国家自然科学基金(31270307)
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 相关机构:黑龙江大学东北林业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 过量表达拟南芥AtGCS可以提高E.coli的重金属耐受性及富集能力(英文)
- 2013年
- 谷胱甘肽(GSH)是一类在生物体内广泛存在,并且是十分重要的重金属毒害保护剂之一。本研究将编码拟南芥γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因AtGCS(GSH合成的关键酶之一)转化到大肠杆菌(BL21)中,通过IPTG诱导过量表达TrxA-AtGCS融合蛋白来分析AtGCS在提高大肠杆菌重金属耐受性方面的作用。过量表达TrxA的大肠杆菌被用作对照。研究结果表明,在1 mmol.L-1Cd2+、Zn2+或Cu2+重金属胁迫下,过量表达TrxA-AtGCS的大肠杆菌细胞的生长状态要明显优于表达TrxA的对照细胞。同时,过量表达TrxA-AtGCS的大肠杆菌表现出超出对照细胞5倍以上的Cd2+、Zn2+和Cu2+累积量和4倍以上的GSH含量,其中,高于对照10倍的Cd2+富集量尤为明显。因而可以得出结论,拟南芥AtGCS的大量表达大大提升了大肠杆菌的谷胱甘肽含量,从而使GSH可以直接或间接地富集更多的重金属离子,进而提高了大肠杆菌对重金属逆境的抗性。
- 刘大丽毛子军安志刚马龙彪鲁振强
- 关键词:大肠杆菌GSH
- 去壁低渗法制备无融合生殖甜菜M14染色体标本
- 2013年
- 无融合生殖甜菜M14单体附加系为19条染色体甜菜,其中附加1条白花甜菜第9号染色体。为了探明无融合生殖甜菜M14的细胞及胚胎学机理,介绍了一种快速、简便观察分析无融合生殖甜菜染色体标本的制片方法及操作流程。取甜菜根尖分生区部位用0.2 mmol/L 8-羟基喹啉预处理,经前低渗的材料需先用甲醇∶冰醋酸(3∶1)固定4 h,再酶解去壁、后低渗,酶解时间大约0.5~2.0 h。利用滴片或凃片法通过荧光显微技术观察染色体标本,可以更加清晰地观察到染色体的自然裸露状态,附加的1条白花甜菜染色体游离于栽培甜菜染色体之外,更易于识别。此方法适用于无融合生殖甜菜,可为后续的染色体微分离及Fish荧光原位杂交等提供前提条件和技术保障。
- 刘丽萍王艳
- 关键词:染色体制片
- 单体附加系甜菜M14与异缘三倍体甜菜(VVC)核型比较分析被引量:3
- 2014年
- 为了深入研究和探明单体附加系甜菜M14高频传递的机理,通过压片的方法,利用有丝分裂中期的细胞测定了染色体的绝对长度、相对长度、着丝点位置、长臂、短臂及臂比。并与异缘三倍体甜菜VVC、白花甜菜及栽培甜菜进行了染色体核型统计分析。结果表明,甜菜M14与VVC杂种细胞中附加的白花甜菜染色体绝对长度范围分别为1C:2.82±0.07μm和2.61~3.54μm;普通栽培甜菜绝对长度为1.94~2.89μm,通过实验得出的最终结论是甜菜各物种的染色体是稳定的。附加的一条白花甜菜染色体上的特异基因至使单体附加系甜菜M14的高频传递特性得以表达,栽培甜菜和白花甜菜的种间杂交,通过自然重组能够将有益基因导入栽培甜菜中来。实验数据可作为分析及鉴定单体附加系甜菜M14高频传递的重要论据及其深入研究的理论基础。
- 刘丽萍王艳杨峰山鲁振强
- 关键词:染色体组型