重庆市自然科学基金(2010BB5394)
- 作品数：5 被引量：24H指数：2
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- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆市急救医疗中心遂宁市中心医院更多>>
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- NSCs对大鼠背部创面愈合的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:研究神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)植入皮肤全层缺失后对创面的影响。方法:分离并培养SD大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),将酸性成纤维细胞生长因子(Acidic fibroblast growth factor,a FGF)与DMEM/F12配成最佳诱导浓度80 ng/m L,将BMSCs诱导分化为神经干细胞,DAPI标记。根据实验设计,将54只SD大鼠背部脊柱两侧造模,形成皮肤软组织创面。按随机分为局部注射NSCs(A组)、局部创面注射BMSCs(B组)、局部创面注射等量生理盐水(C组);术后3、7、14 d,分别观察记录创面愈合时间,计算创面的愈合率,同时切取标本,石蜡包埋处理切片,标本组织行HE染色和VG染色反映皮肤创面炎症反应及组织胶原纤维的增生情况。结果:NSCs局部注射移植后可促进神经修复,在实验过程中观察NSCs对创面愈合的影响,A组创面愈合时间短较B、C组明显缩短(F=10.360,P=0.000));痂皮薄,创面稍燥,HE染色镜下观察局部炎症反应轻微,无出血、积脓、坏死;A组愈合率明显高于B组阳性对照组,B组阳性对照组高于生理盐水阴性对照组(F=1.323,P=0.000)。结论:神经干细胞作为种子细胞移植局部皮肤创面后,可修复创面神经,神经分泌的各种神经肽类物质可加速皮肤创面的修复,缩短修复时间,减轻瘢痕。提高患者满意度。
- 汪正燕果磊王灿
- 关键词：神经干细胞皮肤创面修复细胞治疗酸性成纤维细胞生长因子
- 大鼠骨髓间充质干细胞的培养鉴定以及向神经干细胞分化的实验研究被引量：9
- 2013年
- 目的:体外培养并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),研究其生物学特性,初步探索酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)诱导其向神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化的可行性。方法:全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠BMSCs,倒置相差显微镜观察其形态特征,MTT法绘制生长曲线,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测定细胞周期并鉴定细胞表面标志物。用80 ng/ml aFGF的无血清DMEM/F12培养液诱导大鼠BMSCs向NSCs分化,镜下观察细胞形态特征,免疫荧光染色方法检测神经巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)的表达。结果:大鼠BMSCs贴壁生长,呈梭形,多角形。第1、3、5代BMSCs的生长曲线均呈S形,活性无明显差异。细胞周期显示94.34%BMSCs处于G0/G1期,有较强的分裂增殖能力。FCM检测CD29、CD54、CD90表达阳性,CD45表达阴性。诱导6 h后细胞的胞体收缩成椭圆形或球形并伸出细长突起,免疫荧光染色显示Nestin表达阳性,继续诱导发现双极和多极细胞增多,诱导6 d后相互连接成网状,成典型的神经元样细胞,NSE表达阳性。结论:全骨髓贴壁培养法能培养出高纯度的BMSCs,细胞生长稳定、增殖快、可多次传代,具有干细胞特性。经aFGF诱导后具有向NSCs分化的潜能,NSCs能进一步分化为神经元样细胞。
- 蒲晓姝果磊张敏珠陈文海王灿汪燕
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化神经干细胞酸性成纤维细胞生长因子
- 糖尿病足溃疡外科修复的临床分析被引量：13
- 2013年
