国家科技重大专项(2009ZX09102-235)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：苏长青季卫丹钱其军姜小清包龙龙更多>>
- 相关机构：第二军医大学苏州大学浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- hSulf-1基因腺病毒表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖、迁移能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的构建携带人硫酸酯酶1基因(hSulf-1)的腺病毒载体,研究其对于人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖、迁移能力的影响。方法通过基因操作技术将hSulf-1基因插入到腺病毒基因组中,构建重组腺病毒Ad5-hSulf1;应用蛋白质免疫印迹法检测hSulf-1蛋白在ECV-304细胞中的表达及细胞内磷酸化Akt、ERK的表达变化;MTT实验检测hSulf-1过表达对于ECV-304细胞增殖的影响;采用划痕实验研究hSulf-1过表达对于ECV-304细胞迁移的影响。结果成功构建携带目的基因hSulf-1的腺病毒载体;免疫印迹结果表明hSulf1基因过表达会下调ECV-304细胞Akt和ERK信号分子的磷酸化水平;细胞增殖实验结果表明hSulf1基因过表达抑制了ECV-304细胞增殖,感染复数为50、100时细胞存活率下降至(68.49±0.05)%以及(67.78±0.06)%(P<0.05);划痕实验结果表明hSulf1基因过表达能够抑制细胞的迁移,相比于对照组细胞迁移能力减弱(P<0.01)。结论重组腺病毒Ad5-hSulf1介导的hSulf-1基因在ECV-304细胞中的过表达明显抑制细胞增殖及迁移,为hSulf-1用于肿瘤及血管生长相关疾病的基因治疗奠定了基础。
- 季卫丹包龙龙严妍曹璐傅晓辉姜小清苏长青
- 关键词：腺病毒血管内皮细胞细胞增殖细胞运动
- 人硫酸酯酶1基因的作用机制及抗瘤活性
- 2011年
- 人硫酸酯酶-1(hSulf-1)能够使细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)脱硫酸化,从而抑制下游肝素结合生长因子信号途径的激活。人恶性肿瘤中hSulf-1常处于失活状态,转染外源性hSulf-1能够抑制癌细胞的增殖、迁移和侵袭,因此hSulf-1是肿瘤基因治疗的一个很有潜力的靶点。
- 季卫丹苏长青
- 关键词：硫酸乙酰肝素蛋白聚糖肿瘤信号途径
- 携带11R穿膜肽-p53融合蛋白基因的溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用被引量：1
- 2011年
- p53是研究较为广泛的抑癌基因,可通过不同的途径来抑制或杀伤肿瘤细胞。为增强p53的抗瘤活性,将穿膜肽11R与p53的融合蛋白基因插入增殖型腺病毒载体中,在293细胞中经同源重组筛选获得重组溶瘤病毒SG7605-11R-p53;利用Western blot检测11R-p53的表达情况,TCID50方法测定病毒滴度;应用细胞活力检测实验(MTT)比较病毒杀伤肿瘤及正常细胞的效果。结果显示:SG7605-11R-p53所携带的11R-p53基因在所选细胞株中都能正确表达,与SG7605-p53、AD5-p53相比具有更好的杀伤肿瘤细胞的效果,显示了较强的抗肿瘤效应。说明SG7605-11R-p53是一种有潜力的治疗肿瘤的新型基因-病毒治疗系统。
- 冯志华苏长青钱其军
- 关键词：溶瘤腺病毒P53
- 溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53对肝癌细胞的体外杀伤作用
- 2011年
- 目的：研究携带细胞穿膜肽11R和P53的溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法：以本课题组前期实验构建的携细胞穿膜肽11R和P53的溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53和不携11R的溶瘤腺病毒SG7605-P53感染肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh7和正常成纤维细胞株BJ,Western blotting检测感染后细胞P53和11R-P53的表达情况,TCID50法检测SG7605-11R-P53和SG7605-P53在肝癌细胞中的增殖能力,MTT法检测SG7605-11R-P53对肝癌细胞及正常细胞的杀伤作用。结果：SG7605-11R-P53和SG7605-P53能在肝癌细胞中高表达P53和11R-P53蛋白。SG7605-11R-P53可在HepG2、SMMC-7721、Hep3B和Huh7细胞中大量增殖,其增殖倍数是SG7605-P53的10100倍,但在正常BJ细胞内几乎不增殖。SG7605-11R-P53在MOI=0.1时对Hep3B细胞的杀伤率达90%,对于正常BJ细胞只有当MOI=50时才有很弱的抑制作用;SG7605-11R-P53对4种肝癌细胞杀伤作用的大小依次为Hep3B、HepG2、Huh7和SMMC-7721细胞。结论：携带细胞穿膜肽11R和P53的SG7605-11R-P53溶瘤腺病毒体外对4种肝癌细胞株均有较好的靶向杀伤作用,尤其对Hep3B细胞的杀伤作用最强。
- 于丽陈艳付玉华范丽刘辉苏长青钱其军
- 关键词：溶瘤腺病毒P53肝癌
- 肿瘤的基因治疗:重新燃起的希望被引量：7
- 2010年
- 近年来,基因治疗取得了令人瞩目的进步,世界顶级权威杂志《Science》评出的2009十大科学突破,其中位列第七的就是基因治疗,这为我们征服肿瘤以及其他遗传性疾病带来了新的希望。本文拟从基因治疗发展历程的角度,以大量例证演绎基因治疗的辉煌与跌宕,归纳肿瘤基因治疗的成就与障碍,展望肿瘤基因治疗的发展和应用前景。
- 苏长青
- 关键词：肿瘤基因治疗
