国家自然科学基金(81270531)
- 作品数：10 被引量：28H指数：4
- 相关作者：焦兴元杜军何睿邰强汪洋更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学广州医学院第二附属医院更多>>
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- 超低温肝脏保存技术的实验研究进展被引量：1
- 2020年
- 肝移植是目前治疗终末期肝病唯一有效的方法。移植前供肝的保存至关重要,传统的静态冷藏和机械灌注均受保存时间的限制,以至于供肝的分配空间有限,不可避免地造成部分供肝的废弃。在保证供肝质量的同时,寻找更长的有效保存供肝的技术,是所有肝移植科医师共同努力的方向。最近报道的一种超低温肝脏保存技术可以增加肝脏保存时间,利用冷冻保护剂将肝脏在-6℃下保存3~4 d,之后经过亚常温机械灌注复苏供肝后进行肝移植。该技术在供肝保存方面取得了革命性突破,可能为供肝保存研究开拓出新的领域。但超低温肝脏保存技术目前仅处于实验阶段,将其应用于临床实践还有待进一步深入探究。
- 李益虎俞亦飞焦兴元
- 关键词：肝移植器官保存超低温冷冻保护剂
- 沉默微小RNA-16通过激活核因子-κB通路介导肝癌细胞化疗耐药被引量：6
- 2018年
- 目的探讨沉默SMMC-7721中微小RNA（miRNA，miR）-16的表达对化疗耐药的影响及机制。方法采用慢病毒载体构建稳定细胞株，应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-16的表达及Westernblot检测靶基因KB激酶抑制剂B（IKBKB）的表达确定构建结果。采用Westernblot及噻唑蓝（MTF）比色法检测各细胞株对紫杉醇的敏感性及耐药机制。结果7721-miRl6组的miR-16表达量显著高于SMMC-7721组及7721．mock组（6．06±0．18比1．00±O．13比0．87±0．03，P=0．000）。7721-shmiR组靶基因IKBKB蛋白表达量是7721-shmock组的25．73倍（P=0．000）。7721-shmiRl6细胞株中多药耐药蛋白1（MDRl）表达显著增加，对紫杉醇的半数抑制浓度（IC50）为4．903txmol／L，是对照组（0．461μmol／L）的10．64倍（P=0．000）。Westernblot结果显示沉默miR-16主要通过激活细胞核因子-κB（NF．KB）通路导致MDRl表达增加。结论沉默SMMC-7721中miR-16的表达，能显著增加IKBKB的表达，从而导致SMMC-7721细胞对紫杉醇耐药。
- 黄颖滨陈光宇汪洋何睿杜军焦兴元邰强
- 关键词：耐药
- 髓样抑制细胞与消化系统肿瘤关系的研究进展被引量：3
- 2017年
- 髓样抑制细胞（MDSC）是一种肌源性干细胞，在肿瘤源性细胞因子作用下产生，其自身有免疫抑制作用．也能通过多种机制介导T淋巴细胞的免疫抑制功能。近年的研究结果表明：MDSC参与肿瘤免疫逃逸、免疫耐受等病理过程，在促进肿瘤发生、发展方面起重要作用。笔者就MDSC的产生及其免疫抑制作用机制、MDSC与食管癌、胃癌、结直肠癌、肝细胞癌、胆囊癌、胰腺癌等消化系统肿瘤关系的研究进展作一综述。
- 黄颖滨邰强焦兴元
- 关键词：消化系统肿瘤免疫抑制靶点
- MRN复合物中的NBS1对胆囊癌细胞增殖与凋亡的影响
- 2019年
- 目的 探讨MRN复合物在正常胆囊,单纯慢性胆囊炎、胆囊结石及胆囊癌组织中的表达及NBS1在胆囊癌中的作用及意义.方法 免疫组化检测不同胆囊病变中MRN复合物表达情况,Western blot、噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪检测NBS1对胆囊癌细胞增殖、凋亡的影响.结果 MREll及RAD50在不同胆囊病变中的表达差异无统计学意义(分别χ^2=2.724、1.697,均P>0.05).NBS1在正常胆囊、单纯慢性胆囊炎、胆囊结石及胆囊癌中阳性率分别为92.6%(50/54)、87.8%(36/41)、61.2% (30/49)、15.3% (9/59),差异有统计学意义(χ^2=87.388,P<0.01).Western blot结果显示NBS1可以上调Bax,下调Bcl-2介导凋亡.MTT法结果显示实验组在24、48、72 h相对吸光度分别为(1.120±0.006)、(1.600±0.004)、(1.83 ±0.01),低于对照组(1.350±0.009)、(1.99±0.01)、(2.260±0.003) (F=7.659,P< 0.01).流式细胞仪检测显示实验组凋亡细胞比例(17.23%±0.56%)高于对照组(4.13%±0.67%)(t=9.133,P<0.01).结论 NBS1表达与胆囊癌密切相关,能抑制胆囊癌细胞增殖,促进凋亡.
