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HIV感染者CD_4^+调节性T细胞与HIV DNA呈正相关被引量：3: 2012年; 目的分析CD4+调节性T细胞与艾滋病病毒(HIV)脱氧核糖核酸(DNA)之间的关系。方法随机选择门诊病人50例,采用流式细胞仪细胞内染色技术检测CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞的水平,并用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测外周血单个核细胞中的DNA水平,分析CD4+调节性T细胞与CD4计数、病毒载量及HIV-1DNA之间的相关性。结果在HIV感染病人CD4+调节性T细胞与HIV DNA呈正相关,与CD4计数呈正相关,与病毒载量呈负相关。结论未进行治疗的HIV病人,其CD4+调节性T细胞与HIV DNA呈正相关,说明CD4+调节性T细胞越多,HIV-1DNA越多,CD4+调节性T细胞可能对机体发挥不利的作用。; 郭彩萍画伟计云霞张彤陈德喜吴昊焦艳梅; 关键词：调节性T细胞艾滋病病毒感染者脱氧核糖核酸

APOBEC3G对HIV-1及其Vif缺失株的抑制作用被引量：1: 2011年; 目的研究细胞内在抗病毒因子APOBEC3G对HIV-1及其Vif缺失株的抑制作用。方法 HIV-1野生株病毒(BH10WT)和Vif缺失株病毒(BH10ΔVif)分别由转染293T细胞获得,通过感染MT4和H9细胞,分别检测其反转录酶活性。用分子克隆技术构建APOBEC3G与绿色荧光蛋白融合表达的质粒pEGFP-3G。HIV-1野生株和Vif缺失株质粒与不同剂量的pEGFP-3G共转染293T细胞,APOBEC3G-GFP在细胞内融合表达定位通过荧光显微镜观察。所生成的子代病毒粒子的感染力分别由MAGI检测和反转录酶活性检测方法定量。结果 BH10 WT病毒在H9细胞和MT4细胞中均有所复制,在感染MT4细胞后4 d已经具有较高的反转录酶活性。BH10ΔVif病毒感染H9细胞产生的子代病毒的反转录酶活性接近细胞对照水平,而其在MT4细胞中产生的子代病毒的反转录酶活性在感染后12 d有所显现,即非允许性H9细胞内APOBEC3G对ΔVif病毒株具有很强的抑制作用。与绿色荧光蛋白融合表达的APOBEC3G蛋白定位于细胞质。BH10ΔVif转染293T细胞后生成的病毒滴度为2.75×104 U/mL,随着pEGFP-3G共转染量的升高,所产生的子代病毒滴度从1.48×103 U/mL显著降至0.33×103 U/mL。与0.2μg质粒pEGFP-3G共转染产生的BH10ΔVif病毒的感染力比不表达APOBEC3G的相同病毒的感染力降低近20倍。结论 APOBEC3G具有抗HIV活性,同时HIV Vif在病毒复制过程中发挥关键作用,两者之间相互作用的量效关系为我们构建抗病毒药物筛选平台奠定了可靠的实验基础。; 李岚曾毅; 关键词：HIV-1

整合型HIV-1检测方法的建立与应用被引量：4: 2009年; 对于HIV-1感染的患者，高效抗逆转录病毒治疗（HAART）能够使血浆中病毒降低到检测不到的水平。即使是抗病毒治疗非常有效，在细胞中仍然存在HIV-1 DNA。国外最近的研究表明，HIV-1 DNA水平与疾病进展、疗效及病毒的抑制水平有潜在的相关性。HIV-1 DNA可以线性非整合、环状非整合或整合的形式存在。整合的HIV-1前病毒可形成病毒潜伏库，这种潜伏库的半衰期非常长，Siliciano等报道其半衰期大概为44个月，病毒在这种状态下，免疫反应或抗病毒治疗对其不起作用，; 画伟刘志英魏飞力张彤陈德喜吴昊焦艳梅; 关键词：HIV-1感染高效抗逆转录病毒治疗整合型 DNA水平抗病毒治疗疾病进展

