云南省自然科学基金(2000C0030Q)
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
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- 磷酰肌醇-3激酶途径在慢性髓细胞白血病细胞增殖和抗凋亡中的作用被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨磷酰肌醇 - 3激酶途径在K562和HL60细胞增殖中的作用。方法 用磷酰肌醇 - 3激酶(PI3K)特异抑制剂Wortmannin抑制PI3K活性 ,观察K562细胞和HL60细胞增殖能力的变化。结果 显示K562和HL60细胞在培养 2 4小时、 48小时、 72小时的增殖抑制率分别为 41 33 %、 57 46 %、 65 85 %和32 1 4 %、 1 7 1 4 %、 1 3 1 4 %。生长曲线显示Wortmannin可显著抑制K562细胞的增殖 ,而对HL60细胞增殖无明显影响。
- 李正发沈晓梅赵仁彬
- 关键词：慢性髓细胞白血病HL60细胞
- Wortmannin抑制PI3K途径对白血病细胞周期特异性及BCL-2蛋白表达影响的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨Wortmannin抑制PI3K途径对K5 62、NB4、HL60细胞周期特异性、BCL -2蛋白表达的影响。探明PI3K途径在K5 62、NB4、HL60细胞周期、细胞凋亡、BCL -2蛋白表达中的不同作用。方法 用PI3K特异抑制剂Wortmannin抑制PI3K途径 ,AraC诱导细胞凋亡 ,药物作用 2 4h后 ,细胞经DNA特异性荧光染色 ,用流式细胞仪 (FCM)检测细胞DNA含量、BCL -2蛋白表达 ,MulticycleVerson 4 0 0软件分析细胞DNA含量直方图及细胞周期、BCL -2蛋白表达。观察各细胞系增殖周期、细胞凋亡的变化。结果 K5 62、NB4、HL60细胞经Wortmannin、Ara -C、Wortmannin +Ara -C作用 2 4h后细胞出现DNA含量低于G1期的亚二倍体峰 (亚G1期细胞 )这一凋亡细胞的特征性改变 ,实验组细胞增殖指数 (PI)明显低于对照组 ,凋亡百分比显著增加。Wortmannin可以通过抑制PI3K通路使K5 62细胞阻滞于G1期。作用 2 4h后细胞实验组细胞BCL -2蛋白表达较对照组降低 ,说明Wortmannin可促进K5 62细胞的凋亡。结论 Wortmannin可以通过抑制PI3K通路抑制K5 62细胞的增殖。并可以通过抑制PI3K通路使K5 62细胞阻滞于G1期。Wortmannin可抑制K5 62细胞的BCL -2蛋白表达 ,促进K5 62细胞的凋亡。
- 李正发沈晓梅宋建新赵仁彬台虹欧阳红梅史克倩王云娟赖洵杨同华
- 关键词：WORTMANNIN白血病细胞周期特异性BCL-2蛋白表达血液肿瘤
- Wortmannin抑制PI3K途径对K562细胞增殖和Ara-C诱导的细胞凋亡的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨磷酰肌醇 - 3激酶 (PI3K)途径在K5 6 2、NB4和HL6 0细胞增殖和凋亡抗性中的不同作用 .方法 :用磷酰肌醇 - 3激酶 (PI3K)特异抑制剂Wortmannin抑制PI3K活性 ,经细胞生长曲线测定、半固体集落形成实验、流式细胞膜联蛋白V (Annexin -V -Flous)标记技术检测细胞凋亡百分比和凋亡指数 .观察K5 6 2、NB4和HL6 0细胞增殖能力及凋亡抗性的变化 .