国家教育部博士点基金(20050533023)
- 作品数：10 被引量：72H指数：5
- 相关作者：陈平蔡珊吴杰陈剑波张程更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金湖南省学位与研究生教育教学改革研究项目国家自然科学基金更多>>
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- 茶多酚对低剂量烟草悬凝物诱导人支气管上皮细胞氧化损伤及凋亡的影响被引量：10
- 2010年
- 目的:研究茶多酚对低剂量烟草悬凝物诱导人支气管上皮细胞氧化损伤及凋亡的影响。方法:制备烟草悬凝物(cigarette smoke condensate,CSC),采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethyl thiazoly)2,5-diphenyl-tetrazolium bromide,MTT]法测定人支气管上皮细胞株(HBE135-E6E7)的生长情况;荧光-化学发光仪测定细胞内氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平;DNA ladder法检测HBE135-E6E7凋亡;反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测Bcl-2和BaxmRNA表达。结果:CSC组与CSC+茶多酚组细胞内ROS水平均明显高于对照组(P<0.01),CSC+茶多酚组细胞内ROS水平则明显低于CSC组。CSC组出现明显的DNA断裂拖尾带,CSC+茶多酚组仅出现少量的断裂拖尾带。RT-PCR结果显示:与对照组相比,CSC组Bcl-2mRNA表达降低(P<0.01),BaxmRNA表达升高(P<0.01);与CSC组相比,CSC+茶多酚组Bcl-2mRNA表达升高(P<0.01),BaxmRNA表达降低(P<0.01),CSC组与CSC+茶多酚组Bcl-2mRNA/BaxmRNA值明显低于对照组(P<0.01)。结论:茶多酚可拮抗CSC诱导人支气管上皮细胞凋亡,其机制可能是通过有效清除ROS,促进Bcl-2mRNA表达和抑制BaxmRNA表达实现的。
- 卿春华陈平向旭东
- 关键词：茶多酚烟草悬凝物人支气管上皮细胞氧自由基凋亡
- 香烟烟雾提取物对人内皮细胞细胞间黏附分子-1和白介素-8表达以及与多形核中性粒细胞黏附的影响被引量：3
- 2006年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)诱导作用对人内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-I)和白介素-8(IL-8)表达以及与多形核中性粒细胞(PMN)黏附的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞株(ECV-304);制备香烟烟雾提取物(CSE);用不同浓度(0、2.5%、5.0%、10.0%)CSE刺激内皮细胞,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测不同时间点(1h、3h、6h、9h、12h、24h、48h)收集的细胞培养上清液IL-8的浓度,细胞免疫化学染色(SABC)检测ICAM-1在不同时间点(3h、6h、9h、12h)内皮细胞上的表达,细胞记数法测定(1h、3h、6h、9h、12h)后PMN与内皮细胞的黏附率(PMN-EC)。结果(1)各CSE浓度组干预12h后,ICAM-1在EC上的表达量随着干预浓度的增加而增高,除了2.5%CSE干预组和5.0%CSE干预组之间无差异外,各组间差异均有非常显著性意义(P<0.01);10.0%CSE干预不同时间点后,随着干预时间的延长,ICAM-1在内皮细胞上的表达量增加,各时间组之间差异均有非常显著性意义(P<0.01)。(2)随着CSE干预浓度的增加和干预时间的延长,内皮细胞表达IL-8的浓度增高,各组间差异均有非常显著性意义(P<0.01)。(3)各CSE浓度组干预12h后,PMN-EC黏附率随着干预浓度的增加而增加,各组间差异均有非常显著性意义(P<0.01)。10.0%CSE干预不同时间点后,随着干预时间的延长,PMN-EC黏附率增加,各时间组差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论香烟烟雾提取物可以刺激激活血管内皮细胞ICAM-1和IL-8表达,增强PMN与内皮细胞的黏附。
- 陈芳陈平谢丽华周锐向旭东吴尚洁
- 关键词：香烟烟雾提取物内皮细胞白介素-8细胞黏附
- 腺病毒介导谷胱甘肽过氧化物酶基因转染对血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- COPD的发病机制尚未完全清楚。过去30余年，COPD被认为是由于吸烟、环境污染、细菌产物等引起肺部炎症反应，造成蛋白酶和抗蛋白酶系统失衡，最终导致肺泡破坏引起肺气肿。近年的研究结果表明，香烟介导的氧化应激与细胞内皮凋亡在肺气肿发病机制中具有重要作用心引。本研究以香烟烟雾提取物（cigarette smoking extract，CSE）作用于人脐静脉内皮细胞株ECV304，并通过腺病毒介导谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPX）基因转染，观察GPX基因转染前后CSE刺激下ECV304细胞内活性氧与凋亡指数的变化，了解不同氧化和抗氧化状态对ECV304凋亡的影响，探讨与吸烟有关的氧化应激与内皮细胞凋亡在COPD发病机制中的作用。
