国家自然科学基金(30500023)
- 作品数：4 被引量：449H指数：4
- 相关作者：王辉徐英春陈民钧杨启文朱元珏更多>>
- 相关机构：北京协和医院北京大学第三医院昆明医学院第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 碳青霉烯类耐药的不动杆菌分子流行病学及其泛耐药的分子机制被引量：246
- 2006年
- 目的调查不动杆菌属对碳青霉烯类的耐药性,研究碳青霉烯类耐药的不动杆菌(CRAB)分子流行病学及耐药机制。方法收集2003—2004年我国10家教学医院187株鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法确定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和随机引物多态性DNA(RAPD)分型对128株CRAB进行分子流行病学研究;对多种β内酰胺酶基因进行聚合酶链反应(PCR)及序列分析;对整合子可变基因进行PCR及序列分析。12%十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析CRAB菌株的外膜孔通道蛋白(OMP)。体外筛选亚胺培南的耐药突变子。结果多中心的数据显示,碳青霉烯类耐药率从2003年的4·5%升至2004年的18·2%,多重耐药菌株从2003年的33%升至2004年的48%。北京、广州、福州、杭州、济南的7家医院均发现CRAB耐药克隆的暴发流行。2004年北京协和医院发生泛耐药株的暴发,波及18个病房的74例患者,59·4%的患者(44例)为感染,主要引起肺部感染和菌血症,其中菌血症的病死率40·2%。耐药克隆株均产多种β内酰胺酶:OXA-23型碳青霉烯酶或IMP-8型金属酶、PER-1型酶、高产AmpC酶和TEM-1酶。整合子含有携带氨基糖苷类、利福平、氯霉素的修饰酶及金属酶(blaIMP-8)。不同克隆株OMP差异很大。利血平试验未发现外排机制的高表达。体外成功选择出亚胺培南的耐药突变子,OMP20000的缺失、OMP29000和OMP21000的表达降低是突变子耐药的主要原因。头孢哌酮/舒巴坦、黏菌素、米诺环素可以联合用于CRAB的治疗。结论CRAB克隆株的传播是造成中国多家医院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因。不动杆菌通过产生碳青霉烯酶、不同基因盒的整合子、外膜孔蛋白多个通道的缺失,共同介导多重耐药性或泛耐药性。CRAB株引起的感染预后差,必须采取有效的感染控制措施和抗菌药物的干预政策以控制耐药株的传播。
- 王辉郭萍孙宏莉杨启文陈民钧朱元珏徐英春谢秀丽
- 关键词：不动杆菌属碳青霉烯类碳青霉烯酶
- 不动杆菌属多重耐药及泛耐药的分子机制研究被引量：192
- 2006年
- 目的调查β内酰胺酶、整合子、外膜蛋白(Omp)及外排泵在多重耐药和泛耐药不动杆菌属中所起的作用。方法收集1999至2004年北京、广州和福州对碳青霉烯类耐药的非重复的90株菌。脉冲场凝胶电泳(PFGE)和随机引物多态性DNA(RAPD)分型确定这些耐药株的亲缘关系,选取7个不同克隆深入研究其机制。等电聚焦电泳测定酶的等电点;碱裂解法提取质粒;对各种β内酰胺酶TEM、SHV、PER、OXA-、IMP-、VIM-进行聚合酶链反应(PCR)及序列分析;对整合子基因进行PCR及序列分析。结果2004年北京协和医院发生泛耐药株P克隆的暴发流行,此克隆株对常用广谱抗菌药物均不敏感。7个不同克隆株均产多种β内酰胺酶:TEM-1酶、高产AmpC酶、SHV型酶、OXA-23型碳青霉烯酶(6株)及IMP-8型金属酶(1株),1个克隆株还产PER-1型酶。这7个克隆株对大多数超广谱β内酰胺类(包括碳青霉烯类)、红霉素、氯霉素、利福平均耐药,2个克隆株对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星敏感,4个克隆株对左氧氟沙星敏感。所有7株对米诺环素、黏菌素敏感。发现5种不同结构的整合子,携带水解氨基糖苷类、利福平、氯霉素及碳青霉烯类(b laIMP-8)的耐药基因。结论不动杆菌产生OXA-23型碳青霉烯酶或IMP型金属酶、通过基因重组获得各种携带不同基因盒的整合子,共同介导其多重耐药性或泛耐药性。泛耐药株对个别不常用的抗菌药物如黏菌素、米诺环素仍敏感。
