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艰难梭菌分离株快速鉴定和毒素检测的多重PCR方法的建立被引量：6: 2011年; 目的建立可同时进行艰难梭菌分离株菌种鉴定和毒素检测的多重PCR方法。方法用于多重PCR中的3对引物分别为艰难梭菌的种特异性的磷酸丙糖异构酶（triose phosphateisomerase，tpi）基因、毒素A基因部分序列、毒素B基因部分序列。艰难梭菌ATCC9689等21株标准菌株和47株临床分离艰难梭菌分别被应用于多重PCR最低检出限、特异性评估试验和验证试验。同时，应用ELISA对47株分离株进行毒素A／B检测。结果该多重PCR方法可检测到最低DNA浓度为0．5pg／μl，特异性为100％。47株艰难梭菌分离株中埘基因均为阳性，其中毒素基因A（＋）／B（＋）为37株，毒素基因A（-）／n（-）为10株，未检出毒素基因A（-）／B（＋）菌株。47株毒素A／B检测结果为20株阳性、27株阴性。毒素A／B阳性的20株菌均为多重PCR检测毒素基因A（＋）／B（＋）。结论成功建立用于艰难梭菌的菌种鉴定和毒素分析结合为一体的多重PCR方法，对临床诊断艰难梭菌感染有着重要应用价值。; 贾红兵王靖杨辉程颖卢金星鄢盛恺; 关键词：艰难梭菌聚合酶链反应酶联免疫吸附试验

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国家科技重大专项(2009ZX10004203)