中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(IMBF20070603)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：关杨姜祎群孙建方陈浩曾学思更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院深圳市慢性病防治中心更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HINT1对人黑素瘤细胞A375增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨HINT1基因对人黑素瘤细胞A375增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法应用构建的pcDNA．3．1／myc-His（-）A-HINT1真核表达载体，建立稳定转染且能高表达HINT1的A375细胞模型。用MTT法检测细胞增殖活性变化，流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率，TUNEL法检测细胞凋亡。分光光度法检测Caspase3，Caspase8及Caspase9的相对活性。Western印迹法检测bcl-2、bax、细胞色素C及p53的表达。结果与空载体-A375及未转染A375细胞相比，HINT1-A375细胞生长速度明显减慢（P〈0．05）；G1期细胞增多（73．17％±3．99％，F=25．65，P〈0．05），S期细胞减少（16．75％±1．62％，F=75．48，P〈0．01），细胞出现明显的晚期凋亡（23．57％±9．58％，F=11．71，P〈0．01）。TUNEL法显示凋亡阳性细胞百分比（12％±1％）显著增高（F=358．02，P〈0．01）；Caspase9（0．45±0．03，F=135．62，P〈0．01）和Caspase3表达（0．46±0．04，F=90．28，P〈0．01）升高。凋亡相关蛋白bax、细胞色素C及p53表达增加，bcl-2表达降低。结论高表达HINT1可抑制A375细胞的增殖，促进其凋亡，细胞周期出现G。期阻滞，提示HINT1可能是人黑素瘤的抑癌基因。
- 关杨姜祎群高莹陈浩曾学思孙建方
- 关键词：黑色素瘤细胞增殖细胞凋亡
- HINT1对人黑素瘤A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤生长及凋亡的影响
- 2010年
- 目的 探讨组氨酸三聚体核苷结合蛋白1（HINT1）对人黑素瘤A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤生长及凋亡的影响.方法 三组裸鼠随机皮下接种HINT1-A375、neo-A375及未转染的A375细胞,观察各组移植瘤的生长情况,计算成瘤率.组织病理切片观察移植瘤组织形态学改变,并应用TUNEL法检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 三组裸鼠皮下异种移植瘤成瘤率均为100%.HINT1组移植瘤生长速度慢,接种后18 d移植瘤生长速度显著低于neo组及A375细胞组（P＜0.01）.HINT1组、neo组及A375细胞组肿瘤重量分别为（0.04±0.00）g、（0.23±0.00）g、（0.29±0.03）g;肿瘤体积分别为（0.06±0.04）cm^3、（0.34±0.15）cm^3、（0.43±0.19）cm^3.HINT1组肿瘤重量及体积均显著低于neo组及A375细胞组（P值均＜0.01）.组织病理结果显示,与neo组及A375细胞组相比,HINT1组肿瘤团块较小,细胞异形小,病理性核分裂象少见,瘤团内未见大片坏死灶.HINT1组中平均凋亡细胞百分比为12.87%±1.18%,显著高于neo组（3.22%±0.49%）及A375细胞组（3.00%±0.53%）（P值均＜0.01）.结论 高表达HINT1可显著抑制A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤的生长,促进其凋亡,提示HINT1基因可能是人黑素瘤的抑癌基因之一.
- 关杨徐秀莲刘毅李阿梅姜祎群孙建方
