国家自然科学基金(30670045)
- 作品数：16 被引量：63H指数：5
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- 相关机构：大连医科大学辽宁出入境检验检疫局大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TLR9的特性及其介导的TLR9/CpG-DNA免疫信号通路被引量：5
- 2010年
- TLRs在天然免疫应答中发挥着重要作用,构成了机体抗感染的第一道防线,是沟通天然免疫和获得性免疫的桥梁。其中TLR9已经被证实能够识别细菌DNA中免疫刺激序列CpG,从而激活哺乳动物细胞的天然免疫机制,这一发现具有重要的生物学意义与应用价值。它不仅进一步推进了外源DNA激活哺乳动物抗感染天然免疫的进一步研究,更为CpG-DNA应用于抗感染、肿瘤和免疫缺陷疾病等的治疗提供新的思路,为改进DNA疫苗效果提供非常有益的帮助。
- 桑丽敏唐立
- 关键词：TOLL样受体CPG-DNA信号转导
- 大豆低聚糖对人胃癌细胞株BGC-823细胞的细胞凋亡和细胞周期的影响被引量：5
- 2010年
- 目的通过观察大豆低聚糖对胃癌癌细胞株BGC-823细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响,探索乳酸杆菌发酵滤液对胃癌细胞作用的可能机制。方法用光镜和流式细胞仪分析不同浓度大豆低聚糖对BGC-823细胞的凋亡诱导效果;用流式细胞仪分析不同浓度大豆低聚糖对BGC-823细胞细胞周期的影响。结果大豆低聚糖可以诱导BGC-823细胞的凋亡。形态学观察处理后的BGC-823细胞,可见细胞变形,细胞皱缩,体积变小,细胞间隙增大,细胞核固缩。流式细胞仪分析50 mg/ml和100 mg/ml大豆低聚糖作用48 h和72 h BGC-823细胞的凋亡比例,分别为6.76%和7.93%。50 mg/ml大豆低聚糖作用48 h,引起BGC-823细胞G1期阻滞,100 mg/ml大豆低聚糖作用48 h,引起BGC-823细胞出现S期阻滞。结论大豆低聚糖可诱导部分BGC-823细胞凋亡。大豆低聚糖对BGC-823细胞的生长抑制作用在低浓度时可能通过G1期阻滞实现,在高浓度时可能通过S期阻滞实现。
- 文姝方芬樊江杰刘跃坚王林美李华军袁杰利凌宗欣李晓芳刘洋唐立
- 关键词：大豆低聚糖胃癌细胞细胞周期细胞凋亡
- 基于飞行质谱分析技术对小鼠肠道菌群蛋白组分分析的初步探讨被引量：6
- 2010年
- 目的应用飞行质谱分析技术对小鼠肠道菌群蛋白组分进行分析,探讨肠道菌群定性、定量和蛋白组学分析方法。方法实验分为抗生素干预组与正常对照组。抗生素干预组小鼠用400 mg/ml头孢曲松钠灌服,每次0.2 ml,每日2次,间隔6 h,连续8 d。收集2组小鼠盲肠内容物菌群细胞,采用飞行质谱分析技术进行肠道菌群蛋白组分分析,采用传统培养法对2组优势菌群进行定量分析。结果抗生素干预组的肠道菌群菌细胞的有效蛋白峰出峰的数量与正常对照组比对差异有统计学意义,2组小鼠的肠道菌群蛋白成分有明显的不同。抗生素干预组的肠道优势菌群数量显著低于正常对照组。结论应用飞行质谱分析技术可以快速明显区分抗生素干预小鼠与正常小鼠的肠道菌群,对肠道菌群研究和临床合理应用抗生素具有指导意义。
- 谭莉莎文姝卢行安唐立
- 关键词：肠道菌群
- 乳杆菌对数生长期培养基滤液核酸组分分析被引量：1
- 2011年
- 目的通过对乳杆菌对数生长期培养基滤液中核酸组分的分析,阐明乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中核酸的性质。方法应用核酸的分离、纯化及电泳分析技术。结果乳杆菌对数生长期培养基滤液中核酸组分为RNA,其片段大小为100 bp左右。乳杆菌对数生长期培养基滤液中核酸组分为RNA,为对数期产生且呈时间依赖关系。结论核酸组分不仅仅是遗传信息的载体,还可能作为有效的信息分子。
