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广西青年科学基金(0542022)

作品数：14 被引量：52H指数：4
相关作者：石德顺杨素芳陈玉邹知明卞桂华更多>>
相关机构：广西大学广西壮族自治区妇幼保健院广西柳州畜牧兽医学校更多>>
发文基金：广西青年科学基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 14篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 8篇水牛
  • 7篇卵母细胞
  • 7篇冷冻保存
  • 5篇细胞
  • 5篇精液
  • 5篇玻璃化冷冻
  • 4篇母细胞
  • 4篇玻璃化
  • 3篇水牛卵母细胞
  • 3篇牛卵母细胞
  • 3篇GMP
  • 3篇M
  • 2篇山羊
  • 2篇体外
  • 2篇体外发育
  • 2篇稀释液
  • 2篇精液冷冻
  • 2篇精液冷冻保存
  • 2篇抗冻剂
  • 2篇甘油

机构

  • 14篇广西大学
  • 4篇广西壮族自治...
  • 1篇河北医科大学
  • 1篇广西壮族自治...
  • 1篇广西柳州畜牧...
  • 1篇广西壮族自治...

作者

  • 13篇杨素芳
  • 13篇石德顺
  • 7篇陈玉
  • 4篇王晓丽
  • 4篇冯贵雪
  • 4篇邹知明
  • 4篇卞桂华
  • 3篇陈自洪
  • 3篇潘红平
  • 2篇崔奎青
  • 2篇陆凤花
  • 2篇韦精卫
  • 2篇陈华海
  • 1篇张莹
  • 1篇成俊萍
  • 1篇谢英
  • 1篇黎江
  • 1篇许桂华
  • 1篇杨娟
  • 1篇蒋建荣

传媒

  • 3篇中国兽医学报
  • 2篇黑龙江畜牧兽...
  • 2篇安徽农业科学
  • 2篇广西农业生物...
  • 1篇黑龙江动物繁...
  • 1篇河南农业科学
  • 1篇湖北农业科学
  • 1篇西南大学学报...
  • 1篇基因组学与应...

