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排序方式：

视黄酸核受体α的siRNA重组腺病毒构建及干扰效果初步鉴定: 2012年; 目的：构建视黄酸核受体a（RARa）的siRNA重组腺病毒，为反向研究RARa受体在全反式视黄酸（ATRA）抗凋亡过程中的作用提供实用的技术手段。方法：设计3对大鼠RA风的siRNA序列，将其分别克隆到pSES-HUS穿梭质粒；进而将重组穿梭质粒pSES-HUS-siRARa与pAdEasml在BJ5183感受态大肠埃希菌内同源重组以得到pAd-siRARa，PacI酶切线性化后转染HEK293进行包装扩增以得到重组腺病毒Ad-siRAR^Ad-siRARa感染大鼠PCI2细胞48h，提取各组mRNA和总蛋白，Real-timePCR和免疫印迹检测Ad-siRAR^-I、一2、一3对RARQ的抑制效率。结果：PCR、酶切及测序均证实RARa的siRNA序列正确克隆至腺病毒质粒载体，经过包装扩增得到大量高滴度重组腺病毒Ad-siRARa，而且对RARa的表达抑制效率接近70％。结论：成功构建视黄酸核受体RARⅡ的siRNA重组腺病毒，并具有下调PCI2细胞RARa基因和蛋白表达的功能。; 龚敏毕杨张赟江伟陈洁李廷玉; 关键词：小干扰RNA 重组腺病毒 RNA干扰 PC12细胞

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重庆市自然科学基金(2010BB5097)