湖北省自然科学基金(2007ABA258)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 黏着斑激酶在肿瘤坏死因子α上调人角膜上皮细胞明胶酶活性中的作用
- 2011年
- 目的探讨黏着斑激酶（FAK）在肿瘤坏死因子α（TNF-α）上调体外培养人角膜上皮细胞明胶酶活性中的作用。方法实验研究。体外培养无眼部疾患人角膜上皮细胞，将传至3—4代的细胞暴露于含1μg/L TNF-α（B组）、10μg／LTNF—α（C组）、100μg/LTNF-α（D组）的培养基中，对照组（A组）用含等量磷酸盐缓冲液（PBS）的培养基处理，明胶酶谱分析各组条件培养基中基质金属蛋白酶2和9（MMP-2、MMP-9）的活性，免疫印迹法分析FAK总蛋白表达及磷酸化FAK的表达；运用RNA干扰技术特异性抑制人角膜上皮细胞FAK的表达并重复以上过程。统计学方法使用单因素方差分析，各组间比较采用TukeyHSD检验。结果明胶酶谱分析：与A相比，B、C、D组MMP-2、MMP-9活性均明显上调，差异有统计学意义（A、B、C、D组MMP-2活性表达分别为：124．06±4．06、146．72±5．51、241．18±5．65、389．95±4．44，F=2960．91，P=0．000；MMP-9活性表达分别为：122．78±5．86、165．70±7．90、479．49±6．22、495．88±5．03，F=4937．46，P=0．000），各组间比较差异均有统计学意义（MMP．2各组间比较均为P=0．000；MMP-9各组间比较P=0．000）；免疫印迹分析：C、D组中磷酸化FAK较A组增加，差异有统计学意义（C、D组磷酸化FAK分别为：0．52±0．03、0．61±0．06；F=431．03，P=0．000），100μg／L TNF-α组较10μg／LTNF-α组中磷酸化FAK表达增加（P=0．005）；运用RNA干扰技术特异性抑制人角膜上皮细胞FAK表达后，FAK总蛋白较特异性抑制之前明显下调，B、C、D组MMP-2的活性差异无统计学意义（转染后A、B、C、D组MMP-2分别为：55．13±0．66、55．67±0．43、55．49±0．20、55．91±0．37；F=2．73，P=0．079）。10、100汕g／LTNF-α干预组中MMP-9少量增加（转染后A、B、C、D组MMP-9分别为：80．48±0．39，81．26±0．62，84．43±0．47，85．56±0．61；F=105．80�
- 王芳杨燕宁邢怡桥袁静肖璇吴若曦杨万举
- 关键词：肿瘤坏死因子Α明胶酶类
- 肿瘤坏死因子-α对体外培养的兔角膜上皮细胞基质金属蛋白酶表达活性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外培养的兔角膜上皮细胞基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)表达活性的影响,探讨MMP-2、MMP-9的调节机制及TNF-α和MMP-2、MMP-9在角膜炎症性病变中的作用。方法:组织块法培养兔角膜上皮细胞,经不同浓度(1,10,100μg/L)TNF-α诱导24 h后,收集条件培养基应用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性,利用计算机图像分析系统进行统计分析。结果:在体外培养的角膜上皮细胞中,TNF-α能增强MMP-2、MMP-9的活性,并具有一定的浓度依赖性,TNF-α可激活MMP-2酶原,使其表现出活化形式。结论:炎性因子TNF-α可以上调角膜上皮细胞分泌的MMP-2、MMP-9的活性,针对这一过程进行干预对防治角膜炎性疾病具有重要意义。
- 伍志琴杨燕宁邢怡桥袁静胡杨曹婷王芳余桂香
- 关键词：角膜上皮细胞基质金属蛋白酶-2明胶酶谱肿瘤坏死因子-Α
