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arresten在CHO细胞的表达及其生物学效应被引量：2: 2007年; 目的初步探讨血管生成抑制因子arresten在中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中的表达及其生物学效应。方法用脂质体转染法将真核表达载体pSecTag-arresten导入CHO，抗生素Zeocin筛选获得阳性克隆。RT—PCR检测arresten在mRNA水平的表达，Western blot检测arresten在蛋白水平的表达。将人脐静脉内皮细胞（huvec）分为加DMEM培养组、加SFX无血清培养基培养组及加含arreten的上清培养液组，TransweH小室检测arresten对huvec细胞迁移的影响，Mamgel胶体外管腔生成试验检测arresten对huvec细胞血管形成能力的影响。结果 RT—PCR和Western blot检测显示，arresten在mRNA水平与蛋白水平均有表达。迁移抑制曲线显示，含arresten组的迁移抑制率明显高于对照组（P〈0．05）。加DMEM培养组、加SFX无血清培养基培养组和加含arresten的上清培养液组细胞形成的血管腔分别为16±2、13±1和7±2个，加含arresten的上清培养液组显著低于其他两组（P〈0．05）。提示arresten对huvec细胞的迁移和血管形成具有抑制作用。结论成功构建arresten的真核表达体系，并发现arresten因子可抑制huvec细胞迁移和管腔形成，这可能是其抑制血管生成的途径之一。; 龙淼云郑启昌宋自芳胡青钢张勇; 关键词：ARRESTEN 真核表达中国仓鼠卵巢细胞血管生成

Arresten对人脐静脉内皮细胞增殖的影响及其作用机制被引量：2: 2006年; 背景与目的:Arresten是近年发现的血管生成抑制因子,它能抑制裸鼠移植瘤的生长和转移。本文探讨arresten对人脐静脉内皮细胞huvec增殖的影响及其相关机制。方法:应用MTT法测试细胞的生长曲线,检测不同浓度的arresten对huvec细胞增殖的影响,流式细胞仪检测arresten对huvec细胞凋亡的影响,半定量RT-PCR及W estern-b lot分别检测人脐静脉内皮细胞的VEGF在mRNA水平及蛋白水平的表达。结果:MTT比色法显示,ar-resten对huvec细胞增殖具有抑制作用并呈浓度依赖性,但当其浓度增加到800ng/L后其增殖抑制率不再提高,而此浓度时huvec细胞的凋亡率达到峰值的59%;经过arresten处理,huvec细胞的VEGF在mRNA及蛋白水平的表达量均显著下降。结论:arresten通过降低huvec细胞的VEGF表达抑制huvec细胞增殖并促进huvec细胞凋亡。; 龙淼云郑启昌宋自芳胡青钢张勇; 关键词：ARRESTEN VEGF

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国家自然科学基金(3027124230371396)