- 双庆翠陈平曹蔚蔡珊
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶内皮细胞凋亡氧化应激基因转染香烟烟雾提取物ECV304
- E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用被引量：12
- 2008年
- 目的探讨E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用。方法24只健康雄性SD大鼠随机分为COPD组和正常对照组,每组12只。COPD组大鼠采用单纯烟熏法制备COPD模型。采用免疫组织化学方法检测COPD组和对照组大鼠支气管肺组织中E-选择素的表达,ELISA方法检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织匀浆中MIP-2的含量。结果所建大鼠模型的病理及肺功能测定基本符合人类COPD的特点。COPD组大鼠模型中E-选择素在支气管肺组织血管内皮细胞的表达明显高于对照组(P<0.05),与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r=0.809,P<0.01);MIP-2在BALF及肺组织匀浆含量显著高于对照组(P均<0.05),且均与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r值分别为0.893和0.716,P值分别<0.01和<0.05)。结论E-选择素和MIP-2可能参与了COPD气道炎症过程。
- 罗曼陈平蔡珊张程邓建华刘绍坤陈剑波吴杰
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病E-选择素
- 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能的影响被引量：22
- 2007年
- 目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型肺功能的影响。方法 48只大鼠随机分为正常对照组、COPD 组、rhTNFR:Fc 干预组(简称干预组)及假干预组。单纯吸烟法建立 COPD 模型,干预组皮下注射 rhTNFR:Fc 进行干预,假干预组皮下注射空白模拟制剂。酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。肺组织切片行苏木精-伊红染色观察形态学改变,定量测定肺平均内衬间隔和平均肺泡数,用小动物肺功能仪测定系统测定肺功能。结果 COPD 组0.3秒用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV_(0.3)/FVC)和呼气峰流速(PEF)[(65.1±8.4)%和(18.8±1.6)ml/s]显著低于正常对照组[(85.6±5.9)%和(47.2±7.3)ml/s]和干预组[(77.7±2.7)%和(38.2±3.3)ml/s],假干预组 FEV_(0.3)/FVC 和 PEF[(65.4±9.8)%和(19.0±1.9)ml/s]显著低于干预组。COPD 组血清中TNF-α浓度[(118±34)ng/L]显著高于正常组[(74±16)ng/L]和干预组[(79±14)ng/L],假干预组血清中 TNF-α浓度[(120±39)ng/L]显著高于干预组;COPD 组 BALF 中TNF-α浓度[(155±28)ng/L]显著高于正常对照组[(79±28)ng/L]。COPD 组肺平均内衬间隔[(77±29)×10^(-6)m/个]显著高于正常对照组[(44±7)×10^(-6)m/个],其平均肺泡数[(252±97)×10~6个/m^2]显著低于正常对照组[(393±24)×10~6个/m^2]和干预组[(379±33)×10~6个/m^2]。假干预组平均肺泡数[(213±99)×10~6个/m^2]显著低于干预组[(379±33)×10~6个/m^2]。COPD 组+假干预组血清和 BALF 中 TNF-α浓度与 PEF 和 FEV_(0.3)/FVC 均呈显著负相关。结论 TNF-α与吸烟大鼠的 COPD 形成有关,并影响其肺功能;rhTNFR:Fc 对延缓肺功能损害具有一定的作用。
- 张程陈平蔡珊陈剑波吴杰
- 关键词：肺疾病阻塞性肿瘤坏死因子呼吸功能试验重组融合蛋白质类
- 烟雾暴露慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内细胞凋亡和增殖的变化被引量：14
- 2007年
- 目前慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发病机制尚未完全明了，越来越多的研究结果表明，细胞凋亡参与COPD的形成过程。为此，我们观察了吸烟对COPD大鼠肺内细胞凋亡和增殖的影响，探讨细胞凋亡和增殖在COPD发病中的意义。
