湖北省自然科学基金(2007ABA227)
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
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- 脂质体转染NF-κB诱捕物寡核苷酸抑制大鼠静脉桥血管内膜增生被引量：1
- 2010年
- 目的探讨转染NF-κB诱捕物寡核苷酸(decoyODN)对自体移植静脉内膜增生的影响。方法制作20只自体颈部动脉上静脉移植SD大鼠模型,无序ODN对照组、decoyODN实验组各10只。移植前,实验组移植静脉行脂质体包裹的NF-κBdecoyODN溶液浸泡转染,对照组行脂质体包裹的无序ODN溶液浸泡。移植术后4周取出移植血管,利用病理学、凝胶电泳迁移率迟滞分析(EMSA)和RT-PCR分别检测移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、血管组织NF-κB转录活性和TNF-αmRNA表达情况。结果实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、NF-κB转录活性、TNF-αmRNA表达较对照组明显减小或减少(均P<0.01)。结论 NF-κBdecoyODN可有效抑制静脉桥血管NF-κB的激活从而抑制移植静脉内膜的增生。
- 朱学海魏翔吴黎李军徐利军胡敏张毅周雁荣陈涛潘铁成
- 关键词：再狭窄基因治疗
- 脂质体转染NF-κB诱捕物寡核苷酸抑制大鼠肝脏缺血再灌注损伤被引量：1
- 2010年
- 目的探讨转染NF-κB诱捕物寡核苷酸(decoy ODN)对肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法制作20只肝脏缺血再灌注SD大鼠模型,无序ODN对照组、decoy ODN实验组各10只。阻断肝脏血流后,实验组行脂质体包裹的NF-κBdecoy ODN溶液门静脉注射转染,对照组行脂质体包裹的无序ODN门静脉注射。开放肝脏血流后3h取出肝脏,应用病理学、EMSA和RT-PCR分别检测移植肝脏病理改变、肝脏组织NF-κB转录活性和TNF-αmRNA表达情况。结果实验组肝脏损伤减轻,肝细胞NF-κB转录活性、TNF-α mRNA表达较对照组明显减小或减少(均P<0.01)。结论 NF-κBdecoy ODN可有效抑制肝脏细胞NF-κB的激活从而抑制肝脏缺血再灌注损伤。
- 李峥吴黎周雁荣魏翔
- 关键词：DECOYODN缺血再灌注肝脏
- 小鼠异位气管移植模型中核转录因子NF—κB激活MCP-1诱导闭塞性细支气管炎的研究被引量：1
- 2010年
- 目的利用同种异体小鼠异位气管移植模型，研究NF—κB是否激活MCP-1基因参与闭塞性细支气管炎（OB），探讨OB的发病机制。方法将小鼠异位气管移植模型分成同基因组（BALB／C→BALB／C）和异基因组（BALB／C→C57BL／6），在术后7、14、21d观察气管移植物是否发生OB；免疫组化染色检测气管移植物MCP-1蛋白表达；EMSA测定各组气管移植物NF—κB的转录活性改变；RT—PCR检测MCP-1的mRNA水平；ELASA检测外周血MCP-1蛋白水平。结果异基因移植实验组气管移植物管腔闭塞率在术后7d仅（6±3）％，14d为（28±）8％，21d达到（74±12）％，而同基因移植对照组管腔闭塞率在术后7～21d均小于3％；与对照组比较，实验组气管移植物NF—κB的转录活性在术后7、14、21d均明显升高；气管移植物MCP-1mRNA及血清中MCP-1蛋白水平术后7、14d升高，术后21d与对照组比较无显著差异。结论同种异体小鼠异位气管移植中，NF—κB转录活性增强，在移植后早期激活其下游靶基因MCP-1募集单核细胞和淋巴细胞攻击移植物，促进闭塞性细支气管炎的发生发展。
- 朱学海魏翔吴黎周雁荣胡敏刘立刚徐利军程才潘铁成
- 关键词：闭塞性细支气管炎MCP-1
- 并发闭塞性细支气管炎的移植气管组织中核因子kB和肿瘤坏死因子的表达及意义
- 2009年
- 目的探讨小鼠移植气管组织中核因子κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达及其在闭塞性细支气管炎（OB）中的作用。方法实验分为实验组和同系移植对照组，实验组受者为C57BL／6小鼠，同系移植对照组受者为Balb／c小鼠，供者均为Balb／c小鼠。将2支供者气管分别移植于受者两侧背部，术后7、14、21d2组分别处死受者7只，取移植气管，于光学显微镜下观察并计算移植气管截面的管腔闭塞率。用免疫组织化学法和Western印迹法检测移植气管组织中NF-κB和TNF-α的表达；用凝胶电泳迁移率改变法检测NF-κB的转录活性；用逆转录聚合酶链反应法检测TNF-αmRNA的表达。结果实验组移植后14d和21d时的管腔闭塞率分别为（31±7）％和（80±17）％，并可见移植气管发生OB病理改变，而同系移植对照组未见此改变。免疫组织化学法和Western印迹法结果均显示，实验组各个时点移植气管组织中NF-κB和TNF-α的表达均高于同系移植对照组。实验组移植后7、14和21d时，NF-κB基因的转录活性分别为1．35±0．52、1．72±0．43和2．43±0．33，均高于同时点同系移植对照组的转录活性（P〈0．01，P〈0．05，P〈0．05）；实验组各时点TNF-αmRNA的表达均高于同系移植对照组（P〈0．05，P〈0．05，P〈0．05）。结论发生OB的小鼠移植气管组织中NF-κB及其下游靶基因TNF-α的表达升高。
