国家重点基础研究发展计划(2009CB521705)
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
- 相关作者：王新朱平戎梦瑶陈丽娜樊春梅更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Cetuximab抑制胃癌SGC7901/ADR细胞的增殖并增加其化疗敏感性被引量：6
- 2013年
- 目的:探讨EGFR在胃癌耐药细胞中的表达及作用。方法:采用Western blot和免疫组化检测EGFR蛋白在胃癌耐药细胞系及组织标本中的表达,WST-1检测EGFR特异性抗体Cetuximab对胃癌耐药细胞增殖及化疗敏感性的影响。结果:SGC7901/ADR胃癌耐药细胞系中EGFR的表达明显高于亲本细胞,多数化疗后进展的胃癌组织EGFR的表达高于化疗前组织,针对EGFR的单克隆抗体Cetuximab可抑制SGC7901/ADR细胞的增殖,并增加其对部分化疗药物的敏感性。结论:EGFR过表达是胃癌细胞化疗耐药的分子机制之一,Cetuximab可逆转EGFR高表达耐药细胞的耐药表型。
- 王思萌高柳村帖君卢瑗瑗潘妍雷少妮刘娜吴开春王新
- 关键词：西妥昔单抗胃癌化疗耐药
- CsA通过抑制免疫突触的形成促进类风湿关节炎巨噬细胞的凋亡被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨免疫抑制剂环孢素A(CsA)对类风湿关节炎(RA)患者体内参与免疫突触形成的巨噬细胞凋亡的影响。方法:将人单核细胞株THP-1(human acute monocytic leu-kemia cell line)诱导分化的巨噬细胞经葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin B,SEB)(100μg/L)包被后与活化的Jurkat T细胞(human acute T-cell leukemia cell line)共培养促免疫突触形成,加或不加CsA(1 mg/L),置于无血清RP-MI1640培养液诱导凋亡16 h后,以Annexin V-PI染色,用流式细胞术检测巨噬细胞的凋亡情况。临床收集10例健康对照及10例确诊活动期RA患者外周血,采用免疫磁珠法阴性分选CD4+T细胞并将其与诱导分化的巨噬细胞共培养,亦设加或不加入CsA(1 mg/L)组,研究CsA对免疫突触调控巨噬细胞凋亡作用的影响。结果:在细胞株、健康人及RA患者外周血由单核细胞诱导分化的巨噬细胞和CD4+T细胞相互作用形成免疫突触后巨噬细胞的凋亡率分别为(32.9±2.8)%、(24.7±1.6)%、(14.5%±1.2)%,较相应单独培养的巨噬细胞的凋亡率(61.4±2.4)%、(45.5±2.6)%、(22.9±1.5)%显著降低(P<0.05)。而在加CsA组,细胞株来源的巨噬细胞及RA患者来源的巨噬细胞的凋亡率分别为(48.8±2.0)%、(16.9±1.1)%,较相应参与免疫突触形成的巨噬细胞的凋亡率有所升高(P<0.05),而加入CsA对健康对照巨噬细胞凋亡率的影响差异无统计学意义。结论:RA患者外周血诱导分化的巨噬细胞参与免疫突触的形成后可显著抑制其凋亡率,而CsA能减弱突触对巨噬细胞的这一保护功能,起到促进巨噬细胞凋亡的作用,该结论为减少RA炎性因子的分泌、减弱关节破坏提供了有利的理论依据。
- 朵瑞雪戎梦瑶朱平
- 关键词：免疫突触巨噬细胞凋亡类风湿性关节炎环孢素A
- 免疫突触对类风湿关节炎巨噬细胞凋亡的影响及亲环素A在其中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的 探讨类风湿关节炎（RA）患者外周血诱导分化的巨噬细胞作为抗原递呈细胞参与免疫突触的形成后对其自身凋亡的影响,并进一步研究亲环素A在此过程中的作用.方法 将人单核细胞系（THP-1）诱导分化的巨噬细胞经葡萄球菌肠毒素（SEB）（100 ng/ml）包被后,与活化的Jurkat T细胞共培养,促免疫突触形成后置于无血清RPMI-1640培养液中诱导凋亡,16 h后以Annexin V-碘化丙啶染色,流式细胞术检测巨噬细胞的凋亡情况.以单独无血清RPMI-1640培养液培养的巨噬细胞作为对照.同时,观察加或不加亲环素A（200 ng/ml）对突触调控的巨噬细胞凋亡的影响.临床收集10名健康对照及10例确诊的活动期RA患者外周血,采用免疫磁珠法分离CD4＋T细胞,将其与诱导分化的巨噬细胞进行共培养.数据采用两样本t检验进行分析.结果 在细胞株、健康者及RA患者外周血参与免疫突触形成的巨噬细胞凋亡率分别为（32.9±2.8）%、（24.7±1.6）%、（14.5±1.2）%,较单独RPMI-1640培养液培养的巨噬细胞凋亡率（61.4±2.4）%、（45.5±2.6）%、（22.9±1.5）%显著降低（P〈0.05）.经亲环素A作用后,上述来源巨噬细胞的凋亡率分别进一步降至（27.2±2.1）%、（20.1±1.1）%、（12.9±1.0）%,与相应参与免疫突触形成的巨噬细胞的凋亡率比较差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 RA患者体内参与免疫突触形成的巨噬细胞的凋亡率较单独培养的巨噬细胞的凋亡率显著降低,亲环素A能进一步促进该效应,以上结论 为RA患者体内巨噬细胞的生存时间延长从而分泌大量的细胞因子并导致炎症加剧和骨破坏提供了新的理论依据.
