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江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CX2211-0121)
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miR-126对内皮祖细胞增殖和迁移的影响以及靶基因的检测
2013年
目的研究miR-126(microRNA-126)对大鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)增殖和迁移能力的影响,并探讨miR-126新的靶基因。方法采用电转的方法,在EPCs中转染对照寡核苷酸和miR-126的模拟物或抑制物。噻唑蓝(MTr)法检测细胞增殖,划痕和transwell实验检测细胞迁移能力的改变。microRNA靶基因预测软件TargentScan在线分析miR-126的靶基因,并进一步用Western blot检测靶基因的表达变化。结果(1)miR-126模拟物在转染后24h对EPCs的增殖有促进作用(P〈0.01),转染后48和72h,miR-126对EPCs增殖没有影响。(2)划痕和transwell实验证实miR-126模拟物可以促进EPCs的迁移(P〈0.01),miR-126抑制物抑制EPCs的迁移(P〈0.01)。(3)TargetScan在线软件预测KANK2是miR-126的靶基因。(4)Western blot检测结果显示miR-126模拟物抑制KANK2的表达,miR-126抑制物促进KANK2的表达。结论miR-126对EPCs的增殖有一过性的促进作用,miR-126可以促进EPCs的迁移能力并靶向KANK2蛋白,抑制KANK2蛋白的表达。
孟庆友
王文斌
蔡志新
尚斌
李晓强
关键词:
微RNAS
干细胞
细胞增殖
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