国家自然科学基金(81270510)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
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- 大鼠肺毛细血管周细胞的培养
- 2013年
- 目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.
- 陈兵易斌杨勇王芝陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：周细胞细胞培养技术微脉管
- 肝肺综合征大鼠血清对肺微血管内皮细胞caveolin-1及VE-cadherin蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 评价肝肺综合征大鼠血清对肺微血管内皮细胞（PMVECs）微囊蛋白1（caveolin-1）及血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）表达的影响.方法 健康SD大鼠40只,雌雄不拘,3-4月龄,体重220- 250 g,随机取20只采用慢性胆管结扎法制备大鼠肝肺综合征模型,另外20只行假手术.另取正常大鼠原代培养、纯化及鉴定PMVECs.PMVECs接种于内皮细胞专用ECM培养基（不含血清）或96孔培养板,第4-9代细胞用于实验,采用随机数字表法分为2组（n=36）：对照组（C组）和肝肺综合征组（HPS组）,C组加入假手术大鼠血清,HPS组加入肝肺综合征大鼠血清,终浓度为10％.于孵育12、24和36 h（T1-3）时分别采用Western blot法检测PMVECscaveolin-1和VE-cadherin蛋白的表达,CKK-8法检测PMVECs间的粘附及增殖情况.结果 与C组比较,HPS组T1-3时caveolin-1和VE-cadherin蛋白表达下调,PMVECs间的粘附指数下降,PMVECs增殖能力增强（P＜0.05）.结论 肝肺综合征大鼠血清通过下调caveolin-1及VE-cadherin蛋白的表达诱发PMVECs接触性抑制减弱.
- 袁碧英易斌曾静陈林陈倩段家祥鲁开智
- 关键词：肝肺综合征内皮细胞钙黏着糖蛋白类
- 合并肝肺综合征的老年患者实施胆囊切除术对七氟醚吸入麻醉的药效学研究被引量：2
- 2016年
- 目的研究合并肝肺综合征（hepatopulmonary syndrome, HPS ）的老年患者实施胆囊切除术期间吸入七氟醚维持麻醉的药效学变化。方法48例肝硬化择期行胆囊切除术的患者，性别不限，年龄60—74岁，Child-Pugh分级A级或B级，ASA分级Ⅱ或Ⅲ级，肺、肾功能检测正常。利用对比增强超声心动图检查和动脉血气分析，根据是否合并HPS将患者分为HPS组（18例）和对照组（C组，30例）。入室后常规开放静脉通路，泵注右美托咪定镇静。麻醉诱导使用丙泊酚2mg，妇、舒芬太尼2μg／ks和维库溴铵0．1mg／kg，插管后以预设七氟醚浓度维持麻醉，采用上下交叉点法测定MAC值，术中维持BIS值在40—50，保持BP、HR平稳。记录麻醉时间，观察比较两组患者吸入七氟醚MAC值的差异，术毕停药后患者呼之睁眼时间、BIS值恢复至85的时间以及拔管时间。结果HPS组的MAC值为（0．88±0．07）％，而c组的MAC值为（1．13±0．09）％，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。与C组比较，HPS组患者术毕停药后呼之睁眼时间[（28±9）min比（16±6）min]、BIS值恢复至85的时间[（34±9）min比（21±7）min]以及拔管时间[（38±5）min比（26±3）min]延迟，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论合并HPS老年患者实施胆囊切除术期间使用七氟醚吸入麻醉维持，七氟醚的MAC值显著降低，麻醉维持后苏醒时间明显延迟。
- 谌程程刘畅高静陈林曾静甯交琳易斌鲁开智
- 关键词：肝肺综合征胆囊切除术七氟醚药效学
- 肝肺综合征患者血清对人肺成纤维细胞肌样分化、增殖与迁移的影响
- 2016年
- 目的 探讨肝肺综合征患者血清对人肺成纤维细胞肌样分化、增殖与迁移的影响.方法 人肺成纤维细胞接种于培养孔或培养瓶,采用随机数字表法分为2组（n=31）：肝肺综合征患者血清组和健康志愿者血清组,分别用含10％肝肺综合征患者血清的DMEM培养基或10％健康志愿者血清的DMEM培养基孵育.于孵育24、48和72 h（T1-T3）时,采用Western blot法检测人肺成纤维细胞平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和心肌肌凝蛋白（SM-MHC）的表达,采用3H-TDR法检测人肺成纤维细胞增殖能力,采用Transwell小室法检测人肺成纤维细胞迁移能力.结果 与健康志愿者血清组比较,肝肺综合征患者血清组各时点人肺成纤维细胞SM-α-actin和SM-MHC表达上调,T2,3时增殖和迁移能力增强（P＜0.05）;与T1时比较,肝肺综合征患者血清组T2,3时人肺成纤维细胞SM-α-actin和SM-MHC表达上调,增殖和迁移能力增强（P＜0.05）;与T2时比较,肝肺综合征患者血清组T3时人肺成纤维细胞SM-α-actin和SM-MHC表达上调,增殖和迁移能力增强（P＜0.05）.结论 肝肺综合征患者血清可促进人肺成纤维细胞肌样分化、增殖和迁移.
- 曾子洋高静陈林刘畅易斌
- 关键词：肝肺综合征成纤维细胞细胞运动细胞分化
- 右美托咪定对肝门阻断手术血浆SDF-1表达水平的影响被引量：4
- 2017年
- 目的观察肝门阻断患者围术期血浆SDF-1表达水平的变化及右美托咪定对其的影响。方法将50例择期行肝癌切除术的患者[年龄42~71岁,体质量指数(BMI)18.5~26.0kg/m^2,ASA分级Ⅱ~Ⅲ级]分为对照组及右美托咪定组,每组各25例。右美托咪定组在麻醉诱导前15min开始持续泵注右美托咪定1μg/kg,诱导后泵注速度改为0.4μg·kg^(-1)·h^(-1),直至手术结束前15min;对照组以同样的方法静脉持续输注相同容量的0.9%氯化钠注射液。两组患者分别于术前1h(T0)、术后1h(T1)、1d(T2)、3d(T3)采集外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各时间点血浆中SDF-1的表达水平。结果两组患者术中肝脏切除范围、出血量、第一肝门血管阻断时间、麻醉时间及术前血浆SDF-1水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与术前相比,术后T1、T2、T3时间点血浆SDF-1均明显升高(P<0.05)。与对照组相比,右美托咪定组T1、T2、T3时间点SDF-1表达水平低于对照组(P<0.05)。结论 SDF-1在肝门阻断患者围术期表达明显增高,术中持续给予右美托咪定能够显著降低其表达水平,从而在一定程度上抑制炎症细胞的趋化聚集。
- 杨贞甯交琳顾健腾易斌鲁开智
- 关键词：基质细胞衍生因子-1围术期
