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北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目(2009-3-23)

作品数:1 被引量:0H指数:0
相关作者:师忠芳张伟袁芳董丽萍杨少华更多>>
相关机构:北德克萨斯大学首都医科大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇定量聚合酶链...
  • 1篇星形
  • 1篇星形胶质
  • 1篇星形胶质细胞
  • 1篇实时定量聚合...
  • 1篇水通道
  • 1篇水通道蛋白
  • 1篇水通道蛋白4
  • 1篇通道蛋白
  • 1篇转染
  • 1篇细胞
  • 1篇酶链反应
  • 1篇聚合酶
  • 1篇聚合酶链反应
  • 1篇基因
  • 1篇基因沉默
  • 1篇胶质
  • 1篇胶质细胞
  • 1篇合酶

机构

  • 1篇首都医科大学
  • 1篇北德克萨斯大...

作者

  • 1篇徐立新
  • 1篇杨少华
  • 1篇董丽萍
  • 1篇袁芳
  • 1篇张伟
  • 1篇师忠芳

传媒

  • 1篇解剖学报

年份

  • 1篇2014
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
脂质体RNAiMAX介导siRNA转染沉默星形胶质细胞AQP4基因
2014年
目的明确脂质体RNAiMAX(lipofectamine RNAiMAX)是否可以介导小干扰RNA(siRNA)转染入原代培养星形胶质细胞并实现水通道蛋白4(AQP4)基因沉默。方法利用原代培养的Wistar大鼠大脑皮层星形胶质细胞,通过倒置荧光显微镜和Tecan酶标仪,观察lipofectamine RNAiMAX是否能介导Cy3标记的siRNA转染入细胞内,以及RNAiMAX浓度和siRNA浓度对转染效率的影响;利用Real-time PCR方法检测AQP4 siRNA转染的基因沉默效果。结果倒置荧光显微镜和Tecan酶标仪检测发现,随着siRNA和RNAiMAX浓度的增加,转染细胞荧光强度随之增加(n=6);Real-time PCR检测结果显示,3ml/L RNAiMAX和30nmol/L AQP4 siRNA以及6ml/L RNAiMAX和60nmol/L AQP4 siRNA转染星形胶质细胞24h、48h、72h时,AQP4 mRNA水平均降低80%以上(n=6)。结论 Lipofectamine RNAiMAX可以介导siRNA转染入原代培养星形胶质细胞中并实现AQP4基因的沉默,3ml/L RNAiMAX和30nmol/L AQP4 siRNA即可达到理想的沉默效果。
张伟徐立新杨少华师忠芳董丽萍袁芳
关键词:星形胶质细胞水通道蛋白4SIRNA转染基因沉默实时定量聚合酶链反应
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