- 目的分析总结糖尿病足（diabeticfoot，DF）溃疡外科修复的临床治疗经验。方法回顾性分析2010年1月至2012年12月重庆医科大学附属第一医院烧伤整形外科收治的85例（108条患肢）DF患者的临床资料。结果①85例中DF创面培养结果：共培养出142株细菌，7例真菌感染，感染以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为主。②DF的愈合情况与Wagner分级呈负相关性：分级越高，一期愈合越低，截趾（肢）率及二期或多期愈合越高，愈合时间及平均住院时间越长。③对85例DF患者行手术治疗，植皮术为45例（52．9％），皮瓣修复8例（9．4％），皮瓣修复＋植皮术为7例，28例截趾（肢）术，扩创后直接缝合2例。经1次或多次手术治疗后创面全部愈合，随访10d～2个月溃疡无复发，修复部位无迟发感染，外形及负重行走功能良好。结论DF的治疗需要遵循多学科合作、专业化治疗、全身治疗与局部治疗的原则。需要重视病因、积极预防、加强创面床准备，选择最佳治疗方案，早期手术，才能促进创面愈合。
- 王灿果磊李晶蒲晓姝汪正燕李茂华
- 关键词：糖尿病足病因分析创面床准备创面修复
- RhaFGF联合rhEGF促进兔耳全层皮肤缺损创面愈合的实验研究
- 2013年
- 目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombint human acidic fibroblast growth factor,rhaFGF)联合重组人表皮细胞因子(recombined human epidermal growth factor,rhEGF)对创面愈合的影响。方法:建立兔耳全层皮肤缺损创面模型,随机分为A组(rhaFGF 60 U/cm2+rhEGF 20 U/cm2)、B组(rhaFGF 60 U/cm2)、C组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子60 U/cm2)和D组(等量生理盐水),共4组。采用透明薄膜描记法记录建模后不同时间点各组创面愈合面积,计算创面愈合率,并记录创面愈合时间。在第3、7、14天取创面组织,作HE染色,观察不同时相点创面愈合情况。结果:A组创面愈合时间为(13.33±0.12)d,与其他组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。A组创面愈合率与其他组比较,差异具有统计学意义。造模后第3、7天,HE染色示A和C组创面成纤维细胞、毛细血管生成较B、D组丰富。第14天,A组创面基本愈合,成纤维细胞、毛细血管较其他组少。结论:rhaFGF联合rhEGF对兔耳创面愈合有促进作用,可促进创面肉芽组织生长、毛细血管与上皮形成。在创面愈合后期,毛细血管及成纤维细胞生成数目少,有可能减少瘢痕形成。
- 张敏珠果磊
- 关键词：重组人酸性成纤维细胞生长因子重组人表皮细胞生长因子重组牛碱性成纤维细胞生长因子创面愈合
- 神经干细胞植入大鼠缺损皮肤对创面神经修复的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)体外诱导大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后,植入缺损皮肤对创面神经修复的作用及方式。方法:分离培养SD大鼠BMSCs,利用aFGF诱导其向NSCs分化,并用DAPI荧光标记物进行标记。将81只SD大鼠背部作皮肤全层缺损创面,每组9只。随机分为局部创面注射NSCs(A)组、尾静脉注射NSCs(B)组、NSCs+血浆支架(局部外敷料组)(C)组、局部创面注射BMSCs(D)组、尾静脉注射BMSCs(E)组、BMSCs+血浆支架组(局部外敷料组)(F)组、血浆支架(局部外敷料)(G)组、局部创面注射等量生理盐水(H)组、尾静脉注射等量生理盐水(I组),创面模型在各种移植处理后的第4、5、7周取材,免疫荧光及RT-PCR检测皮肤表皮下及真皮层蛋白基因产物(protein gene product,PGP)9.5的表达。结果:PGP 9.5在创面愈合后第4、5、7周的荧光密度分布,在时间上采用重复资料分析,差异有统计学意义(F=427.03,P=0.000),干细胞移植对神经修复特异性表达有差异;在分组上采用重复资料分析,差异有统计学意义(F=130.44,P=0.000),干细胞移植在时间及分组上的相互作用结果差异有统计学意义(F=3.543,P=0.001)。NSCs局部注射移植后神经修复作用较NSCs尾静脉注射移植明显(P=0.001),NSCs尾静脉注射移植后神经修复较NSCs外敷料移植明显(P=0.000),而NSCs局部注射移植后神经修复作用较BMSCs局部注射移植后明显(P=0.000),BMSCs局部注射移植后神经修复作用较生理盐水局部注射移植后明显(P=0.000),血浆局部外辅料移植与生理盐水的局部注射移植之间差异有统计学意义(P=0.014),生理盐水的局部注射移植与尾静脉注射移植之间差异无统计学意义(P=0.446),RT-PCR检测PGP 9.5基因表达的测定更进一步说明了以上结果。结论:aFGF诱导BMSCs分化为NSCs后,植入皮肤缺损促进�
- 汪正燕果磊蒲晓姝张敏珠王灿李茂华
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子骨髓间质干细胞皮肤创面