HAART早期AIDS患者CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的变化及其与免疫活化关系的研究被引量：2: 2010年; 目的了解高效抗反转录病毒联合疗法(highly active antiretroviral the rapy,HAART)早期AIDS患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)的变化规律,探讨抗病毒治疗过程中Treg细胞的作用。方法前瞻性分析21例接受HAART规律治疗的AIDS患者,收集患者服药前及服药第2、4、8、12周时的静脉血,采用流式细胞仪胞内染色技术检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的水平,分析Treg细胞在治疗过程中的变化规律,以及Treg细胞的变化与免疫活化间的相关性。结果 HAART治疗开始,Treg细胞计数呈逐渐上升的趋势,前4周呈现快速上升,而后上升速度减慢,Treg百分比变化也有相似的规律;CD8+CD38+表达水平随治疗时间延长而下降,未治疗时Treg细胞计数与免疫活化水平呈负相关,治疗后Treg细胞计数4周内的变化与12周CD8+CD38+水平呈负相关,即治疗开始后,前4周内Treg细胞增加越明显,治疗3个月时免疫活化水平下降越明显。结论抗病毒治疗过程中,活化CD8+淋巴细胞比例的下降与外周血中Treg细胞数的增加相关。Treg细胞数量恢复越早,活化CD8+淋巴细胞比例下降越明显。; 焦艳梅画伟田亚坤李娟计云霞王蕊陈德喜吴昊张彤; 关键词：人类免疫缺陷病毒高效抗反转录病毒治疗

艾滋病病毒／乙型肝炎病毒重叠感染对肝脏损伤的比较分析被引量：2: 2008年; 通过回顾性分析艾滋病病毒／乙型肝炎病毒（HIV／HHV）重叠感染患者、单纯HIV感染者、单纯HBV感染者的肝脏损伤和功能的差异以及病毒载量与肝功能之间的关系，探讨HIV／HBV在疾病进展中的相互作用。; 李伟华闫惠平李传云计云霞檀玉芬; 关键词：人免疫缺陷病毒乙型肝炎病毒

北京地区男男性接触人类免疫缺陷病毒感染者人类白细胞抗原-Ⅰ类分子多态性对病毒载量的影响被引量：3: 2013年; 目的分析北京地区男男性接触人群HIV感染者人类白细胞抗原（HLA）-I的多态性及其对病毒载量的影响。方法用序列特异性引物一聚合酶链反应（SSP—PCR）对157例慢性HIV感染者的HLA—A、HLA-B、HLA-C等位基因分型，同时检测HIV载量。正态分布的计量资料采用单因素或多因素方差分析，非正态分布的计量资料用Mann-WhitneyU检验。结果157例HIV感染者中，HLA-B携带Bw4表位簇个数与低病毒载量有关（F=3．01，P=0．045），HLA-B携带Bw4／4纯合子的感染者HIV载量为（4．19±0．76）lgIU／mL，Bw6／6纯合子的感染者为（4．63±0．74）lgIU／mL（t=2．27，P=0．010）。HLA—A、HLA—B同时携带3个Bw4的感染者HIV载量为（3．92±0．97）lgIU／mL，显著低于携带1个Bw4的感染者HIV载量（4．54-4-0．88）lgIU／mL和不携带Bw4者HIV载量（4．60±0．72）lgIu／mL（t=2．11，P=0．039；t=2．53，P=0．015）。HLA—I类分子（HLA—A、HLA—B、HLA—c）均携带杂合子的感染者，其病毒载量与任一座位携带纯合子的感染者病毒载量比较，差异无统计学意义。HLA_I类分子均携带杂合子且HLA—B携带Bw4／4纯合子的感染者其HIV载量中位数为4．。glgIU／mL，低于HLA-B携带Bw6／6纯合子感染者的4．551gIU／mL（U=210．50，P=0．041）。携带A30／B13／C06单体型或A33／B58／C03单体型的感染者其HIV载量与不携带A30／B13／C06单体型或A33／B58／C03单体型感染者比较，差异无统计学意义（t=0．40，P=0．69；t=0．68，P=0．49）。结论HIV感染者HLA—B携带Bw4／4纯合子与低病毒载量有关，且HLA-I类分子携带杂合子的个体可受HLA—B携带Bw4／4纯合子影响，这些HIV感染者病毒载量更低。; 张欣王熠王爽李伟华胡文静赵丹彤闫惠平; 关键词：HIV感染 HLA-B抗原纯合子病毒载量