结果 :K5 6 2、NB4和HL6 0细胞在 2 4、 4 8、 72h的增殖抑制率分别为 4 1 33%、 5 7 4 6 %、 6 5 85 %和 2 6 2 9%、 5 5 1%、 2 10 %及 32 14 %、 17 14 %、13 14 % .生长曲线显示Wortmannin抑制PI3K途径可显著抑制K5 6 2细胞的增殖 (P <0 0 5 ) ,而对NB4和HL6 0细胞增殖无明显影响 (P >0 0 5 ) .K5 6 2、NB4和HL6 0细胞加和不加Wortmannin ,培养 14d后的集落形成率分别为 :16 15 %和 7 6 0 % ,5 90 %和 6 10 % ,6 6 0 %和 6 4 0 % .集落形成抑制率为 5 2 94 %、3 39%和 3 0 3% .Wortmannin抑制PI3K途径可显著抑制K5 6 2细胞的集落形成 (P <0 0 5 ) ,而对NB4和HL6 0细胞集落形成无明显影响 (P >0 0 5 ) .K5 6 2、NB4和HL6 0细胞加WT、AraC、WT +AraC作用 2 4h后的凋亡细胞百分比分别为 (17 2 7± 1 94 ) %、 (2 3 2 5± 14 12 ) %、 (17
- 李正发沈晓梅宋建新赵仁彬
- 关键词：NB4HL60细胞K562细胞集落形成增殖
- 磷酰肌醇-3激酶途径与bcr/abl基因介导的白血病细胞增殖和抗凋亡信号传导
- 2008年
- 目的探讨磷酰肌醇-3激酶途径在K562、NB4和HL60细胞增殖和凋亡抗性中的不同作用。方法短期培养法直接法G显带检测K562细胞和CML患者骨髓原代细胞的染色体核型,RQ-PCR检测K562细胞和CML患者骨髓原代细胞的bcr/abl基因;用磷酰肌醇-3激酶特异抑制剂渥曼青霉素(WT)抑制磷酰肌醇-3激酶活性,经细胞生长曲线测定、半固体集落形成实验、流式细胞膜联蛋白V标记技术检测细胞凋亡百分比和凋亡指数。观察K562、NB4和HL60细胞增殖能力及凋亡抗性的变化。统计学采用t检验。结果K562细胞G显带检出Ph染色体,RQ-PCR检测K562细胞存在bcr/abl基因;与标准Ph染色体表达的CML患者骨髓原代细胞的bcr/abl基因完全吻合;K562、NB4和HL60细胞在24h、48h、72h的增殖抑制率分别为41.33%、57.46%、65.85%和26.29%、5.51%、2.10%及32.14%、17.14%、13.14%。生长曲线显示WT抑制磷酰肌醇-3激酶途径可显著抑制K562细胞的增殖(P<0.05),而对NB4和HL60细胞增殖无明显影响(P>0.05)。K562、NB4和HL60细胞加和不加WT,培养14d后的集落形成率分别为:16.15%和7.60%,5.90%和6.10%,6.60%和6.40%。集落形成抑制率为52.94%、3.39%和3.03%。WT抑制磷酰肌醇-3激酶途径可显著抑制K562细胞的集落形成(P<0.05),而对NB4和HL60细胞集落形成无明显影响(P>0.05)。K562、NB4和HL60细胞加WT,AraC,WT+AraC作用24h后的凋亡细胞百分比分别为(17.27±1.94)%、(17.00±3.36)%、(27.60±4.36)%;(13.25±4.12)%、(20.55±8.57)%、(17.56±7.97)%;(11.60±1.27)%、(22.07±5.62)%、(20.50±7.97)%。凋亡指数分别为8.91±3.86、6.88±2.66、13.39±4.49;7.79±2.75、9.35±4.19、7.61±6.35;3.03±0.56、3.79±0.93、5.27±2.69。提示渥曼青霉素抑制磷酰肌醇-3激酶途径可促进由AraC诱导下的K562细胞的凋亡(P<0.05),而对NB4和HL60细胞凋亡无明显影响(P均>0.05),NB4和HL60细胞凋亡主要受药物的细胞毒作用。结论渥曼青霉素可以通过抑制磷酰肌醇-3激酶通路抑制K562
