国家重点基础研究发展计划(2010CB134401)
- 作品数：9 被引量：29H指数：3
- 相关作者：彭良才夏涛陈婷婷丰胜求徐雯更多>>
- 相关机构：华中农业大学中国科学院中国科学院植物研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划高等学校学科创新引智计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 植物细胞壁沟槽结构与生物质利用研究展望被引量：11
- 2014年
- 细胞壁是植物细胞的重要组成部分,是生物质的主要成分,不仅对植物形态学起中心调控作用,还对植物机械强度、纤维品质和生物质综合利用起决定性作用.本文将简要介绍植物细胞壁结构与功能研究进展,重点分析细胞壁关键结构因子,原创性提出植物细胞壁纳米级沟槽结构模型与生物质酶解分子机理,并探讨遗传改良植物细胞壁结构的新方法与新途径,旨在从本质上极大提高生物质综合利用效率,改良棉花纤维品质和增强作物抗逆能力.
- 王艳婷徐正丹彭良才
- 关键词：植物细胞壁生物质能能源作物棉花纤维品质
- 棉花纤维素合酶复合体蛋白的分离与鉴定被引量：1
- 2013年
- 选用开花后24 d的棉纤维提取原生质膜,用Triton X-100溶解后通过纤维素合酶1(Gossypium hirsutumcellulose synthase1,GhCESA1)抗体进行免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP),以聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离免疫共沉淀的产物,用液相色谱-质谱联用仪(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)进行鉴定。结果表明,棉纤维纤维素合酶复合体可能存在68种蛋白,其中包括8种纤维素合酶(Cellolose synthse,CESA),它们涵盖了棉纤维初生壁和次生壁2种类型纤维素合酶。这说明在次生壁形成的细胞中存在2种类型CESA。本研究也表明复合体中存在非CESA蛋白。
- 李先良李傲彭良才夏涛
- 关键词：棉纤维纤维素合酶复合体次生壁
- 水稻半纤维素支链合酶基因GT61家族的结构特征和组织表达分析被引量：1
- 2015年
- 从生物信息学和基因表达的角度,鉴定OsGT61家族成员的结构特征和组织表达特性。结果表明,OsGT61家族含有25个成员,分为3个亚类。A、B和C亚类分别含有19、3和3个成员,其基因的外显子数介于1~7个。其蛋白质大小为49.1~73.8ku,pI为5.4~10.4。该家族蛋白质的C端motif较为保守。而且,它们含有Ser/Thr激酶的磷酸化位点分别为9~29个和3~13个,Tyr激酶的磷酸化位点小于7个。但是,该家族成员的糖基化位点相对较少,16个成员存在1~4个O-糖基化位点,3个蛋白存在1~2个N-糖基化位点。基因表达芯片聚类分析和半定量RT-PCR检测表明,OsGT61基因家族主要成员在不同组织中表达水平存在明显差异。这些结果暗示OsGT61家族基因在水稻不同组织中细胞壁半纤维素生物合成中发挥不同作用。
- 易晓燕李丰成郭凯张冉李旭凯王友梅彭良才谢国生
- 关键词：水稻半纤维素
- 棉花纤维RNA提取方法的比较及酵母双杂交文库的构建被引量：2
- 2012年
- 为了从棉花纤维中提取高质量的RNA用于构建酵母双杂交文库,采用4种不同的方法提取9天和19天棉花纤维的RNA。琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测结果表明:热硼酸法适用于初生幼嫩纤维和次生加厚纤维的RNA提取,CTAB-PVP法仅适用于初生幼嫩纤维的RNA提取,异硫氰酸胍法和高盐高pH值法提取的RNA由于杂质含量较多而影响反转录效果。采用热硼酸法大量提取总RNA,纯化后的mRNA反转录为cDNA,通过重组将扩增的cDNA片段定向插入到pGADT7-RecAD克隆载体中,得到棉纤维9天和19天的酵母双杂交cDNA文库。2个文库的滴度分别是1.01×107cfu/mL和8×106cfu/mL,cDNA插入片段长度集中分布在250～2500bp之间。由此可以看出,构建的2个棉纤维文库质量较高,可用于棉花纤维素合成和调控途径的研究。
- 徐雯邓宗汉陈婷婷彭良才夏涛
- 关键词：棉花纤维
- 棉花GhPME1和GhPME2基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2012年
