农业部农业结构调整重大技术研究专项项目(06-05-04B)
- 作品数：10 被引量：104H指数：7
- 相关作者：王印庚荣小军李胜忠杨爱国燕敬平更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所新疆农业大学湖南省水产科学研究所更多>>
- 发文基金：农业部农业结构调整重大技术研究专项项目山东省科技发展计划项目山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 3个仿刺参地理种群遗传变异的微卫星DNA分析被引量：21
- 2007年
- 运用微卫星DNA技术对仿刺参烟台群体、威海群体、大连群体的3个野生群各20个个体进行了遗传分析。对9个基因位点进行了扩增，共获得了59个等位基因。评估了9对微卫星引物的多态信息含量（PIC），范围在0．5129～0．8794之间。结果表明：3个野生群体的平均杂合度观测值分别为0．6416、0．6595、0．5824，平均杂合度期望值分别为0．7641、0．7161、0．7364；在Hardy-Weinberg平衡条件下，进行了P检验，发现3个群体均有位点发生了显著偏离；对3个群体进行了配对Fst值计算，发现3个群体之间遗传分化较弱。从变异贡献率来看，95．68％的变异来自个体之间，4．32％的变异来自群体之间。经过聚类分析，发现威海群体和大连群体之间亲缘关系较近，烟台群体与前两群体亲缘关系较远。
- 谭杰孙慧玲刘萍杨爱国燕敬平刘志鸿周丽青
- 关键词：仿刺参地理群体微卫星DNA
- 应用PCR方法检测刺参腐皮综合征病原--灿烂弧菌被引量：20
- 2008年
- 腐皮综合征是近年来刺参养殖最主要的疾病,导致刺参大批死亡和惨重的经济损失。根据其主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)的16S^23S间隔区序列,设计特异性引物,利用PCR技术,从纯化的V.splendidus DNA中成功地扩增出产物大小为177bp的DNA片断,并对此方法的灵敏度和特异性进行了研究。结果表明,PCR技术对V.splendidus DNA的检测灵敏度为0.5pg,并且对灿烂弧菌的DNA呈现特异性,而与其他细菌V.fluvialis、V.anguillarum、V.alginolyticus、Aeromonas hydrophila、V.harveyi、V.parahaemolyticus、V.vulnificus的DNA均无交叉反应。应用PCR技术对人工感染的以及取自青岛、烟台和威海的腐皮综合征发病海参进行检测,其检出率均为100%。研究结果表明,PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可成功用于快速检测养殖刺参腐皮综合征原灿烂弧菌。在国内,该方法应用于刺参腐皮综合征的检测尚属首次,它将为刺参腐皮综合征的快速诊断及防治提供又一新的方法。
- 张凤萍王印庚李胜忠荣小军廖梅杰张正
- 关键词：刺参腐皮综合征灿烂弧菌PCR
- 低温期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子间的关系被引量：7
- 2011年
- 为研究低温期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子之间的关系,2006年1～5月在青岛周边地区3个养殖场刺参腐皮综合征发生的早期,采用异养菌总数TSB平板计数法、弧菌TCBS平板计数法对发病池塘的水质和池塘中异养菌总数和弧菌总数的数量与分布以及刺参肠道中的异养菌总数和弧菌总数进行了研究,同时比较研究了刺参病灶组织中优势菌与池塘环境及刺参肠道中优势菌的相关性。结果表明:发病池塘水体中细菌的数量较少,但底层水体中细菌总数普遍多于表层,水体中的优势菌与刺参病灶组织中的优势菌相关性不大;池塘表层底泥和刺参肠道中异养菌总数较多,弧菌总数较少,其优势菌与刺参病灶组织优势菌具有一致性。刺参腐皮综合征的发生与池塘水体分层引起的水质恶化和底泥中异养菌的数量密切相关。