- 陈光宇黄颖滨汪洋何睿杜军焦兴元
- 关键词：胆囊肿瘤细胞增殖细胞凋亡
- 转化生长因子β1协同基质细胞衍生因子1通过抑制β连环素活性影响肝卵圆细胞增殖被引量：4
- 2013年
- 目的探讨基质细胞衍生因子1（SDF-1）在肝卵圆细胞增殖过程中的效应、影响因素及作用机制。方法流式细胞术检测大鼠肝卯圆细胞株WB-F344细胞表面趋化性细胞受体因子4（CXCR4）的表达情况。Westernblot法检测细胞中β连环素蛋白磷酸化水平。激光共聚焦显微镜观察细胞内β连环素的分布情况。荧光定量PCR检测经典Wnt通路下游基因Ccndl、c-Myc的表达。将细胞分为对照组、SDF-l组、转化生长因子βl（TGF-β1）组、SDF-1＋TGF-β1组、SDF-1＋TGF-β1＋CXCR4抑制剂组，噻唑蓝法检测各组细胞增殖情况。结果WB-F344细胞中CXCR4的表达量很低，而TGF-β1可上调WB-F344细胞CXCR4的表达（CXCR4阳性率上升39．5％）。SDF-1结合于CXCR4后可促进肝卵圆细胞中β连环素磷酸化，抑制β连环素入核，下调下游基因Ccndl、c-Myc的表达。200μg／L的SDF-1单独作用72h后WB-F344细胞的增殖情况（0．5124-0．010）与对照组（0．513±0．008）相比差异无统计学意义（t=0．337，P〉0．05），5肌∥L的TGF-β1可轻度抑制其增殖（0．393±0．007，t=28．001，P〈0．05），而SDF-1＋TGF-β1组WB-F344细胞增殖能力较TGF-β1组进一步减弱（0．272±0．009，t=32．204，P〈0．05）。结论TGF-131可上调肝卵圆细胞中CXCR4的表达，协同SDF-1通过调控B连环素的功能状态，抑制肝卵圆细胞体外增殖。
- 胡荣林黄庆杨学伟彭和平杜军焦兴元
- 关键词：转化生长因子Β1CXCR4Β连环素
- Yes相关蛋白1对胆囊癌细胞增殖及迁移的影响被引量：10
- 2017年
- 目的探讨正常胆囊黏膜上皮、胆囊黏膜单纯性增生、不典型增生及胆囊癌黏膜上皮中Yes相关蛋白1（YAP1）的表达及其在胆囊癌病程发展中的作用和机制。方法应用免疫组化法检测50例正常胆囊、101例慢性胆囊炎／胆囊结石及100例原发性胆囊癌患者的胆囊活检标本石蜡切片中胆囊黏膜上皮细胞类型及YAPl蛋白的表达与分布情况。原代培养胆囊黏膜上皮细胞，应用实时PCR（RT—PCR）法和蛋白印迹检测（Western blot）法比较正常黏膜上皮细胞、慢性胆囊炎上皮细胞与胆囊癌SGC996细胞YAP1 mRNA及蛋白表达差异情况。使用siRNA干扰胆囊癌SGC996细胞中YAP1的表达，并采用RT-PCR法和Western blot法检测EMT相关蛋白表达，MTT法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞周期。结果免疫组化显示YAP1在胆囊癌、胆囊炎／胆囊结石组和正常对照组胆囊黏膜中的表达率分别为87．0％（87／100）、56．4％（57／101）和5．0％（1／20）（P〈0．01）。蛋白印迹显示YAP1蛋白在胆囊癌组织及细胞中表达明显高于正常组织及细胞，RT-PCR显示胆囊癌细胞YAP1mRNA水平为正常胆囊黏膜上皮细胞的（12．5±1．2）倍（P〈0．05）。siRNA干扰SGC996细胞中YAPl表达后EMT相关蛋白E．cad、B—catenin、MMP2、FN、Vimentin等表达下降，细胞活力下降，细胞周期被阻滞在S期。结论YAPl与胆囊癌细胞增殖及迁移密切相关，可能通过EMT途径促进肿瘤进展。
