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国家自然科学基金(81360178)

作品数:14 被引量:12H指数:2
相关作者:齐晓岚官志忠吴昌学李毅张淑丽更多>>
相关机构:贵州医科大学贵阳医学院教育部更多>>
发文基金:国家自然科学基金贵州省科技厅重大专项长江学者和创新团队发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 14篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 10篇细胞
  • 9篇SH-SY5...
  • 8篇基因
  • 6篇蛋白
  • 4篇受体
  • 4篇尼古丁受体
  • 4篇阿尔茨海默病
  • 3篇神经细胞
  • 3篇突触
  • 3篇基因沉默
  • 3篇激动剂
  • 3篇海马
  • 3篇海马组织
  • 3篇P38_MA...
  • 3篇SH-SY5...
  • 3篇沉默
  • 3篇NACHR
  • 2篇蛋白表达
  • 2篇信号
  • 2篇通路

机构

  • 12篇贵州医科大学
  • 2篇贵阳医学院
  • 2篇教育部
  • 1篇贵阳医学院附...
  • 1篇贵阳市第四人...

作者

  • 14篇官志忠
  • 14篇齐晓岚
  • 8篇吴昌学
  • 7篇李毅
  • 5篇王晓玲
  • 5篇张淑丽
  • 4篇周飞
  • 4篇吕园园
  • 2篇王晓玲
  • 2篇王凡
  • 1篇任家谋
  • 1篇肖雁

传媒

  • 9篇中风与神经疾...
  • 4篇中国老年学杂...
  • 1篇贵阳医学院学...

