中国博士后科学基金(2005037614)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- Norrin在氧诱导的视网膜病变中的时空表达及其意义被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨视网膜新生血管疾病动物模型-氧诱导的视网膜病变(OIR)小鼠视网膜中Norrin的时空表达变化及意义。方法:荧光素灌注铺片观察OIR小鼠视网膜血管分布和形态。RT-PCR检测对照组P7、P10、P12、P17小鼠和OIR P7、P8、P12、P12.5、P13、P14、P15、P17、P19小鼠视网膜中Norrin、VEGF mRNA的表达。免疫组化法检测Norrin蛋白在视网膜中的表达和分布位置。结果:OIR小鼠P12时在视网膜后极部形成无灌注区,P17时有大量新生血管形成。Norrin mRNA在正常小鼠视网膜中表达水平低且稳定。缺氧12 h后,Norrin mRNA有显著升高,缺氧1 d到达高峰,然后缓慢下降,其变化趋势与VEGF mRNA一致。Norrin蛋白在正常小鼠各时点免疫组化均未能检出,在OIR模型中P15见弱表达,P17-P19表达明显增强。主要分布在视网膜外层,以内外节层、外丛状层为主。结论:Norrin在mRNA和蛋白水平都在缺氧视网膜中明显升高,主要分布在视网膜外层。Norrin很可能参与新生血管的形成,并起着重要的调控作用。
- 丁小燕李涛谢素贞马红婕李斌唐仕波
- 关键词：基因血管内皮生长因子视网膜
- FK506对人视网膜微血管内皮细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:观察FK506对常规及高糖培养条件下的人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)的增殖状态、细胞周期及凋亡的影响。方法:分离培养HRCECs,并应用第Ⅷ因子相关抗原抗体鉴定。取P3-4代HRCECs进行高糖培养(30mmol/l右旋葡萄糖)培养,应用MTT法检测其生长状态。应用100pM的FK506对常规培养的高糖培养条件的HRCECs进行干预,通过MTT法、流式细胞仪检测其对生长状态、细胞周期及凋亡的影响。结果:FK506可抑制常规及高糖培养条件下HRCECs的增殖,其可抑制高糖培养下细胞周期,但可同时减少凋亡的发生,但对常规培养的细胞周期及凋亡则无影响。结论:上述结果提示FK506可能有抑制新生血管发生的作用,成为增殖性糖尿病视网膜病变的有效药物。
- 马红婕李涛梁小玲丁小燕谢素贞唐仕波
- 关键词：糖尿病血管内皮细胞FK506细胞周期
- 色素上皮衍生因子在氧诱导血管增生性视网膜病变小鼠中的表达被引量：4
- 2007年
- 目的探讨氧诱导血管增生性视网膜病变小鼠视网膜中色素上皮衍生因子（PEDF）mRNA及蛋白的表达变化及意义。方法80只出生后2d的C57／BL6小鼠随机分为模型组（64只）和对照组（16只），出生后第7天模型组小鼠和母鼠一起放入氧气含量为75％的饲养箱中饲养，出生后第12天回到正常大气环境中饲养；对照组小鼠始终在正常大气环境中饲养。出生后第7、12、17天时，模型组及对照组在每个时间点分别取小鼠4只，荧光素心脏灌注后行视网膜铺片，荧光显微镜下观察血管分布和形态；提取模型组小鼠出生后第7、8、10、12、12．5、13、14、15、17、19天时间点的视网膜总RNA，通过逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）检测PEDF、血管内皮生长因子（VEGF）、低氧诱导因子（HIF）-1α mRNA的表达变化；分别取模型组和对照组出生后第17天时的小鼠眼球，冰冻切片后通过免疫组织化学染色检测PEDF、VEGF、HIF-1α蛋白在视网膜组织中的表达变化。结果模型组小鼠在出生后第17天时视网膜有大量新生血管形成，视盘周围见大范围无灌注区PEDFmRNA表达在缺氧24h后开始下调，72h达到下降高峰，随后逐渐恢复正常水平,VEGF、HIF-1αmRNA则在高氧环境下表达下调，缺氧状态下迅速升高，于缺氧48h时到达高峰，然后缓慢下降；PEDF／VEGF、PEDF／HIF-1α比值在缺氧状态下显著降低。出生后第17天时，模型组小鼠视网膜中PEDF蛋白表达显著弱于对照组小鼠；而VEGF、HIF-1α蛋白表达则是模型组显著强于对照组。结论PEDFmRNA及蛋白在氧诱导血管增生性视网膜病变小鼠视网膜中明显下降，其趋势与VEGF和HIF-1α的变化相反，PEDF／VEGF、PEDF／HIF-1α表达平衡失调，可能是缺氧状态下视网膜新生血管生成的重要原因。
- 李涛丁小燕谢素贞马红婕唐仕波
- 关键词：动物实验