- 唐立凌宗欣文姝
- 关键词：乳杆菌核酸电泳
- 乳酸杆菌发酵滤液中核酸抗肿瘤效应及对荷瘤鼠免疫功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨乳酸杆菌DM9811培养基滤液中核酸在体外对肿瘤细胞生长及对荷瘤鼠免疫功能的影响。方法抽提乳酸杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中核酸,进行琼脂糖电泳分析;MTT法体外观察其对于结肠癌HT-29细胞系生长的影响;动物实验观察不同组别小鼠生存期、瘤重体重比、NK细胞活性、T细胞亚群指标。结果乳酸杆菌DM9811滤液中核酸组分为RNA;在细胞浓度为1×106时,每孔加入RNA 100μg能够明显抑制结肠癌HT-29细胞系的生长;预防组荷瘤鼠除CD8＋T细胞比例之外各项指标与阴性对照组相比差异都有统计学意义（P〈0.05）,其中NK细胞杀伤活性（58.97±3.62）、CD4＋T细胞比例（27.77±5.40）和生存期（15.1±4.48）均高于阴性对照组（43.87±3.92）、（19.68±3.00）、（10.2±3.08）,瘤重体重比（0.029±0.017）低于阴性对照组（0.066±0.024）;治疗组生存期（11.8±3.12）与阴性对照组（10.2±3.08）相比差异有统计学意义（P〈0.05）,治疗组生存期长于阴性对照组。结论乳酸杆菌DM9811培养基滤液中存在核酸组分,为100200 bp的RNA片段。100μg/mL乳酸杆菌DM9811培养基滤液中RNA组分对结肠癌HT-29细胞系生长有明显抑制作用。RNA组分可以上调荷瘤鼠的细胞免疫水平,延长荷瘤鼠的生存期。
- 张婵文姝唐立
- 关键词：乳酸杆菌核酸肿瘤细胞免疫
- 乳酸杆菌发酵滤液对人宫颈癌细胞株Hela细胞的抑制作用被引量：13
- 2009年
- 目的观察乳酸杆菌DM9811发酵滤液及其主要成分对宫颈癌细胞株Hela细胞的体外增殖的影响，探索乳酸杆菌发酵滤液对宫颈癌细胞是否有抑制作用及解析作用的有效成分。方法用MTr法研究不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液在不同时间对Hela细胞的抑制作用，在此基础上研究脂肪酸、菌体核酸在不同时间对Hela细胞的抑制作用。结果不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液及相关物质在不同时间对Hela细胞的抑制作用显示：（1）乳酸杆菌DM9811发酵滤液各浓度组对Hela细胞的生长均有抑制作用，且这种抑制作用呈剂量-时间依赖方式。24、48、72h达到半数抑制率的发酵滤液浓度分别为8．9％、5．3％、3．8％。（2）乳酸杆菌DM9811发酵滤液脂肪酸对Hela细胞的生长有一定抑制作用，抑制率在7．0％～34．0％。（3）乳酸杆菌DM9811菌体核酸对Hela细胞的生长有抑制作用，抑制率为9．7％-53．4％，呈剂量一时间依赖方式。72h达到半数抑制率核酸的浓度为5．5μg/ml。结论乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞的生长具有显著的抑制作用，其中脂肪酸组分是有效成分之一。
- 刘彤唐立王林美袁杰利李华军张婵文姝
- 关键词：HELA细胞
- 应用real-time PCR法快速定量人类粪便中双歧杆菌的研究被引量：3
- 2009年
