中国博士后科学基金(2005037676)
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 相关作者：魏来方峰王宇舒赛男展玉涛更多>>
- 相关机构：华中科技大学北京大学武汉科技大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金湖北省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 两个不同骨髓干细胞亚群体外成肝潜能的比较研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究与比较骨髓造血干细胞(hematopoieticstemcells,HSCs)和间充质干细胞(mesen-chymalstemcells,MSCs)肝分化潜能。方法常规法分离培养大鼠骨髓MSCs。以Thy-1.1为标志,免疫磁珠法(magenicactivatedcellsorting,MACS)分离纯化HSCs。探寻MSCs、HSCs的诱导条件,从形态学、RT-PCR和免疫细胞化学法鉴定肝分化结果。结果MACS分选后Thy-1.1+细胞纯度94.20%,细胞活力99.62%。纤维状MSCs诱导后呈圆形,表达白蛋白及其mRNA,不表达甲胎球蛋白。诱导的HSCs为多角形,白蛋白表达逐渐减少,甲胎球蛋白表达逐渐增强。结论MACS方法能有效分选大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群。MSCs和HSCs二者具有不同的肝系分化潜能。MSCs在HGF/FGF-4的作用下表达成熟肝细胞的特异性基因,分化为成熟肝细胞样细胞;HSCs在HGF/FGF-1/FGF-2的作用下表达早期肝特异性基因,分化为肝干细胞样细胞。
- 舒赛男魏来方峰王宇
- 关键词：造血干细胞间充质干细胞骨髓
- 大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为成熟肝细胞样细胞被引量：9
- 2006年
- 目的 建立和优化大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）分离培养方法 ,探讨其肝系分化条件及潜能.方法分离5～6周龄大鼠骨髓细胞,Percoll密度梯度离心得到单个核细胞,贴壁法培养和纯化MSCs.用形态学观察、反转录聚合酶链反应和免疫细胞化学法探讨培养底物、细胞因子种类与浓度对MSCs肝分化潜能的影响.结果 57%Percoll密度梯度离心能在骨髓单个核细胞分离的质和量上达到最佳.贴壁24h后去悬浮细胞、低接种密度传代培养可获增殖能力强、功能活跃的MSCs.MSCs在10 mg/L纤维连接蛋白为底物、HGF/FGF-4诱导下,纤维状细胞渐变为圆形,表达白蛋白及其mRNA,不表达甲胎球蛋白.结论 优化大鼠周龄、分离液的密度、细胞培养方法有助于获得多向分化潜能保持良好的MSCs.MSCs在HGF/FGF-4诱导下呈成熟肝细胞样细胞表现.
- 舒赛男魏来展玉涛方峰王宇
- 关键词：间充质干细胞骨髓
- 大鼠骨髓Thy-1.1^+干细胞诱导分化为肝干细胞样细胞的体外实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的:分离培养大鼠骨髓Thy-1·1+干细胞,探讨其肝分化条件及潜能。方法:分离大鼠骨髓细胞,Per-coll密度梯度离心获取骨髓单个核细胞后免疫磁珠分选Thy-1·1+干细胞群,流式细胞术测定分选后细胞的纯度与表型。不同条件下诱导分化,用形态学观察、逆转录聚合酶链反应和免疫细胞化学法判定其所处的肝系分化阶段。结果:免疫磁珠分选Thy-1·1+细胞纯度达94·2%。Thy-1·1+细胞不表达CD34和c-kit;高表达β2微球蛋白和CD45;部分表达Flt-3。Thy-1·1+细胞在HGF/FGF-1/FGF-2诱导下呈多角形上皮状克隆样生长,诱导前后持续表达细胞角质素18,诱导过程中白蛋白的表达逐渐减少,甲胎球蛋白的表达逐渐增强。结论:免疫磁珠可有效分选Thy-1·1+细胞。Thy-1·1+细胞在HGF/FGF-1/FGF-2诱导下呈肝干细胞样细胞表现。
- 舒赛男魏来方峰晏丹王宇