- 李正发沈晓梅赵仁彬宋建新章印红
- 关键词：渥曼青霉素
- Wortmannin抑制PI3-K途径对K562及NB4细胞增殖的影响
- 2003年
- 目的 :为探讨Wortmannin抑制磷酰肌醇 - 3激酶 (PI- 3K)途径对K5 62 ,NB4细胞增殖的影响 ,探寻慢性髓细胞性白血病 (CML)的治疗新途径 .方法 :用磷酰肌醇 - 3激酶 (PI - 3K)特异抑制剂Wort mannin抑制PI - 3K活性 ,观察慢性髓细胞性白血病细胞系K5 62细胞和急性早幼粒细胞性白血病细胞系NB4细胞在 2 4,48,72h增殖能力的变化 .t检验统计分析 .结果 :K5 62和NB4细胞在 2 4,48,72h的增殖抑制率分别为 3 4 67% ,5 7 46% ,65 85 %和 2 6 2 9% ,5 5 1% ,2 10 % .集落形成实验以GM -CSF为主要生长刺激物的培养体系在 3 7℃ ,5 %CO2 孵箱培养 14d后细胞系的集落数和集落形成率分别为K5 62 :80 75±10 2 4和 16 15 % ,K5 62 +WT :3 8 0 0± 12 75和 7 60 % ,NB4:2 9 5 0± 5 97和 5 90 % ,NB4+WT :3 0 5 0± 5 74和 6 10 % .集落形成抑制率为 :5 2 94%和 3 3 9% .结论 :Wortmannin可显著抑制K5 62细胞的增殖和集落形成 ,而对NB4细胞无明显影响 (P均 <0 0 5 ) .Wortmannin可以通过抑制PI - 3K通路抑制K5 62细胞的增殖 。
- 李正发赵仁彬沈晓梅
- 关键词：慢性髓细胞性白血病K562细胞NB4细胞
- Wortmannin抑制PI3K途径对bcr/abl基因介导的白血病细胞增殖和凋亡抗性影响的研究
- 2005年
- 目的探讨磷酰肌醇-3激酶(PI3K)途径在K562、NB4和HL60细胞增殖和凋亡抗性中的不同作用。方法用磷酰肌醇-3激酶(PI3K)特异抑制剂Wortmannin(WT)抑制PI3K活性,经细胞生长曲线测定、半固体集落形成实验、流式细胞膜联蛋白V(Annexin-V-Flous)标记技术检测细胞凋亡百分比和凋亡指数。观察K562、NB4和HL60细胞增殖能力及凋亡抗性的变化。结果K562、NB4和HL60细胞在24、48、72h的增殖抑制率分别为41.33%、57.46%、65.85%和26.29%、5.51%、2.10%及32.14%、17.14%、13.14%。生长曲线显示WT抑制PI3K途径可显著抑制K562细胞的增殖,对NB4和HL60细胞增殖无明显影响。K562、NB4和HL60细胞加和不加WT,培养14d后的集落形成率分别为16.15%和7.60%,5.90%和6.10%,6.60%和6.40%。集落形成抑制率为52.94%、3.39%和3.03%。K562、NB4和HL60细胞加WT、AraC、WT+AraC作用24h后的凋亡细胞百分比分别为(17.27±1.94)%、(23.25±14.12)%、(17.60±1.27)%;(17.00±3.36)%、(20.55±8.57)%、(22.07±5.62)%;(27.60±4.36)%、(17.56±9.28)%、(20.50±7.97)%。凋亡指数分别为(6.88±2.66)、(7.79±2.75)、(3.03±0.56);(8.91±3.86)、(9.35±4.19)、(3.79±0.93);(13.39±4.49)、(7.61±6.35)、(5.27±2.69)。结论WT可以通过抑制PI3K通?
- 李正发沈晓梅宋建新赵仁彬
- 关键词：基因介导BCR/ABLBCR/ABL细胞生长曲线NB4增殖抑制率PI-3K