- 目的建立快速、准确从粪便标本中定量双歧杆菌的RT—PCR技术。方法传统培养定量法，普通PCR定量法，real—timePCR比较测量。结果（I）粪便标本前处理采取简单的离心和清洗、稀释步骤能去除粪便标本中的抑制物，实现不提取DNA直接进行PCR、real—time定量粪便中双歧杆菌。（2）本实验建立的PCR方法直接半定量粪便双歧杆菌技术在双歧杆菌值介于10^3～10^7CFU／ml时具有较好的分辨率，粪便标本普通PCR得理论菌数与培养得菌数值之间差异无显著性（P〉0．05）；real-timePCR直接定量双歧杆菌技术在双歧杆菌值介于10^1-10^7CFU／ml时具有较好的分辨率，粪便标本RT—PCR得理论菌数与培养得菌数值之间差异无显著性（P〉0．05）。结论利用PCR、real—timePCR直接半定量和定量粪便中的双歧杆菌可行。
- 于静文姝唐立
- 关键词：双歧杆菌PCR
- 乳酸杆菌发酵滤液对人宫颈癌细胞株Hela细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察乳酸杆菌DM9811发酵滤液对宫颈癌细胞株Hela细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响,探索乳酸杆菌发酵滤液对宫颈癌细胞作用的可能机制。方法用光镜、电镜和流式细胞仪分析不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞凋亡的诱导效果;用流式细胞仪分析不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞细胞周期的影响。结果(1)乳酸杆菌DM9811发酵滤液可诱导宫颈癌Hela细胞凋亡。形态学观察处理后的Hela细胞,可见细胞变形,细胞皱缩,体积变小,细胞间隙增大,细胞核固缩。流式细胞仪分析,1%、2%的乳酸杆菌DM9811发酵滤液在48、72h可诱导Hela细胞凋亡;5%的乳酸杆菌发酵滤液在24、48和72h均可诱导Hela细胞凋亡。(2)乳酸杆菌DM9811发酵滤液阻滞宫颈癌Hela细胞于S期,不同浓度的乳酸杆菌发酵滤液作用24、48和72h均可使S期细胞比阴性对照组增多。结论乳酸杆菌DM9811发酵滤液可诱导部分Hela细胞凋亡,其对Hela细胞的生长抑制作用可能通过S期阻滞实现。
- 刘彤唐立张婵王林美袁杰利李华军文姝
- 关键词：HELA细胞细胞周期细胞凋亡
- 优势菌群失衡对肠黏膜上皮结构的损害
- 2010年
- 目的通过观察小鼠肠道优势菌群失衡肠黏膜上皮结构的变化以探讨肠道优势菌群失衡对黏膜机械屏障的影响。方法利用光镜及电镜技术观察轻度、重度菌群失衡小鼠肠道黏膜绒毛形态变化及上皮细胞超微结构的变化。结果菌群失衡小鼠肠黏膜绒毛出现肿胀、断裂,绒毛顶端肠上皮细胞坏死、脱落,重度菌群失衡与轻度菌群失衡小鼠比较绒毛结构受损加重。超微结构观察发现上皮细胞间隙增宽,胞浆内出现空泡结构,黏膜及黏膜下层有淋巴细胞浸润。结论抗生素干扰肠道优势菌群,可导致肠道机械屏障黏膜绒毛及超微结构受损且重度优势菌群失衡的损害大于轻度优势菌群失衡的损害。
- 李晓芳刘洋文姝唐立
- 关键词：超微结构
- 小鼠肠道优势菌群失衡肠黏液sIgA、黏液素的变化被引量：12
- 2010年
- 目的研究肠道菌群失衡对小鼠肠黏膜机械屏障的影响,探讨优势菌群与肠道黏膜屏障的相互作用机制。方法利用ELISA法检测肠黏膜sIgA含量变化,RT-PCR技术及免疫组化法检测肠黏膜上皮细胞Mucin2、Mucin3和防御素mRNA转录产物的变化。结果菌群失衡小鼠小肠段肠黏膜sIgA水平下降,重度菌群失衡组与正常组比较下降显著(P<0.05),与轻度菌群失衡组相比下降明显。菌群失衡小鼠上皮细胞中的Mucin2、Mucin3和防御素mRNA转录产物与正常小鼠相比明显增高,在杯状细胞胞浆内Mucin2蛋白阳性表达增强,且重度菌群失衡组与轻度菌群失衡组小鼠比较,Mucin2、Mucin3和防御素增高明显。结论菌群失衡可导致肠黏膜sIgA分泌量随菌群失衡程度呈下降趋势,同时引起黏液层中黏液素和防御素分泌量增加。
- 李晓芳刘洋文姝唐立
- 关键词：SIGA黏液素防御素
