国家林业公益性行业科研专项(21004011)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：张存旭张文辉李娜刘伟崔晓燕更多>>
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- 发文基金：西北农林科技大学唐仲英育种基金国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 栓皮栎胚性组织低温保存技术研究被引量：2
- 2012年
- 采用玻璃化法超低温保存栓皮栎胚性组织,不同因子对细胞存活的影响。研究结果表明,冻前保护剂浓度、预冷天数对解冻后材料的存活有很大影响,冷冻防护剂的处理时间及解冻方式对材料冻存后能否成活起到关键作用。材料在继代培养10d时转至含6%二甲亚砜(DMSO)的MS增殖培养基上,5℃下预培养3d,用60%PVS2处理20min,100%PVS2于0℃处理30min,换新鲜PVS2溶液,迅速投入液氮保存,于40℃水浴中迅速化冻,冻后再培养时,细胞能恢复生长。
- 冀智清张存旭张昌胜李慧张文辉
- 关键词：栓皮栎玻璃化法超低温保存
- 栓皮栎ISSR反应体系的建立被引量：2
- 2014年
- 以栓皮栎叶片为试材,采用单因素试验设计对栓皮栎ISSR反应条件进行系统优化,建立了栓皮栎ISSR的最佳反应体系和扩增程序。结果表明：PCR反应体系总体积为25μL,其中10×Buffer 2.5μL,30ng模板DNA,1.5UTaq聚合酶,2.5mmol/L Mg2＋,0.6μmol/L引物,0.3mmol/L dNTPs;扩增程序：94℃预变性1min;94℃变性30s,51.5～59.0℃退火60s,72℃延伸2min,35个循环;最后72℃延伸5min。在此条件下从100条ISSR引物中筛选出12条多态性好、稳定性高的引物对陕西省天然群体共22个栓皮栎个体的DNA进行扩增,共得到166个位点,其中142个为多态位点,多态位点百分率为85.54%,Nei指数为0.2928,Shannon信息指数为0.4381,表明栓皮栎的遗传多样性处于较高水平。
- 李娜张存旭崔晓燕蒋鸿刚郭乐刘伟
- 关键词：栓皮栎ISSR
- 栓皮栎AFLP反应体系的建立被引量：1
- 2012年
- 以栓皮栎叶片为材料,研究了AFLP反应体系中酶切-连接反应的方法与时间、预扩增反应和选择性扩增反应等几个关键因素。建立一套适于栓皮栎基因组的AFLP反应体系:基因组DNA的提取宜采用改良的CTAB法;酶切-连接反应体系采用一步法,其中DNA模板用量为200ng,酶切-连接反应4h;酶切-连接产物用于预扩增反应的最佳稀释倍数为20倍;预扩增产物不需要进行稀释直接用作选择性扩增反应。对各环节的效果检测与引物筛选验证表明该体系适合栓皮栎的AFLP分析。
- 杨阳张存旭郝丽丽张文辉
- 关键词：栓皮栎AFLP