- 陈剑波陈平蔡珊张程吴杰
- 关键词：PD大鼠肺内发病机制
- N-乙酰半胱氨酸对烟雾暴露所致大鼠慢性阻塞性肺疾病模型的影响被引量：1
- 2008年
- 血管内皮细胞生长因子（VEGF）对于维持正常肺泡结构、抗损伤及组织修复、抗内皮细胞凋亡具有重要作用，关于抗氧化剂对COPD肺组织VEGF分泌及间隔细胞凋亡影响的研究鲜有报道。我们采用熏香烟法建立大鼠COPD模型，通过N-乙酰半胱氨酸（NAC）干预，观察其对大鼠肺功能、肺气肿程度和肺泡间隔细胞凋亡及VEGF分泌的影响，了解COPD发病机制中氧化和抗氧化失衡与凋亡之间的关系。
- 蔡珊陈平张程陈剑波吴杰罗曼
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸慢性阻塞性肺疾病模型血管内皮细胞生长因子内皮细胞凋亡COPDVEGF
- 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对慢性阻塞性肺疾病大鼠营养状态的影响被引量：7
- 2007年
- 目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠营养状态的影响。方法48只大鼠随机分为4组:正常对照组、COPD组、rhTNFR:Fc干预组和干预对照组。单纯吸烟法建立COPD模型,后3组烟雾暴露达1个月时,干预组给予rhTNFR:Fc进行干预,干预对照组给予空白对照制剂。熏烟80d称重后,处理所有大鼠。正常对照组、COPD组肺组织切片行HE染色观察形态学改变,定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)。以酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组血清中的TNF-α浓度。使用自动生化分析仪测定各组大鼠血清白蛋白含量。结果①COPD组肺MLI高于正常对照组,MAN低于正常对照组(P<0.05)。②COPD组血清TNF-α浓度高于正常对照组和rhTNFR:Fc干预组(P<0.05),和干预对照组比较差异无显著性(P>0.05)。③COPD组体重较正常对照组、rhTNFR:Fc干预组体重降低,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。rhTNFR:Fc干预组体重与干预对照组体重比较,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。④COPD组血清白蛋白较正常对照组降低(P<0.05),但与rhTNFR:Fc干预组和干预对照组比较差异无显著性统计学意义(P>0.05)。⑤(COPD组+干预对照组)大鼠血清TNF-α浓度与体重呈负相关(r=-0.75,P<0.05),与血清白蛋白浓度呈负相关(r=-0.73,P<0.05)。结论rhTNFR:Fc可降低COPD大鼠血清TNF-α水平;rhTNFR:Fc可能对改善其营养状态具有一定作用。
- 张程陈平蔡珊吴杰陈剑波
- 关键词：肿瘤坏死因子重组融合蛋白质类营养状况
- 腺病毒介导MnSOD基因转染对香烟烟雾提取物致内皮细胞氧化损伤及凋亡的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对内皮细胞氧化损伤及凋亡的影响,腺病毒介导锰超氧化物岐化酶(MnSOD)基因转染内皮细胞后,能否部分抑制CSE致内皮细胞的氧化损伤及凋亡。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株(ECV304),质粒转染MnSOD基因后将内皮细胞分为3组:对照组、空质粒组及MnSOD组,同时分别给予0%、5%及10%CSE刺激。收集不同CSE浓度刺激后的培养上清液和细胞爬片,TBA法检测上清丙二醛(MDA)浓度,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果(1)CSE刺激对照组内皮细胞,可致MDA浓度增加和细胞凋亡,存在CSE浓度和时间依赖性。(2)与空质粒组比较,CSE刺激后MnSOD组MDA含量和凋亡减少,有统计学意义(P<0.05)。结论(1)CSE能导致内皮细胞氧化损伤及凋亡。(2)腺病毒介导MnSOD基因可以部分抑制香烟烟雾提取物致内皮细胞氧化损伤及凋亡。
- 曹蔚陈平蔡珊张程陈剑波吴杰
- 关键词：香烟烟雾提取物内皮细胞氧化应激凋亡
- 香烟提取物对人内皮细胞基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1分泌的影响被引量：3
- 2006年
- 研究结果表明吸烟能引起炎症细胞在肺内的聚集,释放蛋白酶增加,引起蛋白酶/抗蛋白酶失衡,我们在此基础上进一步探讨香烟提取物（CSE）对人内皮细胞释放基质金属蛋白酶9（MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）分泌的影响,探讨内皮细胞在吸烟相关性肺部疾病中的意义.
- 谢丽华陈平陈芳向旭东周锐吴尚洁
- 关键词：组织金属蛋白酶抑制剂1基质金属蛋白酶9人内皮细胞香烟提取物分泌抗蛋白酶