年份

  • 1篇2011
  • 5篇2009
  • 5篇2008
  • 2篇2007
  • 1篇2006
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
细胞松弛素B(CB)对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的影响被引量：7
2008年
研究主要探讨冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理水牛MⅡ期卵母细胞对其冷冻效果的影响。以水牛MⅡ期的卵母细胞为材料,通过玻璃毛细管(GMP)和玻璃化冷冻液EDS33(16.5%EG+16.5%DMSO+Sucrose)对水牛MⅡ期的卵母细胞进行两步法玻璃化冷冻保存,即卵母细胞首先放入预平衡液(7.5%EG+7.5%DMSO+Sucrose)中平衡3 min,然后再移入玻璃化冷冻液中30 s后装管直接投入液氮。冷冻前卵母细胞随机分为2组,一组用7.5μg/mL CB预处理30 min,另一组未用CB预处理作对照组,然后都冷冻保存。解冻是在蔗糖浓度逐渐降低的解冻液中进行的。解冻后存活的卵母细胞进行孤雌激活,以分裂率和囊胚发育率作为评定卵母细胞冷冻效果的指标。结果发现,GMP组和GMP+CB组卵母细胞解冻后的存活率(88.89%、94.20%)和培养后发育到囊胚的比率(8.82%、14.55%)差异均不显著(P>0.05),但GMP组和GMP+CB组存活卵母细胞激活后的分裂率差异显著(32.69%、55.56%,P<0.05),所以细胞松弛素B预处理可以提高GMP冷冻卵母细胞的发育能力。
卞桂华陈自洪杨娟陆凤花石德顺
关键词：卵母细胞囊胚玻璃化冷冻
海藻糖和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响被引量：4
2009年
试验比较了在冷冻稀释液中添加不同浓度海藻糖（0．025，0．05，0．1mol／L）以及添加10mg／L维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响。结果：（1）添加0．025mol／L海藻糖组的精子冻后活率与复苏率分别跟对照组相比无显著差异（P〉0．05），但添加浓度为0．05，0．1mol／L的海藻糖组的精子活率和复苏率显著低于对照组（P〈0．05）。（2）在猪精液冷冻保存稀释液中，添加维生素C组的精子冻后活率和复苏率极显著高于对照组（P〈0．01）。表明在猪精液冷冻液中，添加0．025，0．05，0．1mol／L3种不同浓度的海藻糖对猪精液没有起到保护作用，其中后两者对之有降低的作用；而添加10mg／L维生素c可取得较好的冷冻保存效果。
廖清华杨素芳邓继贤
关键词：猪精液海藻糖维生素C精子活率复苏率
水牛卵母细胞玻璃化冷冻保存被引量：3
2009年
以水牛MII期的卵母细胞为材料,利用玻璃化冷冻液EDS33(16.5%EG+16.5%DMSO+sucrose)对水牛MII期的卵母细胞进行两步法(玻璃毛细管(GMP)和拉细的开口塑料细管(OPS))玻璃化冷冻保存,即卵母细胞首先放入预平衡液(7.5%EG+7.5%DMSO+sucrose)中平衡3 min,再移入玻璃化冷冻液中30 s后装管直接投入液氮。解冻是在蔗糖浓度逐渐降低的解冻液中进行的。解冻后存活的卵母细胞孤雌激活,通过囊胚发育率作为评定卵母细胞冷冻效果的指标。结果发现,GMP和OPS法冷冻保存的水牛卵母细胞解冻后的存活率(分别为96.80%和97.41%)与对照组卵母细胞的存活率(100%)3者之间差异均不显著(P>0.05)。GMP法和OPS法冷冻的水牛卵母细胞激活后的胚胎分裂率和囊胚发育率2者均明显低于对照组(分别为30.58%和28.32%vs50.94%,10.81%和9.38%vs 29.63%,P<0.05),而这2种方法冷冻的水牛卵母细胞激活后的分裂率和囊胚发育率差异均不显著(P>0.05)。这表明GMP和OPS玻璃化冷冻方法可以用于水牛卵母细胞的冷冻,并且玻璃化冷冻的卵母细胞能继续分裂并发育到囊胚。
卞桂华冯贵雪陈玉杨素芳王晓丽石德顺
关键词：GMPOPS冷冻保存卵母细胞水牛
甘油对山羊冻精效果的研究被引量：2
2007年