- 黄华伟王印庚陈霞张凤萍
- 关键词：刺参腐皮综合征水质
- 老化参池刺参腐皮综合征致病原的分离与鉴定被引量：9
- 2010年
- 从患病刺参体表病灶组织分离出菌株060330B,其优势度高达90%,人工回接感染试验证实其具有较强的致病性,可导致健康刺参出现与自然患病刺参相同的症状。通过形态学观察、API半自动化鉴定和常规生理生化试验的结果表明,菌株060330B具有假单胞菌属的特征,其表型特征与恶臭假单胞菌相似。对该菌株进行16SrRNA基因序列分析和构建系统发育树,结果显示其与恶臭假单胞菌的亲缘关系最近,相似率达到99.5%。菌株060330B可鉴定为恶臭假单胞菌,并视为养殖刺参腐皮综合征的致病原之一。通过对多起不同来源患病刺参的研究表明,使用年限长、淤泥层厚呈黑色并伴有腥味的养殖池塘在该时期容易导致刺参腐皮综合征的发生。
- 黄华伟王印庚陈霞张凤萍
- 关键词：刺参腐皮综合征恶臭假单胞菌
- 刺参染色体制备的初步研究被引量：7
- 2011年
- 为探索取材容易、结果稳定可靠的刺参染色体制备方法,分别以刺参(Apostichopus japonicus)胚胎和成体为材料对刺参染色体制片方法进行了研究。结果表明,以原肠后期胚胎为材料采用常规的热滴片法,细胞有丝分裂指数最高,获得分裂相效果最好;以成体呼吸树、成体肠组织为材料时,也能获得中期分裂相染色体,但存在着细胞有丝分裂指数低、染色体易丢失等问题;向刺参体内注射植物血球凝集素(PHA),能有效促进刺参的有丝分裂;缩短低渗处理的时间,同时用甲醇进行第一次固定后再用卡诺氏固定液固定可有效避免刺参染色体的丢失;实验得出刺参的染色体数目为2n=46条。为刺参进一步的遗传学研究如基因定位、染色体原位杂交等提供了基础.
- 谭杰孙慧玲高菲杨爱国燕敬平于东祥刘志鸿周丽青
- 关键词：染色体制备
- 中草药对刺参腐皮综合征病原菌的体外抑菌试验被引量：24
- 2009年
- 用改良二倍稀释法和抑菌圈法测定了24种单方中草药和9种复方中草药对刺参腐皮综合征4种重要病原菌灿烂弧菌、假交替单胞菌、哈维氏弧菌和恶臭假单胞菌的体外抑菌活性。结果显示,不同中草药对特定病原菌抑菌效果差异较大,单方中草药最低抑菌浓度(MIC)为1.56mg/ml,中草药水煎剂H-5和H-9对假交替单胞菌的抑菌圈最大,达22mm。单方中草药中穿心莲、大青叶、金银花和川芎4种中草药对4株病原菌抑菌效果最好,其水煎剂对4株病原菌平均抑菌浓度分别为6.25、7.81、5.86和3.52mg/ml;平均抑菌圈直径分别是17.5、11.3、14.0和11.5mm。将筛选的4种单方中草药组成9种复方,复方MIC和抑菌圈均显著好于单方,最低MIC降低到0.20mg/ml。其中复方HC-G和HC-D抑菌浓度最低,效果最好,平均抑菌浓度分别降低为0.54和0.64mg/ml;平均抑菌圈直径分别为15.3mm和16.3mm。试验结果显示,复方最佳配比为穿心莲、大青叶、金银花和川芎=2∶1∶3∶2。该复方可为生产高效专用中草药,以替代抗生素,为刺参健康养殖提供技术保障。
- 王印庚冷敏陈霞荣小军廖梅杰
- 关键词：刺参海水养殖腐皮综合征中草药抑菌浓度
- 刺参育苗系统中的敌害生物--玻璃海鞘的药物杀除试验被引量：8
- 2009年
