国家自然科学基金(30771604)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
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- 相关机构：扬州大学江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
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- 尿道致病性大肠杆菌U17株rstA缺失株降低对小鼠的致病性被引量：2
- 2018年
- 【目的】探究双组份系统RstA/RstB中效应基因rstA对尿道致病性大肠杆菌毒力的影响。【方法】利用λRed重组系统构建UPEC U17 rstA缺失株U17ΔrstA,并构建相应的回复株,通过体内外试验评价rstA基因缺失对UPEC毒力的影响。【结果】生长曲线的测定结果显示,在LB普通培养基中,缺失株生长速度与野生株相似,但在LB贫铁培养基中,缺失株生长速度较野生株相比明显下降;体外环境应激试验结果显示,缺失株在强酸、强碱、高渗透压、尿素、氧化应激等环境压力下的生存能力与野生株相似;菌株生物被膜检测结果显示,缺失株的生物被膜形成能力与野生株相当;荧光定量PCR检测结果显示,rstA基因在贫铁环境下的表达水平较正常条件下显著上调,暗示贫铁环境可能是rstA发挥效应的刺激信号。6周龄BALB/c小鼠尿道感染试验结果显示,rstA缺失株在尿液、膀胱、肾脏中的带菌量显著低于野生株,而回复株毒力恢复至野生株水平,表明rstA缺失能显著降低UPECU17的毒力。【结论】rstA与尿道致病性大肠杆菌的致病性相关,为潜在的毒力因子。
- 高清清邵启文叶正琴夏乐高崧焦新安刘秀梵
- 关键词：毒力
- 禽致病性大肠杆菌E058株aerobactin与sit操纵子基因突变株的构建及其致病性
- 【目的】探究毒力基因aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株致病作用的相关性。【方法】利用Red同源重组方法,构建APEC E058株aerobactin与sit操纵子基因缺失株E058Δvir,并...
- 凌洁璐陈思懿高清清许慧卿高崧刘秀梵
- 关键词：禽致病性大肠杆菌突变株
- 文献传递
- 禽源大肠杆菌的生物表型特性
- 禽病原性大肠杆菌(Avian Patho- genic Escherichia coli,APEC)主要通过呼吸道的侵入而引起机体的全身性感染和败血症,给养禽业带来了重大的经济损失,致病性和非致病性禽源大肠杆菌分离株在生...
- 陈祥赵李祥高崧王晓泉焦新安刘秀梵
- 关键词：禽病原性大肠杆菌血凝试验
- 文献传递
- 应用DNA芯片技术研究体外表达禽致病性大肠杆菌可能致病基因被引量：8
- 2008年
- 应用DNA芯片研究禽致病性大肠杆菌可能致病基因的表达。构建禽致病性大肠杆菌毒力基因、潜在毒力基因的DNA芯片,应用基因芯片技术对同属O2血清型的禽高致病性大肠杆菌E058株和低致病性大肠杆菌E526株在体外LB培养基和鸡血清培养状态下进行差异表达分析。结果:在体外LB静置培养状态下,低致病株E526与高致病株E058相比共有16个差异基因,均为下调基因。在鸡血清静置培养中,E526与E058相比共有15个差异基因,均为下调基因。应用基因芯片成功筛选了禽致病性大肠杆菌在体外不同条件下的毒力基因及可能毒力基因中差异表达基因,表明一些铁摄取系统相关基因对APEC的毒力较重要,同时也筛选出了一些新的可能致病基因aes-1,aes-2,aes-3,aes-4,aes-6,aes-8,aes-10,aes-13,aes-15,aes-31等。
- 宦海霞周琼赵李祥高崧刘秀梵
- 关键词：禽致病性大肠杆菌毒力基因体外培养DNA芯片
- 禽致病性大肠杆菌E058株毒力基因(aerobactin)与sit操纵子基因突变株的构建及其致病性被引量：3
- 2013年