采用细管法冷冻保存山羊精液,以甘油作为冷冻保护剂,探讨了加入不同浓度的甘油以及在不同时间加入甘油对精液冷冻效果的影响。结果表明:(1)在稀释液中加入甘油6%和7%,精液的冻后活率与复苏率均显著高于加入3%和5%组(冻后活率:0.49±0.75,0.46±0.80 vs 0.20±0.56,0.31±0.86,P<0.05;复苏率:0.65±0.80,0.61±0.56 vs 0.27±0.65,0.41±0.42,P<0.05),以添加6%的甘油的精液冷冻效果较好。(2)在配液时加6%甘油的处理组在冻后活率与复苏率都显著低于在4°C平衡后加甘油处理组(0.28±0.82 vs 0.34±0.67;0.37±1.0 vs 0.45±0.95,P<0.05)。说明在山羊精液冷冻保存中,加入甘油的时间为4°C平衡后冻结前为较好。
杨素芳邹知明文培忠许桂华石德顺
关键词：山羊精液冷冻保存甘油
兔皮肤成纤维细胞的体外培养和NESTED-PCR支原体污染检测被引量：2
2008年
[目的]为动物细胞核移植、转基因操作等提供充足的供体材料。[方法]通过对兔皮肤成纤维细胞的体外原代、传代培养和冷冻复苏,检测支原体污染状况。[结果]结果表明:在含有15%FCS(Fetal Calf Serum)的DMEM中培养的细胞初期生长状态较10%FCS中的细胞长势好,后期则相反。用PCR法对培养至25代的兔皮肤成纤维细胞进行支原体检测,均没有发现支原体污染现象。[结论]PCR法检测细胞培养支原体污染具有灵敏、准确、简便、快速、特异性好的优点。
杨素芳崔奎青陈华海韦精卫韦兰锋石德顺
关键词：支原体
抗冻剂对水牛卵母细胞冷冻后孤雌发育的影响被引量：1
2009年
试验主要探索了不同抗冻剂组合对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻-解冻后孤雌发育潜力的影响.通过对3种抗冻剂组合(Ⅰ:20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO);Ⅱ:20%EG+20%1,2-丙二醇(PROH);Ⅲ:20%EG+20%PROH+10%DMSO)的毒性试验,发现试验组的形态正常率均低于对照组(p<0.05),但Ⅰ组的分裂率、8-细胞率和囊胚率与对照组无显著差异(p>0.05).并以抗冻剂Ⅰ组做冷冻液,探讨了解冻液中蔗糖梯度浓度(A:0.5,0.25,0.10mol/L与B:0.62,0.42,0.31mol/L)对卵母细胞冷冻-解冻效果的影响.B组的形态正常率显著高于A组(p<0.05),且B组的分裂率和囊胚率与对照组无显著差异(p>0.05).最后比较了3种抗冻剂组合对卵母细胞冷冻-解冻后的孤雌激活发育效果.3组的形态正常率、分裂率和8-细胞率之间无显著差异(p>0.05),但均显著低于对照组(p<0.05),其中Ⅰ组的囊胚率与Ⅱ、Ⅲ组及对照组差异均不显著(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的囊胚率显著低于对照组(p<0.05).结果表明:采用抗冻剂组合Ⅰ冷冻水牛MⅡ期卵母细胞,解冻时采用B组解冻液去除抗冻剂,可以取得较好的冷冻保存效果.
杨素芳陈玉冯贵雪王晓丽陈自洪石德顺
关键词：水牛卵母细胞玻璃化冷冻抗冻剂孤雌激活
3种玻璃化冷冻液对水牛MII期卵母细胞冷冻-解冻后体外发育的影响被引量：3
2009年
本试验主要探索了3种玻璃化冷冻液对水牛MII期卵母细胞冷冻-解冻后体外发育的影响。水牛MII期卵母细胞经3组玻璃化冷冻液(Ⅰ:20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO);Ⅱ:20%EG+20%丙二醇(PROH);Ⅲ:20%EG+20%PROH+10%DMSO)毒性试验后,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组体外受精的分裂率、8-细胞率和囊胚率之间差异不显著(P>0.05),分裂率均显著低于对照组(P<0.05),但Ⅱ组8-细胞以后的发育潜力跟对照组无显著差异(P>0.05)。进一步比较了3组玻璃化冷冻液对卵母细胞的玻璃化冷冻效果。卵子解冻后进行体外受精后,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的发育潜力均显著低于对照组(P<0.05),各组的8-细胞率和囊胚率之间无显著差异(P>0.05),但Ⅱ组卵裂率明显高于Ⅰ组(24.8±4.6%vs12.7±1.5%,P<0.05)。结果表明,3种冷冻玻璃化保护液均可用于冷冻水牛MII期卵母细胞,其中Ⅱ组处理的卵母细胞体外受精效果相对较好。
