江西省教育厅青年科学基金(GJJ11195)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：江西师范大学江西中医药大学江西中医学院更多>>
- 发文基金：江西省教育厅青年科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 重组烟曲霉壳聚糖酶在毕赤酵母中高密度发酵表达及性质研究被引量：3
- 2013年
- 采用高密度发酵法在5 L发酵罐中对pPIC9-csn/GS115重组毕赤酵母Pichia pastoris菌株进行发酵,壳聚糖酶的产量达到4 200 U·mL-1,发酵液经乙醇浓缩、透析和阳离子交换色谱等步骤进行分离纯化,获得了纯度较高的重组壳聚糖酶.该重组壳聚糖酶与野生型壳聚糖酶对壳聚糖作用模式相同,其最终产物均为壳三糖,且其最适作用温度为60℃,最适pH值为6.0.
- 裘梁杨萍董德刚阳历王曼莹
- 关键词：毕赤酵母高密度发酵
- 密码子优化烟曲霉壳聚糖内切酶基因在毕赤酵母中的高效表达被引量：2
- 2012年
- [目的]烟曲霉(Aspergillus fumigatus)壳聚糖内切酶基因(Chitosanase,EC.3.2.1.132)(csn)的高效表达研究。[方法]根据毕赤酵母密码子的偏爱性对壳聚糖内切酶的基因进行了优化,利用连续延伸PCR方法扩增全长csn基因,构建重组质粒pPIC9k-csn,将重组质粒pPIC9k-csn线性化后转化毕赤酵母GS115,分析重组蛋白的表达,测定其酶活性,并对其酶解产物成分进行分析。[结果]实现了密码子优化后的壳聚糖内切酶的高效表达,重组菌株比野生菌株所产的壳聚糖内切酶活性提高了近20倍。[结论]该研究成功实现了烟曲霉壳聚糖内切酶基因在毕赤酵母中的高效表达,为工业化大规模生产壳聚糖酶奠定了基础。
- 裘梁杨萍游清徽董得刚乔贝贝王曼莹
- 关键词：密码子优化毕赤酵母
