河南省重大公益性科研项目(091100910500) 作品数:10 被引量:118 H指数:4 相关作者: 谢宝恩 王继雯 甄静 李冠杰 刘莹莹 更多>> 相关机构: 河南省科学院 河南省微生物工程重点实验室 河南农业大学 更多>> 发文基金: 河南省重大公益性科研项目 河南省教育厅自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
黑曲霉有机磷农药降解酶的纯化及其性质 被引量:3 2012年 采用细胞破碎、硫酸铵分级沉淀和Sephadex G-75凝胶过滤的方法,对黑曲霉(Aspergillus niger)J6产生的有机磷农药降解酶进行分离和纯化,并对其酶学性质进行研究。结果显示:黑曲霉J6有机磷农药降解酶定位在细胞膜上,其分子量为66 000。该降解酶最适pH值为7.0,最适反应温度为70℃,Fe3+、Cu2+、Li+、Zn2+、Mg2+、NaN3、EDTA、SDS、PSMF对该降解酶有不同程度的激活作用,而Mn2+对其有轻微的抑制作用,Ca2+和Triton对其有强烈的抑制作用。 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰 周伏忠 陈国参关键词:黑曲霉 酶学性质 有机磷降解菌的分离筛选及初步鉴定 被引量:12 2011年 目的:从不同根系土壤分离筛选高效降解有机磷的细菌.方法:通过平板法进行初筛,根据水解圈直径和菌落直径比值大小筛选到水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,进一步通过液体摇瓶培养复筛,对其解磷能力进行了测定,并通过形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列测定等一系列试验对其进行鉴定.结果:分离纯化出10株解磷菌,经平板法初筛出6株水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,最后复筛出1株分解有机磷能力较强的菌株XK-1,解磷能力达22.072mg/L.该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌.结论:成功分离出一株解有机磷能力较强的枯草芽孢杆菌XK-1. 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰关键词:有机磷 解磷菌 高效降解有机磷农药真菌的分离鉴定及其特性研究 被引量:5 2011年 从有机磷农药严重污染的土壤中分离筛选出有机磷农药高效广谱降解真菌,并对其进行鉴定及降解特性研究。通过有机磷农药驯化培养、形态学和生理生化特性及其18SrDNA序列分析等试验对其进行初步鉴定,研究外界因素初始pH、培养温度、氧化乐果初始浓度等对降解菌的生长量和降解能力的影响。通过驯化分离筛选等过程从污染土壤中筛选到2株可以在高浓度氧化乐果环境下生长的真菌J4和J6,它们经生理生化和18SrDNA序列测定初步鉴定均为黑曲霉(Aspergillusniger)。研究发现,J4和J6菌株在氧化乐果初始浓度1000mg/L,pH值分别为6.5和6.0,温度分别为30℃和28℃,摇床转速160r/min条件下,培养5天后降解菌可达到最佳生长量和降解能力,降解率可分别达77.83%和70.81%,耐受氧化乐果的最大浓度均为5000mg/L,其生长量和降解能力具有正比例相关性变化趋势;并进一步研究发现,曲霉J4和J6还具有广谱降解有机磷农药的特性。 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰 周伏忠 陈国参关键词:有机磷农药 氧化乐果 驯化 曲霉 降解 一株无机磷细菌的分离、鉴定及其溶磷能力分析 被引量:4 2011年 从根系土壤分离纯化出降解无机磷的细菌8株,通过平板法进行初筛,根据水解圈直径和菌落直径比值大小筛选到水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株3株,进一步通过液体摇瓶培养复筛出1株分解无机磷能力最强的菌株PC-2,该菌株经形态特征、生理生化特性16 S rDNA序列测定等一系列试验鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),同时对其解磷量与发酵液pH值的关系进行了初步研究,其解磷能力达57.5 mg/L,并且研究发现其不同时间的解磷量与发酵液pH值之间虽然存在着显著的相关性,但两者不成正比例相关关系. 王继雯 谢宝恩 甄静 刘莹莹 李冠杰关键词:溶磷能力 PH 镉胁迫对烟草叶激素水平、光合特性、荧光特性的影响 被引量:43 2011年 以烟草(Nicotiana tabacum L.)为材料,采用不同浓度镉胁迫(0、5、25、50mg/L)的水培试验,分别用电感耦合等离子体光谱仪、紫外分光光度计、酶联免疫法、光合作用仪、叶绿素荧光分析仪研究了镉胁迫3d对叶内镉含量、生长素氧化酶(IAAO)活性、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(Z)的含量、光合特性及荧光特性的影响。