- 何睿汪洋黄颖滨杜军焦兴元
- 关键词：原发性胆囊癌上皮间质转化肿瘤进展
- 公民身后器官捐献肝脏质量标准供者评分系统研究
- 2022年
- 目的分析公民身后器官捐献供肝移植后发生移植肝失功能的危险因素。方法回顾性分析2011年11月至2018年12月中山大学附属第一医院器官捐献和移植中心供者资料和肝移植受体资料。应用倾向性评分匹配法对供者和肝移植受者资料进行评估和筛选,得到供受体间协变量均衡的样本。结果供者男70例,女20例,年龄(40.6±16.3)岁,受者男70例,女20例,年龄(41.8±20.3)岁。移植肝失功能与下列参数显著相关:供者心肺复苏时间(t=0.429,P=0.000)、吲哚菁绿15 min滞留率(χ^(2)=67.151,P=0.000)、肝功能分级(χ^(2)=54.154,P=0.000)、大泡性脂肪肝分级(χ^(2)=8.120,P=0.017)、小泡性脂肪肝分级(χ^(2)=16.000,P=0.001)、ICU住院时间(χ^(2)=14.900,P=0.001)、血肌酐水平(χ^(2)=44.685,P=0.000)。本研究建立了公民身后器官捐献肝脏质量标准供者评分系统。供肝质量分为四级,很好地对应肝移植受者的预后。结论根据移植肝失功能高危因素分析建立的供者评分系统及分级标准,可以对我国公民身后供肝质量做出客观评价。
- 何睿黄颖滨韩明王小平周健袁小鹏郑毅涛陈岗廖苑李劲东朱晓峰邰强黄洁夫焦兴元
- 关键词：肝移植
- 亚常温机械灌注在扩大标准供者肝脏保存中的研究进展被引量：1
- 2016年
- 肝移植是治疗终末期肝病最有效的方法，但是器官短缺是全世界肝移植所面临的共同难题。随着等待肝移植的患者增多，供肝短缺问题更加严峻，所以增加供者来源十分重要。
- 汪洋焦兴元何晓顺
- 关键词：供者来源肝脏保存等待肝移植终末期肝病
- 卵圆细胞的生物学特性及其与原发性肝癌的关系被引量：4
- 2015年
- 目的介绍卵圆细胞的概况及其与原发性肝癌关系的研究进展。方法查阅国内外近年来有关卵圆细胞和原发性肝癌关系的文献并做综述。结果卵圆细胞是一种肝脏干细胞,定位于Hering管。在肝细胞严重受损或分裂增生受抑制时可向肝细胞和胆管上皮细胞分化。近年来研究发现了许多新的卵圆细胞表面标志物,推动了卵圆细胞的识别。卵圆细胞的增生程度与慢性肝病的恶性程度和炎症程度呈正相关,并且参与了肝癌的发生、发展、复发和转移,与肝癌的预后密切相关。结论深入研究卵圆细胞的生物学特性,将为原发性肝癌的诊断、治疗和预防提供新的策略。
- 张鹏朱晓峰焦兴元
- 关键词：原发性肝癌卵圆细胞干细胞标志物预后
- 超低温联合亚常温机械灌注保存肝脏实验技术研究进展
- 2020年
- 目前临床上应用最广泛的肝脏保存方式为静态低温保存技术,理论上仅可保存肝脏12 h。随着静态低温保存时间的延长,肝脏的活性会逐步下降。这限制了器官的运输和匹配。超低温(不结冰)保存联合亚常温机械灌注技术可以显著延长大鼠肝脏的有效保存时间长达3~4 d。这对保证肝脏的公平分配,降低肝脏的废弃率,具有极大的现实意义和临床价值。本文综述了超低温联合亚常温机械灌注保存肝脏实验技术研究进展。
- 俞亦飞李益虎焦兴元
- 关键词：超低温冷冻保护剂肝脏保存
