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猪圆环病毒2型河北分离株的基因型鉴定及其毒力分析被引量：8: 2008年; 为了明确河北部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株的基因型及其毒力,应用免疫过氧化物酶单层实验(IP-MA)对从保定、唐山和衡水分离的3株PCV2进行了鉴定,分别命名为PCV2-BD1A、TSh1和HSh1。以PCV2 Cap基因为靶基因,运用PCR-RFLP技术对3个分离株进行了基因型鉴定,结果分离株BD1A和TSh1为2H基因型,分离株HSh1为2I基因型,提示2H基因型仍然是当前河北地区PCV2流行毒株的优势基因型。通过与已知PCV2强毒株(PCV2-40895)Cap蛋白的氨基酸序列比较分析,推测PCV2-BD1A、TSh1和HSh1 3个分离株均为强毒力PCV2。; 宋勤叶马增军李潭清马兴树; 关键词：基因型毒力

PCV2与PPV共感染对猪肺泡巨噬细胞吞噬功能及其表达干扰素水平的影响: 将48头5w健康仔猪随机分为4组,即PCV2感染组、PPV感染组、PCV2/PPV共感染组和对照组,每组12头。PCV2和PPV单独感染组分别通过口鼻途径接种PCV2或PPV,PCV2/PPV共感染组通过相同途径同时接种...; 刘祥义宋勤叶陈立功李艳琴左玉柱焦健达王秀萍; 关键词：共感染猪肺泡巨噬细胞干扰素; 文献传递

PCV2河北分离株的基因型鉴定及其毒力分析: 为了明确河北部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株的基因型及其毒力,应用免疫过氧化物酶单层实验(IPMA)对从保定、唐山和衡水分离的3株PCV2进行了鉴定,分别命名为PCV2-BD1A、TSh1和HSh1。以PCV2...; 宋勤叶李潭清左玉柱; 关键词：基因型毒力; 文献传递

猪圆环病毒2型SD/2008株对仔猪的致病: 为了明确PCV2-SD/2008株对猪的致病性,将12头5周龄健康断奶仔猪随机分为PCV2组和对照组,每组6头。PCV2组经口鼻途径接种PCV2SD/2008株第3代细胞毒(105.61TCID50/0.1mL),3mL...; 杨芳陈立功李艳琴宋勤叶赵丹萍李潭清; 关键词：仔猪抗原分布; 文献传递

猪圆环病毒2型SD/2008株对仔猪的致病性被引量：7: 2013年; 为了明确PCV2-SD/2008株对猪的致病性,将12头5周龄健康断奶仔猪随机分为PCV2组和对照组,每组6头。PCV2组经口鼻途径接种PCV2SD/2008株第3代细胞毒(105.61 TCID50/0.1mL),3mL/头,对照组经相同途径接种3mL细胞维持液。PCV2组中的1头猪从感染后14d开始出现间断腹泻,一直到持续到试验结束。感染后第4、5周,感染组的周平均增重显著低于对照组(P<0.05)。病理组织学检查可见PCV2感染猪的淋巴结和脾脏内淋巴细胞缺失、单核/巨噬细胞和嗜酸性粒细胞浸润;间质性肺炎、坏死性肝炎和肾炎、小血管炎症等变化,并且感染后35d比感染后14d的病理变化更加严重。应用免疫组化方法在感染猪的肺、肝、脾、肾、淋巴结、小肠等多种组织中检测到了PCV2抗原,其中颌下淋巴结、肺、小肠中的阳性信号数与检出率最高。结果表明,PCV2SD/2008株对仔猪具有明显的致病性。; 杨芳陈立功李艳琴宋勤叶赵丹萍李潭清; 关键词：仔猪抗原分布

