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甘肃省科技支撑计划(1204FKCAl78)
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柴丹丹
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2014
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人胱蛋白酶抑制剂C的原核表达及其免疫反应性研究
2014年
目的获得具有免疫反应性的人胱蛋白酶抑制剂C(Cysc)重组蛋白。方法从Hela细胞提取总RNA,采用RTPCR扩增获得人CysC基因片段,与质粒pET30a连接构建重组表达载体,转化大肠埃希菌E.coliBL21(DE3)并加入IPTG诱导表达,表达产物经凝胶层析复性和亲和层析纯化后,用间接ELISA检测纯化后的CysC重组蛋白对重组CysC免疫小鼠血清的免疫反应性。结果成功构建了重组表达载体pET30a—CysC,诱导表达出约19ku的重组蛋白,经复性纯化后获得纯度达90%以上的目的蛋白,与重组CysC免疫小鼠血清具有良好的免疫反应性。结论在原核系统成功表达了人CysC重组蛋白,而且具有良好的免疫反应性。
杜惠芬
付宝权
李克生
连晓雯
王春芽
徐杨
柴丹丹
关键词:
原核表达
复性
免疫反应性
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