调节性CD4^+T细胞及非调节性CD4^+T细胞与HIV/AIDS患者疾病进展关系的研究被引量：6: 2010年; 目的分析比较中国HIV感染者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+regulatory T cells,Treg)及非Treg细胞与疾病进展的关系,探讨Treg细胞在HIV感染过程中的作用。方法选取76例HIV/AIDS患者,根据其CD4+T细胞计数水平不同分为3组,A组CD4<200个/μL,B组CD4200～400个/μL,C组CD4>400个/μL。采用流式细胞仪胞内染色技术检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的水平,并分析其与CD4计数及病毒载量的相关性。结果随着疾病的进展,Treg细胞百分比逐渐升高,各组间差异有统计学意义;Treg细胞及非Treg细胞的绝对计数均明显下降,且以非Treg细胞下降为主;Treg绝对计数与病毒载量呈负相关(P<0.05)。结论中国HIV感染者随着疾病进展,辅助性T细胞等非Treg细胞的数量下降,对机体免疫保护能力降低,而Treg细胞数量及功能的下降使其对机体的过度免疫活化的抑制作用减弱,病毒复制,加剧病情进展。; 画伟焦艳梅田亚坤李娟计云霞王蕊张彤陈德喜吴昊; 关键词：调节性T细胞人类免疫缺陷病毒

TRIM5α抗HIV-1功能的研究被引量：1: 2011年; 目的研究TRIM5α抗HIV-1功能。方法从vero细胞中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术获得非洲绿猴TRIM5α全基因序列。用PCR技术从人、恒河猴和非洲绿猴TRIM5α全基因序列中扩增B30.2和coiled coil等功能片段。将测序鉴定过的目的基因克隆到真核表达载体pEGFP-C3上,与绿色荧光蛋白融合表达,荧光显微镜观察目标蛋白在细胞内的定位。利用VSV-G膜蛋白质粒和HIV-1骨架质粒包装假病毒,通过假病毒感染实验定量检测TRIM5α及其功能片段对HIV-1的抑制功能。结果成功地构建了带有绿色荧光蛋白标签的TRIM5α及其功能片段真核表达质粒。人、恒河猴和非洲绿猴TRIM5α及其功能片段蛋白均定位于细胞质,其中hTRIM5α、rhTRIM5α、AGMTRIM5α、rh-TRIM5αCC/B30.2、AGM-TRIM5αCC/B30.2融合蛋白以高聚状态存在于胞质内,而h-TRIM5αCC/B30.2和不同种属TRIM5αB30.2融合蛋白则均匀分布于胞质内。恒河猴和非洲绿猴TRIM5α及CC/B30.2对HIV-1假病毒的抑制率均达70%,而人TRIM5α及各种属B30.2对假病毒的抑制率低于20%。结论恒河猴和非洲绿猴TRIM5αCC/B30.2功能结构域对HIV-1有拮抗作用,为TRIM5α最小功能结构域的确定及结构的解析提供了可靠的实验依据。; 李岚陆庆宇张森燕王新泉吴昊; 关键词：病毒

CD4^＋T淋巴细胞的活化在HIV-1感染长期非进展者及典型进展者之间差异的研究被引量：4: 2007年; 目的了解CD4^＋T淋巴细胞的活化在长期感染非进展者（LTNP）及典型进展者（TP）之间的差异，探讨HIV感染的免疫基础。方法收集24例HIV-1感染患者（7名LTNP患者，17名TP患者）及15例健康对照的抗凝血标本，流式细胞术检测CD4^＋T淋巴细胞的活化标志物CD38并检测其CD4计数等指标；bDNA方法检测患者体内的病毒载量。结果与正常人相比，LTNP患者的CD4^＋T淋巴细胞的活化的差异无统计学意义（P〉0．05）而TP患者的活化程度明显增高（P〈0．01）；HIV感染者CD4^＋T淋巴细胞CD38的表达水平与CD4计数呈正相关，与病毒载量呈负相关。结论随着疾病的进展，CD4^＋T淋巴细胞的活化程度逐渐增高；LTNP患者CD4^＋T淋巴细胞的活化程度没有明显增高可能是其疾病长期不进展的原因之一。; 焦艳梅福军亮张政张晖金磊周春保付宝云王福生吴昊; 关键词：HIV-1 免疫活性抗原 CD38

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北京市科委基金(D0906003040391)

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