猪圆环病毒2型与猪细小病毒共感染对猪肺泡巨噬细胞吞噬功能及其干扰素表达水平的影响被引量：13: 2011年; 【目的】分析猪圆环病毒2型(PCV2)与猪细小病毒(PPV)共感染对猪肺泡巨噬细胞(PAM)吞噬功能及其干扰素表达水平的影响,为进一步阐明猪断奶后多系统衰减综合征的发病机制提供实验依据。【方法】将48头5周龄健康仔猪随机分为PCV2组、PPV组、PCV2/PPV组和对照组,每组12头。PCV2和PPV组经口鼻途径分别接种PCV2或PPV,PCV2/PPV组同时接种PCV2和PPV,对照组接种细胞营养液。感染后3、7、14和35d(dpi)从每组随机选择3头剖杀,检测PAM的存活率、吞噬活性及其α1型干扰素(IFN-α1)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达水平。【结果】PCV2组和PCV2/PPV组PAM的存活率于3、7、14dpi均低于对照组,35dpi均与对照组PAM的存活率接近,PCV2与PCV2/PPV两组之间差异不显著(P>0.05);3个病毒感染组PAM的吞噬功能均显著下降(P<0.01),其中PCV2/PPV组的吞噬功能低于PCV2组(P<0.05);PCV2/PPV组PAM中IFN-α1和IFN-γ mRNA的水平持续低于PCV2、PPV组和对照组的水平(P<0.01)。【结论】PCV2与PPV共感染没有引起PAM的活力进一步下降,但导致其吞噬功能及IFN-α1和IFN-γmRNA的表达水平持续降低。; 刘祥义陈立功宋勤叶杨芳李艳琴左玉柱焦健达王秀平; 关键词：PCV2 PPV 共感染猪肺泡巨噬细胞干扰素

PCV2感染对猪瘟弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响: (目的)为了探索猪圆环病毒2型（PCV2）感染对猪瘟（CSF）弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响。（方法）将20头28d断奶仔猪随机分为V-I、I-V、V和C四组,5头/组。V-I组在接种CSF弱毒疫苗后2d感染PCV2;I-...; 赵丹萍陶彬陈立功李艳琴宋勤叶李潭清杨芳李红园袁洪兴; 关键词：PCV2 猪瘟弱毒疫苗细胞因子; 文献传递

猪α1干扰素基因的克隆与原核表达被引量：6: 2010年; 根据猪α1干扰素(pocine interferon-alpha1,poIFN-α1)的全基因序列(EU364896)设计合成1对特异引物,通过RT-PCR从三元杂交仔猪外周血淋巴细胞扩增出poIFN-α1全基因,将该基因克隆到pGEM-T载体,构建重组质粒pGEM-T-poIFN-α1,进行测序。以pGEM-T-poIFN-α1为模板,经PCR扩增带有酶切位点的poIFN-α1基因,将其定向克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达载体pGEX-6P-poIFNα1,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白诱导表达和鉴定,并确定蛋白最佳表达条件。序列分析表明,克隆的poIFN-α1基因全长546bp,编码181个氨基酸,前23个氨基酸组成信号肽,无糖基化位点。SDS-PAGE和Western blotting证实重组表达菌经IPTG诱导后,可表达相对分子质量约46ku的融合蛋白(GST-poIFN-α1)。当以1.0mmol/L的IPTG于37℃下诱导表达9h时,蛋白表达量最高。poIFN-α1基因的克隆与表达为进一步研究其抗病毒活性,开发病毒治疗和疫苗免疫增强用生物制剂奠定了基础。; 杨永胜陈春花宋勤叶左玉柱; 关键词：干扰素克隆原核表达

猪圆环病毒2型感染对猪瘟弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响被引量：1: 2012年; 为探索猪圆环病毒2型(PCV2)感染对猪瘟(CSF)弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响,将20头28d断奶仔猪随机分为V-I、I-V、V和C 4组,5头.组-1。V-I组在接种CSF弱毒疫苗后2d感染PCV2;I-V组在感染PCV2后2d接种CSF弱毒疫苗;V组只接种CSF弱毒疫苗;C组为空白对照组。共免疫2次,间隔21d。免疫后定期检测血清CSFV特异性抗体水平、外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性和PBLC中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10mRNA的表达水平。结果显示:在CSF弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2,均会导致CSFV抗体水平低下,血清抗体阳转率下降,PBLC增殖活性降低。初次免疫后,V-I与I-V组的PBLC内IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10mRNA的表达量严重不足,其中V-I组的表达量最低。加强免疫后V-I与I-V组的PBLC内IFN-γ与IL-10的表达失衡,IL-2和IL-4的表达缺乏,其中I-V组的细胞因子表达失衡和缺乏更严重。上述研究表明,CSF弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2均会影响机体的体液和细胞免疫应答水平,导致PBLC内细胞因子的表达严重抑制和紊乱。; 赵丹萍陶彬陈立功李艳琴宋勤叶李潭清杨芳李红园袁洪兴; 关键词：PCV2 猪瘟弱毒疫苗细胞因子

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