国家自然科学基金(31270339)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 一个新的忽地笑O-甲基转移酶基因的克隆与原核表达被引量：3
- 2014年
- 采用RACE技术克隆得到一个新的忽地笑O-甲基转移酶(OMT)基因,命名为LaOMT。LaOMT的cDNA序列为1 379 bp,开放阅读框1 077 bp,预测编码蛋白包含358个氨基酸。序列比对分析发现,LaOMT编码的蛋白序列具有依赖于S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)的高度保守的结构域,与葡萄、大豆等其他植物OMTs蛋白的相似性为50%左右。将LaOMT基因连接到原核表达载体pET28a上,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)的SDS-PAGE电泳结果显示,重组蛋白受异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,分子量大小约为45 kDa,与已报导的其他植物的OMTs蛋白大小基本一致。此外,半定量RT-PCR分析结果表明,LaOMT在忽地笑的叶、鳞茎、根和花中均有表达,其中花中的表达量最低。
- 别庆玲徐晟傅江燕夏冰汪仁
- 关键词：忽地笑加兰他敏原核表达O-METHYLTRANSFERASE