年份

  • 2篇2018
  • 5篇2017
  • 5篇2016
  • 1篇2014
  • 1篇2013
14 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
α7神经型尼古丁受体基因抑制对SH-SY5Y细胞Tau和配对螺旋样纤维蛋白1水平的影响被引量:2
2016年
目的探讨α7神经型尼古丁受体(n AChR)基因沉默对SH-SY5Y细胞Tau和配对螺旋样纤维蛋白(PHF)1水平的影响及α7n AChR在阿尔茨海默病(AD)发病机制中的作用。方法 SH-SY5Y细胞转染α7 n AChR shRNA重组质粒,用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别测定细胞中α7 n AChR在mRNA和蛋白表达水平的变化;用Western印迹法检测细胞Tau和PHF1蛋白水平。结果α7 n AChR基因沉默组与空质粒组相比,α7 n AChR mRNA和蛋白质表达水平分别降低了94%(P<0.01)和82%(P<0.01);Tau蛋白水平升高了65%(P<0.01);PHF1蛋白水平升高了58%(P<0.05)。结论α7 n AChR基因表达抑制后Tau和PHF1蛋白水平明显升高,Tau蛋白和PHF1蛋白表达增加直接促进神经元纤维缠结的形成,这可能与AD的病理进程有一定关系。
周飞张淑丽李毅王凡官志忠齐晓岚
关键词:阿尔茨海默病TAU
α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对小鼠海马组织突触相关蛋白的影响被引量:1
2018年
目的探讨特异性激动小鼠α7神经型尼古丁受体(α7n AChR)水平对海马组织中突触相关蛋白表达的影响。方法选取6月龄非转基因C57雄性小鼠32只,随机分为对照组(Control),腹腔注射0.5、1.0 mg/kg、3.0 mg/kg PNU282987组各8只。采用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western印迹)法分别测定小鼠海马组织中囊泡相关蛋白突触素(Syn)、突触小体相关蛋白(SNAP)-25和突触后致密物(PSD)-95 mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,1.0 mg/kg PNU282987组、3.0 mg/kg PNU282987组中突触相关蛋白Syn、PSD-95、SNAP-25的mRNA和蛋白表达水平均显著增高。结论特异性激动小鼠α7n AChR能够使海马组织中突触相关蛋白水平表达增加。这可能提示了α7n AChR与突触密切相关,这可能与其神经保护作用有关。
王晓玲邓于新董阳婷官志忠官志忠
关键词:突触
SH-SY5Y细胞α7尼古丁受体蛋白抑制对tau蛋白及p38 MAPK通路的影响及其与AD发病机制的关系被引量:3
2017年
目的研究α7尼古丁受体(nAChR)蛋白抑制对SH-SY5Y细胞tau蛋白磷酸化水平的影响及其与p38 MAPK通路的关系,探讨α7 nAChR调节tau蛋白磷酸化的相关机制。方法用α7 nAChR阻断剂MLA阻断SH-SY5Y细胞α7 nAChR蛋白的活化及其表达,用p38 MAPK阻断剂SB203580阻断SH-SY5Y细胞p38 MAPK信号通路蛋白的活化及其表达,Western blotting方法测定tau蛋白、p-tau(S404)、p-tau(S214)、α7 nAChR、p38 MAPK及p-p38 MAPK(Thr180/Tyr182)蛋白表达水平。结果细胞经MLA处理后,p-tau(S404)和p-tau(S214)蛋白水平明显升高(P<0.01),p-p38 MAPK和α7 nAChR蛋白水平明显降低(P<0.01),tau蛋白和p38 MAPK蛋白水平保持不变;经SB203580处理后,SB203580及MLA共同处理后均引起p-tau(S404)、p-tau(S214)、p-p38 MAPK和α7nAChR蛋白水平显著降低(P<0.01),tau蛋白和p38 MAPK蛋白水平无变化。结论α7 nAChR可通过阻断p38MAPK信号传导通路抑制tau蛋白过度磷酸化。
周飞李毅吴昌学官志忠齐晓岚
关键词:NACHR
α7尼古丁受体基因抑制对SH-SY5Y细胞胆碱酯酶及胆碱乙酰化酶水平的影响
2013年
目的采用RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)中α7神经型尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)基因表达,了解对细胞胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰化酶(ChAT)水平的影响。方法 SH-SY5Y细胞转染针对α7 nAChR的小干扰RNA(siRNA),用real-time PCR法和Western blotting法分别测定细胞中α7nAChR、AChE及ChAT在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果转染α7 nAChR siRNA后,与对照组相比,α7nAChR mRNA及蛋白表达水平明显降低;α7 nAChR基因表达抑制能明显升高AChE及ChAT mRNA和蛋白表达水平,尤其是AChE的表达水平。结论α7 nAChR基因表达抑制可能通过增加细胞AChE水平而增加神经递质乙酰胆碱的分解,而ChAT的表达升高可能为一种代偿机制,这可能与阿尔茨海默氏病(AD)的发病有一定的关系。
李毅王凡吴昌学官志忠齐晓岚
关键词:胆碱酯酶胆碱乙酰化酶
SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体基因过表达对CaMK Ⅱ和CREB的影响被引量:1
2016年
目的研究SH-SY5Y神经细胞中α7 nAChR基因过表达对CaMKⅡ和CREB的影响。方法复苏稳定转染α7 nAChR-pc DNA3.1质粒及空载质粒的SH-SY5Y神经细胞后,用含G418的培养液进行筛选培养;应用实时荧光定量PCR法和蛋白印迹法(Western blot)检测α7 nAChR基因过表达组、空载质粒组和正常对照组细胞中CaMKⅡ、CREB mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,α7 nAChR基因过表达细胞组的CaMKⅡ、CREB mRNA表达水平分别增加了116.8%和114.7%(P<0.01);及CaMKⅡ、CREB蛋白表达水平分别增加了8.7%(P>0.05)和41.4%(P<0.05)。结论α7 nAChR的神经保护作用可能与上调细胞CaMKⅡ、CREB水平有关。
吕园园张淑丽吴昌学王晓玲官志忠齐晓岚
关键词:NACHRSH-SY5Y细胞CREB
SH-SY5Y细胞α7尼古丁受体基因沉默对tau蛋白磷酸化水平及p38 MAPK信号通路的影响
2016年
目的研究α7尼古丁受体(nAChR)沉默对SH-SY5Y细胞tau蛋白磷酸化水平和p38 MAPK通路的影响,探讨α7 nAChR对tau蛋白磷酸化的调节作用及其与p38 MAPK通路的关系。方法 Real-time PCR法和Western blotting法分别测定α7 nAChR沉默细胞中α7 nAChR在mRNA和蛋白表达水平的变化;Western blotting法检测细胞tau蛋白、p-tau(S404)、p-tau(S214)、p38 MAPK和p-p38 MAPK(Thr180/Tyr182)蛋白水平。结果α7nAChR沉默组与空质粒组相比,α7 nAChR mRNA和蛋白质水平分别降低了91%(P<0.01)和80%(P<0.01);tau蛋白水平升高了79%(P<0.01);p-tau(S404)蛋白水平升高了74%(P<0.01);p-tau(S214)蛋白水平升高了72%(P<0.01);p38蛋白水平升高了64%(P<0.01);p-p38蛋白水平升高了67%(P<0.01)。结论α7 nAChR沉默可导致tau蛋白过度磷酸化,这可能和激动p38 MAPK通路有一定关系。
