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国家自然科学基金(30500022)
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3
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钱景
胡勇
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余蓓蓓
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2011
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呼吸道合胞病毒G蛋白基因重组质粒诱导小鼠免疫保护性及机制研究
2010年
目的构建编码呼吸道合胞病毒(RSV)G蛋白基因的重组质粒,观察其对RSV感染小鼠的保护性及特异性免疫效应,为研制安全有效的RSV新疫苗提供线索和实验依据。方法利用基因重组方法构建含RSVG蛋白编码基因的重组质粒,测序和酶切鉴定,Westernblot检测目的基因经体外表达后的免疫原性。重组质粒免疫小鼠后以RSV感染,病毒滴定法检测肺组织标本中RSV滴度,HE染色法检查肺组织病理改变,ELISA检测血清抗体水平,双抗体夹心ELISA测定肺泡灌洗液(BALF)内Th1/Th2细胞因子表达量,流式细胞术检测BALF中T淋巴细胞亚群数量及活化状态。结果成功构建了编码RSVG蛋白基因的重组质粒pcDNA3.1G。Westernblot证实目的蛋白在体外具有免疫原性。被免疫小鼠感染RSV后肺组织病毒滴度降低,肺组织中未见明显的炎性细胞浸润。小鼠血清中产生较高滴度的抗RSV—GIgG。小鼠BALF细胞中CD4+CD25+T淋巴细胞比例显著增加,并且IFN-γ(Th1)、IL-4(Th2)两类细胞因子表达显示平衡。结论编码RSVG蛋白基因的重组质粒pcDNA3.1G能诱导产生CD4+CD25+T细胞亚群,对小鼠具有明显的保护作用。
余蓓蓓
胡勇
彭慧琴
严杰
钱景
关键词:
呼吸道合胞病毒
G蛋白
重组质粒
T淋巴细胞
福尔马林灭活RSV疫苗增强性疾病模型建立及特征研究
2009年
以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗(FI-RSV)预防接种的婴儿或学龄前儿童,自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象,称为“疫苗增强性疾病”(vaccine enhanced disease,VED)。目前关于VED免疫病理调控机制的研究多建立在动物模型基础上。本研究通过制备FI—RSV疫苗,建立BALB/c小鼠FI—RSV相关VED模型,定义其病毒滴度、抗体水平以及病理诊断特征,为进一步研究RSV相关VED的分子机制提供实验资料。
余蓓蓓
彭慧琴
顾晓萌
刘怡
严杰
钱景
关键词:
疾病模型
福尔马林
灭活
BALB/C小鼠
呼吸道合胞病毒
病原微生物感染
特异性免疫在呼吸道合胞病毒疫苗增强疾病过程中的作用
2011年
呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗可诱发疫苗增强疾病,以肺组织广泛的炎细胞浸润和嗜酸性粒细胞增多为典型特征。探索RSV疫苗增强疾病的免疫机制,尤其是宿主体液和细胞免疫反应不平衡在疫苗增强疾病过程中的作用,有助于安全有效的RSV疫苗的研究。
胡勇
钱景
关键词:
呼吸道合胞病毒
体液免疫
细胞免疫
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