- 本研究旨在对棉花来源的果胶甲酯酶基因进行克隆和功能分析。通过RACE技术克隆了2个棉花果胶甲酯酶基因的cDNA,命名为GhPME1和GhPME2。序列分析发现:GhPME1和GhPME2的最大开放阅读框分别为1 704和1 752bp,分别编码含有567和582个氨基酸的蛋白质。蛋白质结构预测显示这2个蛋白结构相似,包含PMEI和Pectinesterase结构域。RT-PCR和实时荧光定量PCR结果显示在陆地棉的纤维发育过程中,GhPME1和GhPME2的表达峰值分别在9和4DPA(开花后天数),然后依次降低。而在海岛棉纤维中,这2个基因的表达均呈现逐渐上升的趋势,表达峰值分别出现在开花后24和29DPA。GhPME1和GhPME2在海岛棉和陆地棉棉纤维中的表达差异初步证明该基因家族的功能可能与棉纤维品质相关。
- 陈婷婷李旭凯王如意彭良才夏涛
- 关键词：棉纤维果胶甲酯酶基因表达
- 芒不同基因型愈伤组织诱导及分化的差异被引量：7
- 2013年
- 芒(Miscanthus sinensis)具较高的生物学产量,是一种极具发展前景的纤维素类能源植物。以芒的8种不同基因型幼穗为外植体,进行了组织培养研究。结果表明,不同基因型芒在愈伤组织诱导率、胚性愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织分化率等方面均存在显著差异。W89和W70均具较高的愈伤组织诱导率,分别为91.7%和89.1%;W69的外植体几乎全部褐化,且未能诱导出愈伤组织。W89、W70和W17的胚性愈伤组织分化率较高,达50%以上。另外,发现愈伤组织诱导率与细胞壁木质素含量间呈显著的负相关。该研究建立了稳定且有效的再生体系,并初步确定W89和W70可作为芒组织培养的理想材料,为芒的遗传转化、定向改良和良种快繁提供了技术支持。
- 刘琳俞斌黄鹏燕贾军赵华彭俊华陈鹏彭良才
- 关键词：基因型胚性愈伤组织木质素
- 拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测被引量：1
- 2012年
- 将拟南芥CesA家族基因的高变区克隆到融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-AtCe-sAs,在大肠杆菌JM109中经IPTG诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白(GST-AtCESAs)。采用GST亲和层析法纯化GST-AtCESAs并制备了多克隆抗体。Western-blotting检测表明,抗体Anti-CESA4和Anti-CE-SA7存在明显的交叉反应,Anti-CESA1、Anti-CESA3、Anti-CESA6、Anti-CESA2、Anti-CESA5、Anti-CESA8均能在拟南芥原生质膜上检测到特异免疫条带,这为进一步深入研究拟南芥纤维素合成机制提供了有利条件。
- 陶章生徐雯张苗苗彭良才丰胜求
- 关键词：纤维素合酶多克隆抗体拟南芥
- 棉花纤维素生物合成相关蛋白的抗体制备被引量：2
- 2012年
- 棉花纤维细胞生长过程中,有多种蛋白质参与纤维素的合成,为了深入研究这些蛋白质的功能,制备它们的抗体具有重要意义。本研究分别用化学合成多肽和原核表达蛋白制备的可溶性蛋白、可复性包涵体以及包涵体颗粒作为抗原,制备了棉花纤维素合酶CESA1、CESA2和SUSY1、β-1,4-glucanase、β-1,3-glucanase和Callose synthase的抗体。结果表明,化学合成多肽和原核表达蛋白均可用于抗体制备,制得的抗体可用于棉花纤维素合成相关蛋白的检测。
- 范建刘绪范春芬黄江锋罗兵彭良才夏涛
- 关键词：抗体
- 优质能源甜高粱突变体的筛选与鉴定被引量：3
- 2015年
- 以甜高粱品种能饲一号为野生型构建EMS化学诱变突变体库,通过分析突变体可溶性糖含量、生物质总量和生物质酶解产糖效率,观察农艺性状,并测定秸秆细胞壁结构组成,筛选得到3份特异突变体材料:SM83、SM197、SM305。3份突变体除生物量皆显著提高以外,SM197与SM305半纤维素含量显著升高,而木质素和纤维素含量明显降低,导致生物质酶解产糖效率大大提高。此外,SM83的产糖效率与常规品种(对照)无显著差异,但其可溶性糖含量比野生型增加14.99%。故筛选到的甜高粱突变体是理想的生物能源种质材料,可用于优质能源甜高粱品种的培育。
- 张会张会张友兵邹维华丰胜求张友兵张锐彭良才
- 关键词：甜高粱植物细胞壁能源作物