周飞吴昌学李毅官志忠齐晓岚
关键词:TAUP38MAPK
α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对APP/PS1小鼠海马组织中AP180蛋白表达的影响
2017年
目的探讨特异性激动APP/PS1转基因小鼠中的α7nAChR后其海马组织中突触后膜蛋白的表达变化。方法选择16只经过鉴定的APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组(APP/PS1)和APP/PS1+PNU282987组(AP),每组各8只;另选16只野生型小鼠随机分为对照组(Control)和野生+PNU282987组(WP),每组各8只。饲养小鼠达到24周龄后,AP组和WP组于每天进行Morris水迷宫行为学测试前4 h腹腔注射PNU282987(1 mg/kg/d),之后利用Morris水迷宫进行行为学测试,Real-time PCR及Western blotting法分别检测各组小鼠海马组织中AP180 mRNA及蛋白水平的表达情况。结果与对照组比较,APP/PS1组海马组织中AP180 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.01);而特异性激动α7 nAChR水平后,WP组中AP180 mRNA和蛋白水平升高(P<0.01,P<0.05);与APP/PS1组相比AP组小鼠大脑海马组织中AP180 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.01,P<0.01)。结论特异性激动APP/PS1转基因小鼠海马组织中α7 nAChR能够使网格蛋白介导的突触囊泡内吞过程中的关键蛋白AP180表达水平升高。这可能提示了α7nAChR对突触有一定的保护作用,进一步说明α7nAChR在阿尔茨海默病的发病中起着重要作用。
邓于新王晓玲王晓玲官志忠吴昌学
关键词:阿尔茨海默病
α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对APP/PS1小鼠海马组织中DYN-Ⅰ蛋白表达的影响
2017年
目的研究特异性激动APP/PS1转基因小鼠脑组织中α7神经型尼古丁受体(α7 nAChR)水平后对海马组织DYN-Ⅰ蛋白的影响;探讨α7 nAChR在阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发病机制中的神经保护作用机制。方法实验动物分为对照组(Control)、野生加PNU282987组(WP)、APP/PS1转基因组(APP/PS1)和APP/PS1加PNU282987组(AP)各8只,WP和AP组给予α7 nAChRs特异性激动剂PNU-282987,另两组给予生理盐水,给药方式为小鼠24 w龄时1 mg/kg腹腔注射PNU-282987,连续5 d。采用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western Blot)法分别测定小鼠海马组织中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白表达水平的变化。结果与control组相比,APP/PS1组海马组织中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白水平下降(P<0.05,P<0.01);而特异性激动α7 nAChR水平后,与对照组相比WP组中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白水平升高(P<0.05,P<0.01);与APP/PS1组相比AP组小鼠大脑海马组织中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.01,P<0.01)。结论特异性激动APP/PS1转基因小鼠海马组织中α7 nAChR水平能够使网格蛋白内吞调节蛋白DYN-Ⅰ表达升高。这可能提示了α7 nAChR对突触有一定的保护作用,进一步说明α7 nAChR在阿尔茨海默病的发病中起着重要作用。
王晓玲王晓玲董阳婷官志忠官志忠王凡
关键词:阿尔茨海默病
α3神经型尼古丁受体基因上调对SH-SY5Y细胞突触素水平的影响
2018年
目的构建使α3nAChR基因上调的重组质粒α3nAChR-pcDNA3.1并转染至神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),研究α3nAChR基因上调对细胞突触素(SYP)水平的影响。方法设计α3nAChR上下游引物,通过逆转录PCR的方法获取人α3nAChR特异核苷酸序列,并将其克隆到质粒载体pcDNA3.1上,构建重组质粒α3nAChR-pcDNA3.1;瞬时转染至SH-SY5Y细胞后,用Real-time法和蛋白免疫印迹法分别α3nAChR及蛋白水平,并检测上调细胞中SYPmRNA和蛋白水平的变化。结果成功构建了使α3nAChR基因上调的重组质粒α3nAChRpcDNA3.1;将α3nAChR-pcDNA3.1质粒转染到SH-SY5Y细胞后,与空载质粒组及正常对照组相比,α3nAChRmRNA及蛋白表达水平分别增加了422%和106%(P<0.05);SYPmRNA及蛋白表达水平分别增加了115%和43%(P<0.05)。结论α3nAChR表达的上调可使细胞SYP的表达增加,说明了α3nAChR与SYP密切相关,在AD的发生中可能起着重要作用。
吕园园齐晓岚齐晓岚李毅官志忠
关键词:SH-SY5Y细胞
SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体基因过表达对钙调蛋白表达的影响被引量:1
2017年
目的构建稳定的α7神经型尼古丁受体(α7 nAChR)过表达的神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,研究α7 nAChR过表达对钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法设计α7 nAChR引物并扩增α7 nAChR特异性编码的核苷酸序列,退火后克隆至pc DNA 3.1质粒,构建α7 nAChR-pcDNA 3.1重组质粒。将α7 nAChR-pcDNA 3.1重组质粒转染SH-SY5Y细胞,用含G418的培养液筛选,挑选阳性克隆后采用实时荧光定量(Realtime)PCR和蛋白质印迹方法检测转染细胞中α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化,蛋白质印迹方法检测CaM表达水平的变化。结果构建的α7 nAChR mRNA过表达质粒成功转入SH-SY5Y细胞后,经G418筛选获得稳定转染细胞克隆株,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达量分别增加了533%和110%,CaM表达量增加了43%。结论成功构建了α7 nAChR mRNA过表达的SH-SY5Y细胞株,α7 nAChR表达上调增加了CaM表达水平,这可能与阿尔茨海默病的发病有一定的关系。
张淑丽吕园园官志忠李毅齐晓岚
关键词:钙调蛋白SH-SY5Y细胞
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