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树突状细胞体外诱导抗肿瘤血管内皮细胞特异性免疫的研究被引量：3: 2005年; 目的:探讨肿瘤内皮细胞抗原负载的树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的特异性杀伤效应。方法:采用肿瘤细胞的培养上清诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖,制备肿瘤血管衍生的内皮细胞(TdEC)。用RTPCR检测肿瘤内皮标志物(TEM)的表达。制备TdEC的冻融抗原,负载从外周血中扩增的DC,用MTS比色法检测DC刺激自体淋巴细胞增殖的效应;用LDH法检测DC诱导的CTL的特异性杀伤效应。结果:TdEC可表达TEM1和TEM8。负载TdEC抗原的DC,可显著刺激自体淋巴细胞增殖。由其诱导的CTL对TdEC具有特异性的杀伤作用。在效靶比为20∶1和10∶1时,杀伤率分别为33%和27%,高于对照组的14%和10%。结论:TdEC抗原负载的DC,在体外可有效地诱导CTL产生,并特异性地杀伤TdEC。; 向邦德吕明德汤庆黄洁夫; 关键词：树突状细胞血管内皮细胞肿瘤

抗肿瘤血管治疗被引量：2: 2006年; 抗肿瘤血管治疗具有高效、抑瘤谱广、不易产生耐药和无明显毒副作用等优势。近年来抗肿瘤血管治疗的常用策略是干扰血管生成调节因子从而抑制血管生成;由于肿瘤血管内皮细胞与正常血管内皮细胞存在质的区别,具有免疫原性,抗肿瘤血管免疫治疗有望成为另一种新方法。现综述抗肿瘤血管治疗的优势、主要策略和存在的不足。; 向邦德吕明德; 关键词：肿瘤

肿瘤源性血管内皮细胞RNA转染树突细胞体外诱导特异性CTL的研究被引量：1: 2008年; 目的:探讨转染肿瘤血管内皮细胞RNA的树突细胞(DC)能否诱导特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。方法:采用肿瘤细胞的培养上清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖,从而制备肿瘤源性血管内皮细胞(Td-EC)。用RT-PCR检测肿瘤内皮标志1(TEM1)在Td-EC上的表达。制备Td-EC的总RNA,转染从人外周血中扩增的未成熟DC,用流式细胞仪检测DC表型的变化,用LDH法检测DC诱导的CTL对Td-EC、HUVEC和人脐静脉内皮细胞株CRL-1730的杀伤率。结果:Td-EC特异性表达TEM1。转染RNA的DC组CD83、CD86表达率分别为(85.22±7.73)%和(88.38±8.02)%,而未成熟DC组CD83、CD86表达率分别为(51.58±9.49)%和(61.77±2.91)%,两组差异有统计学意义,P<0.05。在效靶比为20∶1、10∶1和5∶1时,CTL对Td-EC的杀伤率分别为(34.15±1.14)%、(27.02±1.31)%和(13.12±1.63)%;CTL对HUVEC杀伤率分别为(11.35±0.97)%、(8.24±0.37)%和(5.30±0.73)%;CTL对CRL-1730杀伤率分别为(13.24±1.76)%、(8.41±0.91)%和(5.31±0.94)%;CTL对Td-EC杀伤率均显著高于对HUVEC和CRL-1730的杀伤率,P<0.05。结论:转染Td-EC RNA的DC可在体外诱导CTL特异性地杀伤Td-EC。; 向邦德吕明德汤庆黄洁夫; 关键词：树突细胞

诱导正常血管内皮细胞具备肿瘤血管特性的研究被引量：12: 2005年; 【目的】探讨用肿瘤细胞培养上清液诱导的人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)是否具备肿瘤血管内皮细胞的特性,旨在寻找一种简便的方法,解决肿瘤血管内皮细胞不易获得的难题。【方法】HUVEC用含不同浓度人肝癌细胞株HepG2培养上清的条件培养液培养,3鄄(4,5鄄二甲基噻唑)鄄5鄄(3鄄羧甲酯基)鄄2鄄(4鄄磺苯基)鄄2氢鄄四唑盐法(MTS)检测其增殖率,免疫细胞化学法结合图像定量分析测量血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的变化,逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测肿瘤内皮标记物1和8(TEM1、TEM8)的mRNA表达。【结果】含体积分数10%、20%、40%HepG2培养上清的条件培养液培养,HUVEC增殖率分别为71%、89%、109%。HUVEC用含体积分数50%HepG2培养上清液的条件培养液培养后,VEGFR2平均光密度值明显高于对照组(P<0.05),且TEM1及TEM8呈阳性表达,而对照组不表达。【结论】HepG2上清液促进HUVEC增殖,增殖后的HUVEC具备肿瘤血管内皮细胞的特性。; 向邦德吕明德黄洁夫汤庆; 关键词：内皮细胞免疫组化法

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国家教育部博士点基金(20030558065)