- 朵瑞雪朱平王聪华戎梦瑶陈丽娜汪丽樊春梅
- 关键词：巨噬细胞细胞凋亡亲环素A免疫突触
- 小鼠间质性肺病循环纤维细胞的水平与肺部炎症和纤维化有关被引量：4
- 2014年
- 目的 研究博来霉素（BLM）诱导的间质性肺病（ILD）和胶原蛋白诱导关节炎联合博来霉素诱导的间质性肺病（CIA-ILD）小鼠模型肺部病变的发展、病理特点及其与循环纤维细胞（CF）消长的相关性。方法 90只C57BL/6小鼠随机分为3组： 对照组（S）组、 BLM诱导（B）组和CIA联合BLM诱导（CB）组。分别于BLM处理后第2、7、14、21、28天, HE染色观察肺组织急性炎症, 天狼星红染色观察肺组织纤维化情况, 免疫组织化学染色观察α-平滑肌肌动蛋白的表达, 流式细胞术检测外周血CF（CD45＋Col1＋细胞）并与病变的程度进行相关性分析。结果 2组小鼠肺组织病理变化均呈现为肺泡炎至纤维化的动态改变, B组在BLM刺激后第7-14天炎性病变最明显, 第21、28天病变趋于好转; CB组第14天开始出现肺泡结构明显破坏伴有胶原沉积, 病变逐渐加重至第28天达最高峰; 与B组相比, CB组肺组织羟脯氨酸含量在第14天后明显增加（P〈0.05）; 2组外周血CF均在给药后出现先增高后下降的趋势, 且CB组在第14、21、28天明显高于同一时间点B组的CF数量（P〈0.05）; 免疫组化结果显示, CB组亦在第14天至第28天有大量肌纤维母细胞聚集; 外周血CF数量与肺部炎症、 纤维化评分及肺组织羟脯氨酸含量呈正相关（r=0.847、 0.826、 0.735, P〈0.01）。结论 CIA-ILD小鼠模型更为接近RA-ILD病理过程, 循环纤维细胞可能参与了肺部炎症和纤维化病理进程。
- 符亚璐戎梦瑶朱平陈丽娜樊春梅王彦宏李嘉符向辉
- 关键词：博来霉素胶原诱导关节炎间质性肺病
- 胃癌特异性抗原MGb1-Ag的表达和分布及其临床意义
- 2012年
- 目的:研究MGb1-Ag在人体各系统和器官的正常组织和肿瘤中的表达和分布。观察其在胃癌中表达的临床意义。方法:(1)免疫组织化学检测MGb1-Ag在人体各正常组织和常见肿瘤、正常胃粘膜、慢性胃炎、肠上皮化生、不典型增生、胃癌及淋巴结转移灶中的表达和分布,观察胃癌特异性抗原MGb1-Ag在全身各组织器官中的分布,统计分析其在胃癌中表达与临床病理参数之间的关系;(2)激光共聚焦检测MGb1-Ag在胃癌细胞中的定位。结果:MGb1-Ag仅在少数正常组织中有表达,在常见肿瘤中,主要在胃癌、结肠癌、食管癌、胰腺癌、前列腺癌和部分肝癌、肺癌中阳性表达,而在其它肿瘤中表达较少或几乎不表达。MGb1-Ag在胃癌中的表达与胃癌的分化、分期和淋巴结转移密切相关。MGb1-Ag定位于胃癌细胞系SGC-7901的细胞膜上。结论:MGb1-Ag是胃肠道特异性抗原,在胃癌中的表达与胃癌的分化和转移相关,是胃癌新的候选分子标志物。
- 田启飞任贵安艳新周金锋李凯王新
- 关键词：胃癌单克隆抗体免疫组织化学分子标志物
- 单克隆抗体MGd1对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响
- 2011年
- 目的:研究不同浓度的MGd1对体外培养胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法测定不同浓度MGd1对SGC-7901生长抑制作用;流式细胞术(FCM)进行细胞凋亡分析。激光共聚焦显微镜观察MGd1抗原(MGd1-Ag)的亚细胞定位。结果:MTT结果显示不同浓度的MGd1均对SGC-7901细胞产生明显的抑制效应(P=0.02);流式细胞术分析发现MGd1可诱导SGC-7901发生凋亡并呈浓度和时间依赖性(P<0.01);共聚焦显微镜结果显示MGd1-Ag主要定位于细胞膜上。结论:以上结果证实胃癌特异性单抗MGd1可抑制SGC-7901的增殖并促进凋亡发生。它可能通过与细胞膜上抗原特异性结合,影响下游信号传导,从而发挥抑制效应。
