-2（DR5）表达及其在肝癌细胞耐受TRAIL中的作用.方法用Western blot法分析全反式维甲酸（ATRA）处理人肝癌细胞株Bel 7402细胞24 h后DR5表达的变化;免疫共沉淀（Co-IP）技术研究AFP与维甲酸受体（RAR）-β相互作用;激光共聚焦显微镜观察AFP与RAR-β的细胞共定位; RNA干扰技术抑制Bel 7402细胞AFP表达,再用ATRA处理24h后检测细胞内DR5表达的变化;用pcDNA3.1质粒和人AFP基因连接构建表达AFP的载体（称为pcDNA3.1-afp）,然后转染到不表达AFP的人肝癌细胞株HLE细胞;细胞生长状况用四甲基偶氮唑盐法检测.组间比较用f检验进行统计学分析.结果 Bel 7402和HLE细胞低表达DR5,ATRA（160μmol/L）处理24h后能促进肝癌细胞DR5表达; Co-IP技术研究显示AFP能与RAR-β结合;共聚焦显微镜观察发现AFP与RAR-β共定位于细胞质;干扰AFP表达后,Bel 7402细胞的DR5表达明显提高,抑制AFP表达后,ATRA能显著促进Bel 7402细胞内DR5的表达,并增加Bel 7402细胞对TRAIL的敏感性;转染pcDNA3.1-afp载体后,HLE细胞内的AFP能与RAR-β结合,并发现pcDNA3.1-afp载体能对抗TRAIL诱导HLE细胞凋亡.结论 Bel 7402细胞内表达的AFP具有抑制DR5表达的生物学功能;AFP可能通过抑制RAR-β入核调节DR5的表达;细胞内高表达的AFP是导致Bel 7402细胞耐受TRAIL诱导细胞凋亡的重要原因.; 林尤仕朱明月周升谢协驹李孟森; 关键词：肝细胞甲胎蛋白

甲胎蛋白:治疗肝癌的新靶点被引量：4: 2014年; 甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)在肝癌发生过程中所起的生物学作用一直是个谜。由于其是肝癌细胞高特异性表达的蛋白质,临床上作为诊断肝癌的金标准,但是AFP在肝癌发生过程有何功能并不清楚。最近我们的研究发现,AFP具有信息调控分子样作用,AFP不仅能与维甲酸受体-β(RAR-β)结合,阻遏RAR-β进入细胞核内调节靶基因的表达,同时也能抑制Caspase-3的活性,阻断凋亡信号的传递,更重要的是AFP激活PI3/AKT等生长信号途径,提示AFP具有抗凋亡诱导的功能,靶向抑制AFP表达能增加肝癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和全反式维甲酸(ATRA)的敏感性,新发现AFP的这些功能,预示它是肝癌细胞耐药的新靶点,为肝癌的生物治疗提供新的思路和策略。; 朱明月李孟森; 关键词：甲胎蛋白肝癌新靶点

甲胎蛋白激活PI3K/AKT信号促使肝癌Bel7402细胞抗ATRA诱导凋亡: 目的:研究甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)对肝癌细胞内PI3K/AKT信号传递的影响,及其在癌细胞耐受全反式维甲酸(All trans retinoic acid,ATRA)的作用。方法:MTT法检...; 朱明月夏华李伟鲁琰董栩陈栘符史干谢协驹李孟森; 关键词：ALPHA-FETOPROTEIN; 文献传递

乙型肝炎病毒驱动甲胎蛋白表达诱导肝细胞恶性转化的分子机制被引量：1: 2013年; 肝癌细胞的恶性转化与感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)和丙型肝炎病毒密切相关.但是HBV没有直接诱导肝癌发生的生物学功能,HBV可通过其x蛋白(HBx)激活生长信号,促进癌基因的表达从而诱导肝细胞恶性转化.在肝细胞恶性转化过程的早期,甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)基因被激活,而AFP能激发PI3K/AKT信号传递,由于PI3K/AKT信号途径具有促进细胞恶性转化的作用,所以AFP的表达在HBV诱导肝细胞恶性转化过程发挥关键性作用.本文就HBV通过优先驱动AFP表达促进肝癌细胞增殖和自然重编程从而诱发肝癌的分子机制进行阐述,对认识AFP在HBV相关性肝癌发生过程中的作用以及预警肝癌发生有重要的科学意义.; 朱明月夏华李孟森; 关键词：乙型肝炎病毒甲胎蛋白

甲胎蛋白激活PI3K/AKT信号促使肝癌Bel 7402细胞抗全反式维甲酸诱导凋亡被引量：4: 2014年; 目的研究甲胎蛋白（AFP）对肝癌细胞内PI3K/AKT信号传递的影响,以及其在癌细胞耐受全反式维甲酸（ATRA）中的作用. 方法四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测ATRA对人肝癌Bel 7402细胞增殖的影响;显微照相观察细胞形态学的改变;流式细胞分析细胞凋亡;激光共聚焦显微镜观察AFP与PTEN的共定位;免疫共沉淀（Co-IP）技术研究AFP与PTEN相互作用;Westemblot法分析磷酸化的蛋白激酶B（pAKT）和Src表达,构建干扰AFP表达的载体（AFP-siRNA）并转染Bel 7402细胞;用PI3K特异性阻断剂Ly294002处理细胞,分析Ly294002的作用效果.通过t检验分析组间的统计学差异. 结果 MTT分析显示,人肝癌Bel 7402耐受ATRA的细胞毒性;共聚焦显微镜观察显示AFP与PTEN共定位于细胞质;Co-IP技术研究发现AFP能与PTEN结合;MTT分析发现,Bel 7402细胞转染AFP-siRNA载体后24 h后,细胞生长显著受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,而且AFP-siRNA载体和ATRA共同处理组,细胞生长受到抑制更为显著,与对照组、单独处理组比较,差异均有统计学意义（P＜ 0.01）;干扰AFP表达能显著增加Bel 7402细胞对ATRA敏感性,并能抑制pAKT和Src的表达;Ly294002能抑制AFP促进Bel 7402细胞表达pAKT和Src的作用.结论肝癌细胞内表达的AFP能与PTEN结合并抑制PTEN对AKT的去磷酸化作用,肝癌细胞内高表达的AFP能激活PI3K/AKT信息通路对抗ATRA诱导的凋亡.; 朱明月郭峻莉夏华李伟鲁琰董栩陈栘符史干谢协驹李孟森; 关键词：甲胎蛋白 PI3K/AKT信号通路全反式维甲酸

曲古抑菌素A增加人肝癌Bel7402细胞对TRAIL的敏感性: 目的探讨曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对肝癌细胞Bel7402增殖凋亡的影响...; 李伟朱明月董栩夏华陈栘鲁琰谢协驹符史干李孟森; 关键词：肝癌细胞曲古抑菌素A 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞凋亡; 文献传递

番木瓜种子提取物异硫氰酸苄酯对肝癌细胞凋亡的影响: 目的:了解临床分离的携带新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)基因的阴沟肠杆菌耐药性及NDM-1的鉴定。方法:临床分离的2株阴沟肠杆菌用法国生物梅里埃公司的VITEK-2全自动细菌分析系统进行鉴定,用IP/IPI E-...; 朱明月李伟鲁琰蔡小妹董栩陈栘李孟森; 关键词：肝癌细胞细胞凋亡细胞周期; 文献传递

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海南省自然科学基金(309034)

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