- 王辉孙宏莉宁永忠杨启文陈民钧朱元珏徐英春谢秀丽
- 关键词：不动杆菌属抗药性
- 自动化细菌鉴定仪和碳青霉烯酶基因OXA-51扩增在不动杆菌属细菌鉴定中的价值被引量：7
- 2009年
- 目的评价自动化细菌鉴定仪Phoenix和Vitek2 Compact以及碳青霉烯酶基因OXA-51（blaOXA-51-like）扩增在不动杆菌属细菌鉴定中的价值。方法收集2006-2007年北京协和医院临床标本中分离的非重复不动杆菌属细菌50株，以扩增性核糖体DNA限制性酶切片段分析（amplified ribosomal DNA restriction analysis，ARDRA）为参考方法，分别采用blaOXA-51-like基因扩增和Phoenix、Vitek2 Compact细菌鉴定仪进行鉴定。结果与ARDRA分子鉴定结果进行对比，blaOXA-51-like基因扩增鉴定方法敏感度为100％，特异度为100％；细菌鉴定仪Phoenix和Vitek2 Compact鉴定到种的准确率分别为44％和56％。结论不动杆菌属仪器表型鉴定准确率不高；对于鲍曼不动杆菌，blaOXA-51-like基因扩增为一种快速可靠的鉴定方法。在研究不动杆菌的耐药机制或同源性分析时，可采用ARDRA方法进行鉴定。
- 王贺王辉徐英春陈民钧
- 关键词：不动杆菌属细菌蛋白质类限制性片段长度
- OXA-51样D类碳青霉烯酶在鲍曼不动杆菌中广泛分布
- 目的研究全国7家教学医院临床分离的美罗培南敏感与非敏感鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶类型及其分布特点。方法收集2005年北京协和医院、北京朝阳医院、304医院和大连、浙江、南京医院临床分离存活的非重复的美罗培南非敏感不动杆菌1...
- 郭萍陈端王辉杨启文陈民钧徐英春
- 关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶
- 文献传递
- OXA-51样D类碳青霉烯酶在鲍曼不动杆菌中广泛分布被引量：22
- 2007年
- 目的研究全国7家教学医院临床分离的美罗培南敏感与非敏感鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶类型及其分布特点。方法收集2005年北京协和医院、北京朝阳医院、解放军第三○四医院和大连、浙江、南京医院临床分离存活的非重复的美罗培南非敏感不动杆菌126株,并分别从北京协和医院、北京医院、浙江、大连、南京5家医院选取美罗培南敏感的19株菌作为对照,采用琼脂稀释法测定这些菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的 MIC;用多重 PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌中 OXA-23-like、OXA-24-like 和 OXA-58-like 及 OXA-51-like 4个亚组的碳青霉烯酶分布特点。结果收集145株临床非重复的鲍曼不动杆菌,采用多重 PCR 方法检测出 bla_(OXA-51-like)基因127株(87.6%),美罗培南非敏感126株菌中,bla_(OXA-23-like)基因8株,bla_(OXA-23-like)与 bla_(OXA-51-like)基因同时存在的65株(51.6%)bla_(OXA-24-like)基因1株、bla_(OXA-58-like)基因3株。以不同医院为单位,依据药敏谱型挑选4种酶型阳性代表株,分别进行全长引物测定,序列分析 bla_(OXA-24-like)。确定为 OXA-72;3株 bla_(OXA-58-like)确定为OXA-58;15株 bla_(OXA-23-like)确定为 OXA-23;13株 bla_(OXA-51-like)测序结果12株为 OXA-51等位基因 OXA-66,1株为 OXA-68。结论研究结果表明 OXA-66/OXA-51样碳青霉烯酶以最普遍存在的方式广泛分布于鲍曼不动杆菌中。
- 郭萍王辉陈端杨启文徐英春陈民钧
- 关键词：鲍曼不动杆菌抗药性碳青霉烯酶