- 安艳新任贵田启飞赵青川
- 关键词：单克隆抗体MGD1增殖凋亡
- 转化生长因子β不敏感的树突状细胞疫苗对肾细胞癌荷瘤小鼠细胞毒性T淋巴细胞的影响被引量：8
- 2013年
- 目的树突状细胞(dendritic cell,DC)是一种最强的抗原提呈细胞,转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)能降低其递呈抗原的效率并促进其凋亡,文中观察TGF-β不敏感肿瘤特异性的DC疫苗免疫后的荷瘤Balb/c小鼠的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对小鼠肾细胞癌Renca细胞的免疫治疗作用。方法利用修饰的TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)质粒构建逆转录病毒载体,转染肾细胞癌Renca细胞裂解物负载的DC,获得表达显性负相TβRⅡ(TβRⅡDN)的DC,流式细胞仪测定细胞表型变化,Western blot检测Smad-2的磷酸化情况,观察TGF-β体外增殖抑制效果。TβRⅡDN的DC疫苗接种荷瘤Balb/c小鼠模型,获取CTL与肿瘤细胞共同孵育51Cr释放实验测定细胞毒作用,同时行酶联免疫吸附(ELISA)测定细胞因子IFN-γ和IL-2变化情况。结果 TβRⅡDN-DC组细胞与DC细胞表型相比无显著变化(P>0.05);对TGF-β增殖抑制不敏感同时检测不到磷酸化的Smad-2,能显著提高免疫小鼠CTL的特异性杀伤作用(P<0.01);IFN-γ和IL-2水平也显著升高(P<0.01)。结论 TGF-β不敏感的DC疫苗能显著提高肾细胞癌荷瘤Balb/c小鼠CTL对相关肿瘤细胞的细胞毒性作用。
- 董杰王龙信唐朝朋邢潇潇张征宇葛京平秦卫军田丰
- 关键词：转化生长因子Β树突状细胞肾细胞癌细胞毒性T淋巴细胞
- 蛋白酶体抑制剂硼替佐米抑制PI3K/Akt通路致结肠癌SW480细胞凋亡被引量：3
- 2013年
- 目的:研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对结肠癌SW480细胞凋亡作用,并进一步探讨其作用机制。方法:硼替佐米1-500nmol/L处理结肠癌SW480细胞24-48小时,MTT法检测细胞存活率、药物IC50值。流式细胞术检测细胞凋亡率。Westernblot技术检测caspase-3,p-Akt和PTEN蛋白表达水平变化。结果:硼替佐米以时间-剂量依赖方式抑制结肠癌SW480细胞增殖,48小时IC50值:87.36 nmol/L。细胞凋亡实验显示药物作用24小时细胞开始出现凋亡,48小时凋亡明显。硼替佐米作用24小时后细胞周期明显阻滞在G0/G1期。Western blot实验显示,80 nmol/L硼替佐米处理结肠癌SW480细胞后PTEN蛋白表达水平随时间明显增加,而p-Akt蛋白随时间表达下降。结论:硼替佐米可以抑制结肠癌SW480细胞增殖。其机制可能与抑制PTEN蛋白降解,抑制p-Akt途径有关。为结肠癌治疗药物的发展和更新提供了新的候选分子。
- 王鹤霏封斌孙艺唐光波闵捷王新
- 关键词：硼替佐米结肠癌PI3KAKT