结果显示烟草叶内镉含量随着胁迫浓度增加而显著增加;IAAO活性在镉为5mg/L时下降,然后随着镉浓度增加而显著上升;IAA含量在镉为5mg/L时上升,但随着镉浓度增加而显著下降;ABA含量随着镉浓度上升而增加;GA3含量在5mg/L时上升,然后随着镉浓度增加而显著下降;Z含量随着镉浓度增加而显著下降;叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量均随镉胁迫浓度增大而显著减少;光合参数中的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、细胞间隙CO2浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)及荧光参数中的PSⅡ潜在光化学效率(Fv/Fo)、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ实际光化学效率(ФPSⅡ)、光化学猝灭系数(qP)均随镉胁迫浓度增大而下降。由此可见,镉胁迫打破了烟草激素的平衡,降低了光合能力。 吴坤 吴中红 邰付菊 韩莹 谢宝恩 袁祖丽关键词:镉 激素 光合特性 荧光特性 苯胺降解菌的分离及降解特性研究 被引量:1 2013年 [目的]筛选高效苯胺降解菌并研究其降解特性。[方法]通过驯化富集培养,从河南某化工厂活性污泥中分离出1株以苯胺为唯一碳、氮源的高效苯胺降解菌DA-K,并对该菌株进行了生理生化鉴定和生物学降解特性研究。[结果]DA-K菌株呈革兰氏阴性,细胞为杆状,菌落颜色呈灰白色,初步确定为不动细菌属。通过测定,DA-K菌株生长的最适pH为6.0,最适温度为30℃,可在苯胺质量浓度为2 500 mg/L的无机盐培养基上生长良好。DA-K菌株在苯胺浓度为1 000 mg/L,pH 6.0,30℃,180 r/min的条件下振荡培养96 h,苯胺降解率接近80%。[结论]DA-K菌株苯胺降解效率较高,具有实际处理苯胺废水的能力,为构建基因工程菌奠定了基础。 张世敏 赵迪 徐淑霞 刘翠翠 吴坤关键词:苯胺 降解菌 降解特性 反相高效液相色谱法测定培养基中苯磺隆 2010年 采用反相高效液相色谱法,对农药苯磺隆在MS培养基中含量变化进行分析,使用C18和紫外检测器,样品前处理采用二氯甲烷萃取后旋蒸甲醇溶解,苯磺隆质量浓度在25~200μg/mL之间有良好的相关系数(R2=0.999).培养基苯磺隆样品溶液标准偏差0.082,变异系数0.16%,平均回收率100.86%,能够准确测得培养基中苯磺隆含量变化. 刘丽 杜迅 安明理 赵明 陈国参关键词:高效液相色谱 培养基 一株纤维素降解真菌的筛选、鉴定及酶学性质分析 被引量:43 2011年 通过对富含枯枝败叶的土壤样品进行富集培养,利用刚果红纤维素培养基初筛和酶活测定复筛得到产纤维素酶的一株真菌,将其命名为GC2-2,并对该菌株进行鉴定及酶学性质研究。结果表明该菌株是一株耐高温、碱性纤维素酶的真菌GC2-2。通过18S rDNA分子克隆测定,该菌为球孢枝孢菌,其滤纸酶的活力优于CMC酶的活力。该菌所产酶的最适反应条件为温度35°C,最适pH值7.5。 甄静 王继雯 谢宝恩 李冠杰 刘莹莹 周伏忠 陈国参关键词:真菌 碱性纤维素酶 新型复合生物肥料的研制与应用 被引量:3 2010年 针对生物肥料的增产效果和应用前景,分别筛选得到了固氮蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus N 9)、解磷枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis P 3)、解钾胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus K 2),通过单因子和正交实验确定了最佳发酵条件和培养基配比.发酵液用草炭吸附后,复配含氮、磷、钾养分的化学肥料,通过转鼓造粒成型技术制成颗粒状生物肥料,芽孢形成率高,活菌数量足.田间实验表明,该肥料能有效降低农业生产成本和提高农作物产量. 谢宝恩 王继雯 甄静 慕琦 周伏忠关键词:生物肥料 固氮 解磷 解钾 芽孢杆菌 淀粉酶高产菌株筛选及发酵条件优化研究 被引量:4 2011年 从济源市麦田的土壤中筛选工业生产上有潜在应用价值的高产淀粉酶菌株,通过平板初筛和摇瓶复筛,得到高产淀粉酶细菌菌株P11(2).对其产酶条件进行优化,最终得到最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为酵母粉和蛋白胨组合,加入MgSO4可以促进产酶,加入CaCl2或FeSO4抑制产酶.经正交试验确定培养基的最优组成,优化后的培养基组分为:可溶性淀粉20 g/L,蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,磷酸氢二钾1.2 g/L,硫酸镁0.5 g/L,氯化钠5 g/L.该菌株在发酵4 d时产酶能力最强;最适宜的发酵温度为于37℃;最佳发酵初始pH值为8.0.优化后的酶活是优化前的3倍,达到183.12 U/mL. 权淑静 马焕 解复红 谢宝恩 周伏忠关键词:淀粉酶