- 朱学海魏翔吴黎徐利军胡敏刘立刚周雁荣潘铁成陈实
- 关键词：NF-KB
- α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子-β1基因在小鼠异位移植气管中的表达
- 2010年
- 目的 探讨α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及转化生长因子-β1（TGF-β1）在小鼠异位移植气管中的表达与意义.方法 雄性BALB/C小鼠及C57BL/6小鼠各30只,建立气管异位移植模型,分别于术后4、7、10 d、2、3、4周收获移植气管.组织形态学观察移植气管发生纤维化过程,应用免疫组织化学方法检测α-SMA和TGF-β1的表达.结果 术后3周以后移植气管管腔和黏膜下层出现大量纤维增生组织,造成管腔完全闭塞.α-SMA表达于术后第7天明显增加,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,1周以后阳性表达继续增多,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.TGF-β1的表达于术后第10天明显增多,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,到术后2周表达水平进一步增高,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,两者表达的趋势相似.结论 小鼠气管异位移植后气道上皮细胞有部分向表达α-SMA的肌纤维母细胞转化,进而参与了闭塞性细支气管炎（OB）的气道重塑和气道高反应性的发生发展.
- 游永浩魏翔潘铁成朱学海
- 关键词：气管异位移植Α-平滑肌肌动蛋白转化生长因子-Β1闭塞性细支气管炎
- 转化生长因子-β1诱导小鼠同种异体气管移植物纤维增生的研究被引量：2
- 2009年
- 目的用小鼠异位气管移植观察核因子（NF）-κB是否激活转化生长因子（TGF）-β1基因参与诱导气管移植物纤维增生，探讨闭塞性细支气管炎（OB）的发病机制。方法将小鼠气管移植分成同基因组和异基因组，在术后7、14、21d取材算管腔闭塞率；对移植物行TGF—β1免疫组织化学染色；凝胶电泳迁移率改变法（EMSA）测定NF—κB活性；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测TGF-β1的mRNA水平；Western blot检测TGF-β1蛋白表达。结果和同基因组比较，异基因组气管移植物在术后14d开始纤维增生，术后21d管腔闭塞率达（78±9）％，呈典型OB改变；NF—κB的转录活性在术后7d明显升高，术后14、21d维持较高水平；OB的气管移植物TGF-B1染色阳性；TGF—β1 mRNA及蛋白表达在移植术后14、21d明显升高，在术后7d差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NF．κB转录活性增强，激活TGF-β1促进纤维增生，是造成OB的重要原因。
- 朱学海魏翔吴黎徐利军李双胡敏刘立刚周雁荣潘铁成
- 关键词：闭塞性细支气管炎核因子-ΚB气管移植
- 小鼠同种气管异位移植建立闭塞性细支气管炎动物模型被引量：2
- 2009年
- 目的闭塞性细支气管炎(OB)是临床肺移植后主要致死因素且发病机制不清,拟用小鼠气管异位移植模拟OB的病变过程,为研究OB提供动物模型。方法将小鼠分成同基因移植对照组(BALB/C→BALB/C)与异基因移植实验组(BALB/C→C57BL/6)两大组,供体小鼠气管移植到受体小鼠背部两侧皮下,术后3、7、14、21、28 d取出气管移植物,苏木精-伊红染色观察比较组织形态改变,统计分析其上皮覆盖率和管腔闭塞率。结果共完成70例小鼠气管同种异位移植手术,手术成功率94.3%。不同取材时间,同基因对照组和异基因实验组气管移植物苏木精-伊红染色有不同改变,其中以术后21 d实验组气管移植物OB改变最为典型,而对照组气管移植物组织结构基本正常,此时上皮覆盖率两组分别为:0%和(92±6)%,管腔闭塞率两组分别为:(73±12)%和<3%,差异均有显著性意义。结论小鼠气管异位移植成功模拟肺移植后OB的病变过程,术后21 d可作为研究OB的重要时间点。手术操作简便,成功率高,技术稳定。适用于临床肺移植术后OB的发病机制和治疗学的研究。
- 朱学海魏翔吴黎李双徐利军胡敏张毅周雁荣陈涛潘铁成
- 关键词：闭塞性细支气管炎肺移植动物小鼠
