国家自然科学基金(30771606)
- 作品数：22 被引量：49H指数：5
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- 相关机构：吉林大学军事医学科学院吉林农业科技学院更多>>
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- 鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆的构建及鉴定被引量：4
- 2009年
- 应用cRACE法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA 5′末端。参照Peter等的方法设计引物,扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA的3′末端。根据GenBank上发表的鹅源副黏病毒序列设计6对引物,应用RT-PCR方法分6段扩增此病毒结构基因序列,并将其连接完成后与连接有鹅源副黏病毒NA-1株末端序列的转录载体连接,构建得到全长cDNA克隆。鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆成功构建,为下一步病毒的拯救奠定坚实的基础。
- 王昌庆丛彦龙李少丽丁壮尹仁福吴昊刘美邱蜜蜜母连志
- 关键词：鹅源副黏病毒RACE全长CDNA拯救
- “拯救”NA-1株鹅源副黏病毒微型基因组的构建被引量：3
- 2009年
- 根据GenBank上已发表的NA-1株GPMV全序列设计并合成2对特异性引物,克隆得到GPMV的Leader及Tralier序列,与T7启动子、丁肝病毒核酶序列及T7终止子重叠PCR连接后,将连接产物克隆至改造的pVAX-1载体中,并用增强型绿色荧光蛋白基因代替GPMV的整个编码区,只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控序列,酶切、测序及荧光鉴定后,与pCI-NP、pCI-P及pCI-L等3个辅助质粒共转染可表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系,结果绿色荧光蛋白得到表达,表明成功构建了"拯救"病毒的微型基因组。
- 李少丽丛彦龙王昌庆丁壮尹仁福孙玉章母连志
- 关键词：病毒拯救
- DP1/02株鸭源Ⅰ型副粘病毒F基因真核质粒构建及实验免疫研究
- 应用RT-PCR方法从鸭源Ⅰ型副粘病毒DP1/02株中扩增F基因并克隆入pMD18-T载体,经序列测定、分析,结果显示DP1/02株F基因与NDV国家标准强毒F48E9株的核苷酸、氨基酸序列同源性均达到99%。随后将F基...
- 张秀峰王中华刘佳旭刘艳华母连志李国江丁壮
- 关键词：副粘病毒F基因
- 文献传递
- RNAi靶向NP、L基因抑制鹅源副黏病毒在CEF中的复制
- 前言:本试验将已构建好的针对GPMV NP及L基因的表达shRNA的载体:NP14、NP18、L60、L145转染CEF细胞后接种GPMV,观察RNAi在CEF中对GPMV的抑制作用。接毒后36 h RealTime R...
- 刘美李少丽王昌庆吴昊邱蜜蜜尹仁福丛彦龙丁壮
- 文献传递
- 拯救NA-1株GPMV微型基因组的构建及鉴定
- 前言:本研究用反向遗传操作技术拯救NA-1株GPMV,用pVAX-1载体作骨架,构建了包含病毒两个末端及.HdvRz序列的微型基因组。材料与方法:首先用.PCR方法将CMV启动子
- 李少丽王昌庆丛彦龙丁壮孙玉章
- 文献传递
- 猪源副粘病毒的分子鉴定被引量：7
- 2008年
- 参照GenBank发表的相关猪源副粘病毒和禽源副粘病毒融合蛋白F基因核苷酸序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR技术对本研究室分离的猪源副粘病毒JL-1株F基因进行探索性扩增、序列测定,在此基础上设计引物扩增HN基因、进行序列测定,分析F、HN基因序列,对该病毒进行分子鉴定。结果显示,扩增出了JL-1株F、HN基因目的条带,序列分析表明其与猪源副粘病毒病家族其他成员即蓝眼病病毒、尼帕病毒、梅那哥病毒同源性很低,与禽副粘病毒1型(APMV-1)具有高度同源性。初步确定分离的猪源副粘病毒为禽副粘病毒1型。
- 毕玉海丛彦龙李志杰吴昊丁壮
- 关键词：分子鉴定融合蛋白基因
- 一例鹅副黏病毒病的诊断与防治
- 2012年
- 2010年春季,吉林市某珍禽养殖场饲养的2月龄莱茵鹅1 200只暴发了副黏病毒病,并引起大量死亡,现将该病的诊断及防治情况介绍如下。
1临床症状
患鹅发病初期拉白色稀粪,其后粪便呈水样,暗红色或墨绿色;患鹅精神不振、羽毛蓬松、两肢无力而蹲地，有的单脚提起。
- 张秀峰刘佳旭丁壮刘玉茹
- 关键词：鹅副黏病毒病临床症状白色稀粪莱茵鹅养殖场
- RNAi靶向NP、L基因抑制鹅源副黏病毒在鸡胚成纤维细胞中的复制被引量：2
- 2009年
- 构建了针对鹅源副黏病毒(GPMV)NA-1株NP及L基因的RNA干扰质粒;将转染质粒36 h后的鸡胚成纤维细胞接种病毒,通过病毒滴度、实时荧光定量RT-PCR、细胞病变以及间接免疫荧光结果分析,表明均能抑制GPMV在CEF中复制和增殖。本试验对研究GPMV复制和抗病毒治疗提供了技术基础。
- 刘美母连志孟轲音丁壮丛彦龙尹仁福李志杰
- 关键词：鹅源副黏病毒RNA干扰鸡胚成纤维细胞
- 检测鹅源新城疫病毒实时荧光定量PCR方法的建立
- 前言鹅源新城疫是现代化集约化养鹅业的主要疫病之一。经流行病学和临床病理学诊断发现,各种日龄的鹅均具有易感性,发病率为19%～100%,平均为27.67%,死亡率为8%～100%,平均为18.19%,其中15日龄的雏鹅的发...
- 尹仁福刘新鑫丁壮刘美王昌庆李少丽吴昊邱蜜蜜
- 文献传递
- 利用RNAi技术靶向新城疫病毒P基因抑制其在鸡胚成纤维细胞上的复制被引量：3
- 2009年
- 构建了针对新城疫病毒NDV NA-1株P基因的RNAi质粒;转染质粒36 h后接种NDV,通过对病毒滴度测定、实时荧光定量PCR和细胞病变结果分析,表明其能抑制NDV在CEF中的复制和增殖。本试验为进一步研究NDV复制机理和抗病毒治疗提供了技术基础。
- 母连志丁壮丛彦龙尹仁福刘美王昌庆李少丽邱蜜蜜
- 关键词：新城疫病毒RNA干扰鸡胚成纤维细胞