- 10种渔药对玻璃海鞘Ciona intestinalis的急性毒性试验结果表明,硫酸锌(≤3mg/L)、碳酸氢钠(≤2.5%)、茶皂素(≤6.7ml/L)、氯氰菊酯(≤0.2ml/L)、精制敌百虫粉(≤4mg/L)、敌百虫.辛硫磷粉(≤3mg/L)和高锰酸钾(≤5mg/L)对玻璃海鞘无致死作用。在24h内,硫酸铜浓度≥1mg/L、灭鞘灵(MQL)浓度≥5mg/L和自制大蒜素复方药物灭鞘散(MQS)≥15mg/L时,对玻璃海鞘有100%的致死作用,其24h的LC50值分别为0.58、3.33和10.80mg/L。硫酸铜浓度≥1mg/L时,稚参在3h内吐肠率达80%以上,对刺参能造成严重的生理伤害。因此,硫酸铜不适合在生产实践中使用。MQS浓度为20mg/L或MQL浓度为10mg/L对稚参的毒性实验表明,药物浸泡稚参96h仍活动正常,对生存没有任何影响。因此,MQS和MQL可视为刺参养殖系统中杀灭玻璃海鞘的有效药物,分别采用15mg/L和5mg/L的浓度,药浴24h后换水即可完成。
- 周书珩王印庚李胜忠荣小军李娟陈霞
- 关键词：刺参养殖玻璃海鞘敌害生物毒理半致死浓度
- 仿刺参遗传多样性的RAPD分析
- 2007年
- 采用RAPD技术对威海(WH)、烟台(YT)和大连(DL)沿海自然群体和蓬莱养殖群体(PL)仿刺参(Apostichopus japonicus)的遗传多样性进行了分析.实验使用了20条随机引物,对来自于4个群体的80个个体进行了遗传多样性分析.结果表明,YT、PL、DL、WH 4群体多态位点比例分别为65.71%、62.96%、65.51%、57.57%,遗传多态度分别为0.195 4、0.184 1、0.189 7、0.173 8.养殖群体与野生群体相比,遗传参数上都有不同程度的降低.4个群体之间的遗传分化指数Gst在0.0257～0.0554之间,其中蓬莱养殖群体与其他3个自然群体之间发生了中等程度或接近中等程度的分化,而3个自然群体之间遗传分化较低.经过UPGMA聚类分析,威海群体与大连群体之间亲缘关系最近,蓬莱养殖群体与3个自然群体之间亲缘关系均较远.
- 谭杰孙慧玲刘萍杨爱国燕敬平刘志鸿周丽青
- 关键词：仿刺参RAPD
- 刺参腐皮综合征病原灿烂弧菌检测探针的制备及应用被引量：17
- 2009年
- 腐皮综合征是近年来养殖刺参发生的严重疾病。发病时,刺参大批死亡,经济损失惨重。以其主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)DNA为模板,PCR扩增出16S-23S核糖体RNA基因间隔区序列,插入pMD19-T,转化大肠杆菌DH5α并测序。根据该间隔区序列,设计引物扩增177 bp的地高辛标记的探针。该探针对灿烂弧菌呈现特异性,而对其它细菌V.fluvialis,V.anguillarum,V.alginolyticus,Aeromonas hydrophila,V.harveyi,V.parahaemolyticus,V.vulnificus均呈阴性。探针对灿烂弧菌DNA的检出限为6.25 pg,具有较高敏感度。用该探针对人工感染以及从青岛、烟台、威海获取的腐皮综合征发病海参和养殖水体进行斑点杂交,灿烂弧菌检出率达100%。结果表明,该探针具有良好的特异性和敏感性,可用于快速检测养殖刺参腐皮综合征的病原灿烂弧菌。用该方法检测刺参腐皮综合征尚属首次,为刺参腐皮综合征的快速诊断和防治提供技术支撑。
- 王印庚张凤萍李胜忠陈霞崔玉龙
- 关键词：刺参腐皮综合征灿烂弧菌聚合酶链式反应斑点杂交
- 渡夏期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子间的关系
- 2006年7～10月,采用异养菌总数TSB平板计数法(Heterotrophic BacterialTSB Plate Count,HPC)、弧菌TCBS平板计数法(Vibrio TCBS Plate Count,VPC...
- 黄华伟王印庚陈霞张凤萍
- 关键词：渡夏刺参腐皮综合征水质
- 文献传递
