辽宁省自然科学基金(20081228)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：张钦明李建军杨军周振东更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 动态压力联合胰岛素样生长因子1基因转染促进兔脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1α的表达被引量：3
- 2010年
- 目的 初步探讨兔脂肪间充质干细胞（ADSCs）HIF-1α促进ADSCs成软骨分化的作用机制.方法 观察动态压力联合低氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因转染对兔脂肪间充质干细胞（ADSCs）HIF-1表达的影响.采用I型胶原酶消化法,分离、纯化、扩增兔ADSCs.构建稳定表达pcDNA3.1-IGF-1的细胞株,以5×107/ml的密度接种于壳聚糖/明胶复合支架材料上,分组培养：A组（空白对照组）接种未转染基因的脂肪间充质干细胞,B组（IGF-1组）接种稳定转染胰岛素样生长因子1的脂肪间充质干细胞,C组（压力组）与D组（压力＋IGF-1组）分别为A、B组的细胞/支架复合物于压力型生物反应器中动态培养（2%at 0.1Hz）,连续培养7 d.进行形态学观察,MrTT法绘制细胞增殖曲线,并应用Di1荧光标记观察细胞在支架上的分布情况.比较组织工程软骨中糖胺聚糖（GAG）含量和相关基因（IGF-1,HIF-1α,Ⅱ型胶原和Sox-9）相对表达的差异.结果 形态学观察,MTr,Dil荧光标记,GAG含量测定以及实时聚合酶链反应结果均显示A组＜C组＜B组＜D组.实验证实单纯基因转染组的HIF-1α、Sox-9等基因表达水平和GAG含最明显高于单纯压力组,而二者联合培养则能够获得更为显著的效果,其结果远大于二者简单的加合.结论 三维立体培养条件下,动态压力与IGF-1基因转染联合作用明显促进细胞自身分泌内源性IGF-1 IGF-1与动态压力刺激均明显上调兔ADSCs HIF-1α的表达水平,并且二者存在协同作用.HIF-1α表达上调对促进兔ADSCs成软骨分化、增殖以及分泌细胞外基质均具有重要作用.
- 杨军张传辉李建军周振东张钦明
- 关键词：软骨干细胞胰岛素样生长因子-1
