国家自然科学基金(30701130)
- 作品数:5 被引量:17H指数:3
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- 相关机构:山东大学山东省立医院山东中医药大学更多>>
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- RNA干扰下调Gremlin表达对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞分泌FN、ColⅣ的影响被引量:3
- 2012年
- 目的探讨在高糖培养条件下,应用慢病毒介导的RNA干扰下调Gremlin表达对大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)分泌纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响及机制。方法构建Gremlin基因特异性的短发夹双链RNA(shRNA)慢病毒GREM1-RNAi-LV,感染RMCs后,分为5.5 mmol/L葡萄糖组、30 mmol/L葡萄糖组、30 mmol/L葡萄糖+GREM1-RNAi-LV组及30 mmol/L葡萄糖+NC-GFP-LV(感染携带绿色荧光蛋白的阴性对照慢病毒)组,分别处理48 h,RT-PCR检测Gremlin mRNA表达,Western Blot检测Gremlin蛋白表达,ELISA法检测细胞上清FN、ColⅣ蛋白表达变化。结果与5.5 mmol/L葡萄糖组相比,30 mmol/L葡萄糖组Gremlin mRNA和蛋白水平显著升高(P均<0.05),细胞外基质分泌FN、ColⅣ蛋白增加(P均<0.05),而RNA干扰能下调高糖诱导的Gremlin mRNA与蛋白高表达(P<0.05),降低细胞外基质FN、ColⅣ蛋白分泌(P<0.05)。结论慢病毒介导的RNA干扰可明显抑制高糖诱导的Gremlin高表达,降低细胞外基质分泌,改善肾脏纤维化,可能是一个预防和治疗糖尿病肾病新型的潜在靶点。
- 宋玉文韩文霞高聆于春晓刘丹丹赵家军
- 关键词:RNA干扰GREMLIN
- 活血化瘀、益气补肾中药复方对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维连接蛋白表达的影响
- 2013年
- 目的研究活血化瘀、益气补肾中药复方对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)增殖及纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法以大鼠RMCs为研究对象,用高糖和不同浓度的中药处理RMCs,分别作用24、48 h后,用噻唑蓝(MTT)法检测RMCs的增殖情况,实时定量PCR法检测FN mRNA表达,ELISA法检测FN蛋白表达。结果处理24 h和48 h,与对照组比较,单纯高糖组细胞增殖明显升高(P<0.01,P<0.01);FN mRNA表达及蛋白表达也明显升高(P<0.01);与高糖组比较,24 h时各浓度中药组RMCs增殖及FN蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);48 h时各浓度中药组RMCs增殖及FN蛋白及mRNA表达较高糖组明显下降(P<0.01,P<0.01)。结论高糖能够刺激RMCs增殖及FN蛋白及mRNA表达,中药处理24 h对高糖刺激的RMCs增殖及FN蛋白及mRNA表达的作用不明显,中药处理48 h能够逆转高糖刺激下RMCs的增殖及降低FN蛋白及mRNA的表达。
- 刘丹丹韩文霞宋玉文娄凯于春晓高聆赵家军
- 关键词:中药复方肾小球系膜细胞
- 糖肾康中药复方含药血清对高糖环境下RMCs的增殖及TGF-β1/Smad2/3信号通路的影响被引量:10
- 2015年
- 目的研究糖肾康中药复方含药血清对高糖环境下大鼠肾系膜细胞(RMCs)增殖及TGF-β1/Smad2/3信号通路的影响。方法 12只SD大鼠采用随机数字法分为小剂量中药组、中剂量中药组、大剂量中药组,空白组,每组3只,灌胃7天后门静脉取血。分别用含中药血清和普通大鼠血清培养RMCs。采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞的增殖率,以确定最佳中药血清浓度;实时定量、PCR及酶联免疫吸附剂(ELISA)法测定TGF-β1mRNA及蛋白的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)及免疫荧光方法测定Smad2/3蛋白表达及磷酸化水平。结果不同剂量的糖肾康中药含药血清均能抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖;中药血清可显著抑制高糖诱导的TGF-β1表达及Smad2/3磷酸化。结论糖肾康中药含药血清能抑制高糖刺激下的RMCs增殖,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad2/3通路有关。
- 娄凯何永魏静韩文霞刘丹丹宋玉文姜秀云于春晓高聆管庆波
- 关键词:含药血清增殖
- 以低血糖为首发症状的盆腔恶性孤立性纤维瘤1例
- 2022年
- 通过对患者临床资料进行分析,详细描述本院诊断的1例由盆腔恶性孤立性纤维瘤(MSFT)过度分泌胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)导致患者发作性低血糖伴低血钾的罕见病例。该患者低血糖发作时血清胰岛素水平明显降低,考虑为非胰岛细胞肿瘤性低血糖,CT检查结果显示盆腔存在巨大MSFT占位,经手术切除后随访1年患者未在发生低血糖及低血钾症状。国内外此类病例报道罕见,通过本例病例的报道,以期提高临床医生对此类疾病的认识。
- 王斓惠孔磊胡海颖张焱何永韩文霞
- 健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下肾小球系膜细胞增殖的影响被引量:4
- 2013年
- 目的探讨健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)增殖的影响及对转化生长因子-β1(TGF-β1)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响。方法将常规培养的RMCs分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖组)、甘露醇组(5.6 mmol/L葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖组)、高糖+中药复方组(30 mmol/L葡萄糖+0.65 mg/mL中药复方)。培养48 h,采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,分析健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下RMCs增殖的影响。酶联免疫法检测TGF-β1的表达,实时定量PCR法检测BMP-7 mRNA的表达。结果高糖组RMCs增生及TGF-β1的表达较对照组增加明显,BMP-7 mRNA的表达则明显下降,高糖+中药复方组较高糖组RMCs增生及TGF-β1的表达明显下降,BMP-7mRNA的表达明显升高。结论健脾益肾、活血化瘀中药复方能够抑制高糖刺激下的RMCs增殖及TGF-β1的表达,并上调BMP-7 mRNA的表达。
- 刘丹丹高聆赵家军韩文霞
- 关键词:大鼠肾小球系膜细胞健脾益肾活血化瘀中药复方骨形态发生蛋白-7