国家教育部博士点基金(20070157010)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
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- 不吸水链霉菌辽宁变种基因转移系统的建立
- 2008年
- 以嘧肽霉素生物合成阻断突变株UV2136为研究对象,建立了不吸水链霉菌辽宁变种的基因转移系统。UV2136对硫链丝菌素高度敏感,选择含有该抗生素标记的质粒pIJ702和pWHM3,探索其转化UV2136的可能性。结果表明:UV2136含有较强的限制修饰系统,采取热衰减法获得原生质体、原生质体热处理、冷处理、EDTA处理、质粒DNA变性等,均不能实现质粒pIJ702向UV2136的转化。来自非甲基化宿主E.coli ET12567的pWHM3也无法实现转化,而源于E.coli DH5α的甲基化pWHM3,可以低频转化菌株UV2136,转化效率分别为4转化子.μg-1 pWHM3,经自身修饰的pWHM3可实现高效转化,达到104转化子.μg-1pWHM3。
- 魏颖颖赵秀香吴元华
- 关键词：吸水链霉菌嘧肽霉素甲基化
- 嘧肽霉素生物合成阻断突变株原生质体制备和再生条件的研究被引量：3
- 2008年
- 针对嘧肽霉素的生物合成阻断突变株,研究了其最佳的菌体培养、原生质体制备和再生条件。采用改良的含15%蔗糖、0.5%甘氨酸的YEME液体培养基振荡培养36h,获得细腻丰富的菌丝体;对不同的酶浓度、酶解温度和酶解时间进行3因子4水平的正交试验,筛选最佳酶解条件为:溶菌酶浓度2mg·mL-1,28℃,作用90min,可获得最高的制备率为99%;再生培养基以R2YE为最佳,采取直接涂布方式,25.5℃培养可达48%的再生率。
- 魏颖颖吴元华张晓雯赵秀香高芬
- 关键词：原生质体
- 菌株Streptomyces S_(90)抗菌物质的初步鉴定及抑菌作用机制研究
- 2010年
- 采用Doskochilova溶剂系统层析、pH纸层析和纸电泳测定表明:菌株StreptomycesS90发酵液中具有抑菌活性的物质为一种单组分碱性水溶性抗生素。采用大孔树脂吸附法提取得到了该抗菌物质的粗提物,研究其对烟草赤星病菌的作用机制表明,当抗菌物质浓度为1.6mg/mL时,对菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别达到82.06%和78.80%;随着各处理浓度的增加,抗菌物质使病菌菌丝细胞膜电导率和丙二醛含量变化均增加;抗菌物质对病菌菌丝细胞壁组成物质几丁质没有影响。
- 孙泽洋吴元华赵秀香
- 关键词：STREPTOMYCESS90抗菌物质烟草赤星病菌抑菌作用
- 嘧肽霉素一种新的生物活性组分分离纯化研究被引量：4
- 2011年
- 通过生物活性检测发现Streptomyces tz92菌株嘧肽霉素发酵液中一种新的抗细菌生物活性物质,为了明确其适宜的分离纯化工艺,试验研究了利用大孔吸附树脂,硅胶柱层析和分子筛层析分离纯化该组分的条件和效果。试验结果显示,发酵液经过大孔树脂SP825L吸附50%甲醇洗脱、硅胶柱层析氯仿∶正丁醇∶甲醇∶乙酸=42∶2∶4∶2(体积比)洗脱、Sephadex LH-20 70%甲醇洗脱可以得到该组分纯品。
- 穆凌霄伏颖赵秀香吴元华
- 关键词：嘧肽霉素分离纯化生物活性
- 嘧肽霉素发酵液抗真菌组分的高效液相色谱分析被引量：2
- 2011年
- [目的]采用反相高效液相色谱法分析嘧肽霉素发酵液,外标法测定其中抗真菌组分的含量。[方法]使用DIKMA DiamonsilⅡC18反相柱和紫外可变波长检测器,以甲醇-水(体积比为20∶80)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为278 nm。[结果]嘧肽霉素抗真菌组分保留时间为10.2 min,方法的线性相关系数为0.999 8,样品平均回收率为99.4%,变异系数为0.25%。[结论]该方法是用于发酵控制和用药指导的理想分析方法。
- 穆凌霄伏颖吴元华
- 关键词：嘧肽霉素高效液相色谱
