陕西省科技攻关计划(2008k02-06-2)
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 相关作者：李勤凡荆新堂孔祥雅郭伟梁洁更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 呋喃丹降解菌的研究进展被引量：6
- 2010年
- 呋喃丹是一种高残留、高毒性、难降解的有机杀虫剂,目前在我国的广泛使用,常造成环境污染和人畜中毒。近几十年来,国内外在呋喃丹的毒性危害和降解方面,尤其是细菌降解方面做了大量的研究工作,本文对呋喃丹的毒害、降解菌的筛选、降解机理、降解酶、构建基因工程菌等方面进行了综述。
- 荆新堂李勤凡郭伟孔祥雅张丽慧
- 关键词：降解机理降解基因
- 疯草内生真菌FEL3生产SW培养基的最佳碳氮比优化被引量：1
- 2011年
- 为探讨碳氮比对甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis)内生真菌FEL3产苦马豆素(Swainsonine,SW)的影响,利用单因素试验对最佳碳源和氮源进行了筛选。结果表明:蔗糖和蛋白胨分别是理想的碳源和氮源;采用中心组合设计(Central Composite Design,CCD)考察液体培养基中蔗糖和蛋白胨的比率对内生真菌FEL3产SW的影响,并利用Design-Expert 7.1.6软件模拟得到二次多项式回归方程的预测模型;当蔗糖为1.47 g.L-1,蛋白胨为0.29 g.L-1时,SW浓度达到最大值6.71×10-4mol.L-1。试验结果将为利用疯草内生真菌FEL3批量生产SW提供技术支持。
- 郭伟李勤凡孔祥雅任杰荆新堂
- 关键词：苦马豆素碳氮比
- 埃里格孢菌FEL3产SW发酵培养条件的优化被引量：2
- 2011年
- 【目的】对埃里格孢菌（Undifilim oxytropis）FEL3产苦马豆素（SW）的发酵条件进行优化。【方法】在不同碳源（葡萄糖、蔗糖、乳糖、燕麦片、可溶性淀粉）、氮源（豆粉、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨、硝酸钠、氯化铵、硫酸铵）、无机盐（MgSO4.7H2O,FeSO4.H2O,ZnSO4.H2O,CaCl2.2H2O,CuSO4.5H2O,KH2PO4）、初始pH（4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5）和接种量（体积分数2%,4%,6%,8%,10%）培养条件下,将埃里格孢菌FEL3接种到液体培养基中,培养15 d后,测定菌丝湿、干质量浓度和菌液中SW浓度,选择最佳培养条件。【结果】当碳源为燕麦片、氮源为豆粉、无机盐为CuSO4.5H2O、培养基初始pH为6.57.0、接种量为体积分数8%时,埃里格孢菌FEL3菌丝湿、干质量浓度和菌液中SW浓度均较高。【结论】得到了埃里格孢菌FEL3产SW的最佳培养条件,为用埃里格孢菌FEL3大量生产SW奠定了基础。
- 郭伟李勤凡孔祥雅任杰荆新堂
- 关键词：苦马豆素
- 产萱草根素内生真菌的分离与鉴定被引量：1
- 2012年
- 为探讨萱草(Hemerocallis)根中是否存在产生萱草根素的内生真菌,从北萱草(H.esculenta)根中分离得到4株内生真菌,在马铃薯(Solanum tuberosum)葡萄糖琼脂培养基(PDA)上培养20d后收集菌丝,应用薄层色谱法和紫外分光光度法分别检测菌丝提取液中的萱草根素,筛选可产生萱草根素的内生真菌。结果表明:菌株XC-1A为产萱草根素内生真菌,含量达359.88μg·g-1,根据形态学观察和5.8S rDNA-ITS序列分析结果,确定XC-1A为Zalerion varium。北萱草中存在可产生萱草根素的内生真菌。
- 梁洁杨凯李勤凡姜振国孔祥雅杨国栋金意敏
- 关键词：萱草根素内生真菌
- 山羊溶酶体α-AMA基因的克隆、生物信息学及组织表达谱分析
- 2012年
- 本研究旨在对山羊溶酶体α-甘露糖苷酶(α-AMA)基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考牛α-AMA基因序列设计引物,采用PCR技术克隆山羊α-AMA基因序列,并利用荧光定量RT-PCR进行组织表达谱分析以及进行生物信息学预测。首次获得了山羊α-AMA基因,含有完整CDS编码区3 000bp,编码999个氨基酸,其中前50个氨基酸为信号肽序列。其编码区的核苷酸序列和预测氨基酸序列与牛的α-AMA相似性最高,分别为95.93%和94.79%。组织表达谱分析表明α-AMA在山羊各组织均不同程度的表达,其中在肺脏、肝脏、小脑表达量较高。生物信息学预测发现,α-AMA蛋白属于糖苷水解酶38家族成员,有2个保守的结构域,存在9个N-糖基化位点。SWISS-MODEL同源建模山羊α-AMA具有良好的可信度。本研究为探讨酶的作用机理及疯草解毒剂的研制提供了理论依据。
- 孔祥雅李义程敏荆新堂李勤凡
- 关键词：荧光定量PCR生物信息学同源建模
- 变异黄芪内生真菌FEL1A菌株固体培养条件优化被引量：5
- 2010年
- 对变异黄芪中分离得到的内生真菌FEL1A菌株进行了固体优化培养条件的探索,在不同温度、碳源、氮源,初始pH条件下,检测FEL1A的生长情况。结果表明,FEL1A生长的最适温度为20℃,初始pH为7.0;以燕麦片作为碳源时FEL1A生长最快,培养20 d后菌落大小为13.32 mm±0.77 mm;蛋白胨作为氮源时FEL1A生长最快,培养20 d后菌落增至18.14 mm±0.64 mm。
- 郭伟李勤凡张美先林乐荆新堂王建华
- 关键词：真菌培养疯草苦马豆素
- 黄连产小檗碱内生真菌的分离鉴定被引量：11
- 2013年
- 为探索黄连中是否存在产小檗碱的内生真菌,采用组织块法对黄连(Coptis chinensis Franch.)中的内生真菌进行分离,以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)为指示菌,用琼脂块法对分离的内生真菌进行抑菌活性试验,经摇瓶发酵培养后,用薄层层析法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)检测其代谢产物中的小檗碱,并对其产量进行分析,采用形态学和分子生物学相结合的方法对产小檗碱内生真菌进行鉴定。结果表明;共分离获得12株内生真菌,其中菌株HL-BC对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性,TLC和HPLC检测结果显示,内生真菌HL-BC的发酵液中含有小檗碱,含量为0.664 mg·L^(-1),根据形态学特征和5.8S rDNAITS序列分析,将其确定为拟茎点霉属(Phomopsis)。这表明黄连中存在能产生小檗碱的内生真菌,为发酵生产小檗碱及黄连的综合开发奠定了理论基础。
- 厉秀秀方玉鹏赖毕梁洁李勤凡
- 关键词：内生真菌黄连小檗碱