- 【目的】探究毒力基因aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株致病作用的相关性。【方法】利用Red同源重组方法,构建APEC E058株aerobactin与sit操纵子基因缺失株E058Δvir,并通过一系列的体内及体外试验对其生物学特性进行研究。【结果】生长曲线测定、细菌侵袭试验及体外竞争等试验结果表明,突变株与亲本株差异不显著;体内动态分布试验结果显示,突变株E058Δvir在5个被检脏器中均极显著地低于亲本株(P<0.001)。【结论】aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株的致病性相关,是其重要的致病因子。
- 凌洁璐陈思懿高清清许慧卿高崧刘秀梵
- 关键词：禽致病性大肠杆菌AEROBACTIN突变株
- kpsE和kpsD双基因缺失显著降低肠道外致病性大肠杆菌的毒力被引量：4
- 2016年
- 【目的】探究荚膜对肠道外致病性大肠杆菌致病作用的影响。【方法】选取负责荚膜多糖转运的基因kpsE和kpsD,利用λRed重组系统构建APEC E058和UPEC U17荚膜缺失株E058ΔkpsED和U17ΔkpsED,并通过一系列的体内及体外试验对其生物学特性及致病性进行研究。【结果】双基因缺失株的生长速度较野生株没有明显差异,但缺失株抗血清补体杀菌能力和抗鸡巨噬细胞HD-11细胞吞噬能力显著下降。1日龄雏鸡LD50致病性试验结果显示,缺失株E058ΔkpsED和U17ΔkpsED对鸡失去致病力,而回复株毒力恢复至野生株水平;35日龄SPF鸡体内动态分布和竞争试验显示ΔkpsED缺失株在鸡体内定殖能力和竞争性生长能力显著下降,表明kpsED双基因的缺失能显著降低APEC E058和UPEC U17的致病力。【结论】荚膜与肠道外致病性大肠杆菌的致病性相关,是其重要的毒力因子。
- 高清清夏乐刘娟华高崧刘秀梵
- 关键词：荚膜致病力
- 禽病原性大肠杆菌iro和tsh基因缺失株的构建被引量：4
- 2008年
- 通过SSH和SCOTS研究,铁系统(Iro)和温度敏感性血凝素(Tsh)在禽病原性大肠杆菌(APEC)的感染中可能发挥重要作用。基因检测发现,在243个禽源大肠杆菌分离株中,有205株为iro+菌株,其中高、中度和低致病株分别为89.8%(184/205)、8.8%(18/205)和1.5%(3/205);有167株为tsh+菌株,高、中度、低致病株分别为87.4%(146/167)、12.6%(21/167)和0%(0/167),结果显示iro+或tsh+株大多数为高致病株。为了确定iro和tsh基因在APEC致病力中的作用,以APECE037株为基础,通过自杀性载体分别构建了iro和tsh基因缺失突变株E037(Δiro)、E037(Δtsh)和E037(ΔiroΔtsh)。动物感染性试验表明,突变株在鸡体内的繁殖能力和致病性均明显下降,但两个基因的协同致病作用不显著。进一步证实Iro和Tsh为APEC重要的致病因子。
- 陈祥刘静高崧潘志明焦新安刘秀梵
- 关键词：禽病原性大肠杆菌缺失突变株
- 禽源大肠杆菌的生物表型特性被引量：3
- 2008年
- 对243株禽源大肠杆菌分离株进行血清耐受试验、菌毛化大肠杆菌血凝试验和温度敏感性血凝素试验,在这些分离株中,高度血清耐受、中等血清耐受、轻度血清耐受和血清敏感菌株分别占受试菌株的57.2%(139/243)、28.8%(70/243)、10.3%(25/243)和3.7%(9/243)。在37℃细菌培养物与鸡红细胞凝集试验中,甘露糖敏感血凝(MSHA)和甘露糖耐受血凝(MRHA)菌株分别占受试菌株的64.6%(157/243)和5.8%(14/243);与豚鼠红细胞凝集试验中,MSHA和MRHA菌株分别占受试菌株的74.9%(182/243)和2.9%(7/243),其中与鸡红细胞凝集试验MSHA菌株中,MSHA阳性菌株占高致病株的69.5%(132/190),MRHA阳性菌株占低致病株的22.2%(2/9),两者差异极显著(p<0.01)。在温度敏感性血凝素试验中,MRHA菌株为112株,占分离株的46.1%,其中O1、O2和O78血清型的高致病株占所在血清型分离株的83%～100%,而其它血清型的高致病株仅占57%左右,差异显著(p<0.05)。结果显示禽源大肠杆菌的致病性与其血清耐受能力、鸡红细胞MSHA菌毛的表达和温度敏感性血凝素的表达呈一定的相关关系。
- 陈祥赵李祥高崧王晓泉焦新安刘贤进刘秀梵
- 关键词：禽病原性大肠杆菌血凝试验