杨素芳陈玉冯贵雪王晓丽吴正三石德顺
关键词：水牛卵母细胞体外受精
兔精液冷冻保存的研究被引量：4
2007年
本试验采用不同的稀释液对兔精液进行冷冻保存,并比较了在稀释液中添加不同防冻剂以及平衡时间对兔精液冷冻保存效果的影响。结果表明:稀释液II稀释的精液,解冻后,精子活率明显高于稀释液I稀释的(P<0.01),其复苏率显著高于后者(P<0.05)。以稀释液II为基础液,添加不同浓度(27.3%,15%,12%,9%)的DMSO对兔精液冷冻保存,结果解冻后精子活率以15%及12%两组较好,其中添加15%的优于12%的,但差异不显著(P>0.05)。选择不同种类的防冻(剂7%甘油与15%DMSO)比较时,发现7%甘油组解冻后精子活率明显低于15%DMSO组,二者差异极显著(P<0.01),其复苏率显著低于后者(P<0.05)。以15%DMSO作为防冻剂,采用不同的平衡时间在5℃平衡,结果发现平衡30 min和60 min的解冻后精子活率较好,但差异不显(著P>0.05),而90 min和120 min的冷冻效果较差。
陈玉石德顺崔奎青邹知明潘红平杨素芳
关键词：精液冷冻稀释液抗冻剂
GMP玻璃化冷冻对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻损伤和体外发育能力的影响被引量：4
2009年
将体外成熟(IVM)24h的水牛卵母细胞随机分成对照组、冷冻剂毒性试验组、GMP玻璃化冷冻组,研究玻璃微细管法(GMP)冷冻对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻损伤和体外受精后发育能力的影响。结果表明:冷冻剂毒性试验组的存活率显著高于GMP玻璃化冷冻组;在透明带消化时间上,冷冻剂毒性试验组和GMP玻璃化冷冻组显著高于对照组。在单精入卵率上,冷冻剂毒性试验组和GMP玻璃化冷冻组显著低于对照组;在无精子入卵率上,冷冻剂毒性试验组和GMP玻璃化冷冻组与对照组差异显著;而多精入卵率3组间差异不显著。卵母细胞冷冻后进行体外受精,3组之间的2-细胞率,8-细胞率和桑椹胚率差异均极显著。表明冷冻剂和GMP玻璃化冷冻均会引起水牛MⅡ期卵母细胞透明带硬化,降低精子穿透率和其体外受精的发育能力。
杨素芳陈华海蒋建荣冯贵学陈焕华陈玉卞桂华石德顺
关键词：水牛GMP
玻璃化冷冻水牛MII期卵母细胞的初步研究被引量：6
2008年
为建立玻璃化冷冻保存水牛MⅡ期卵母细胞的有效程序,试验比较了3种冷冻保护剂组合(Ⅰ:20%乙二醇+20%二甲基亚砜;Ⅱ:25%乙二醇+25%二甲基亚砜;III:25%乙二醇+25%甘油)和3种玻璃化冷冻方法(毛细玻璃管法、铜环法及半麦管法)对水牛MⅡ期卵母细胞的毒性和冷冻效果的影响。结果表明,Ⅲ组的卵母细胞形态正常率显著低于Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05),且III组的存活率也显著低于Ⅰ组(P<0.05),而Ⅰ和Ⅱ组的卵母细胞形态正常率和存活率没有显著差异(P>0.05)。进一步孤雌激活发现,Ⅰ组的卵裂率显著高于Ⅲ组(29.17±4.81%,5.56±11.11%,P<0.05),Ⅰ组的囊胚发育率显著高于Ⅱ和Ⅲ组(8.33±2.23%,2.43±2.87%,1.86±3.71%,P<0.05),然而Ⅱ和Ⅲ组间的卵裂率和囊胚发育率没有差别(P>0.05)。采用铜环法的回收率显著高于半麦管法(P<0.05),但和毛细玻璃管法之间差异不显著(P>0.05),冻后卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率差异不显著(P>0.05)。3种冷冻保护剂中Ⅰ组的细胞毒性作用最小,Ⅲ组的细胞毒性作用最大;铜环法和毛细玻璃管法能有效冷冻保存水牛的MⅡ期卵母细胞。
杨素芳陈玉胡晓静冯贵雪潘红平石德顺
关键词：水牛冷冻保护剂玻璃化冷冻
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