国家自然科学基金(39730220)
- 作品数：113 被引量：801H指数：16
- 相关作者：唐朝枢邓仲端瞿智玲朱广瑾符民桂更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院北京大学第一医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 钙调神经磷酸酶在血管紧张素Ⅱ刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节被引量：4
- 2000年
- 目的 :观察钙调神经磷酸酶 (CaN)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节。方法 :建立AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大模型 ,观察CaN抑制剂对AngⅡ刺激的心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入的影响 ,以及各种因素对心肌细胞CaN酶活性的影响。结果 :10、10 0、10 0 0nmol·L-1的AngⅡ作用 12h分别使心肌细胞的CaN活性增加了 13%、5 7% (P <0 0 5 )、2 2 8% (P <0 0 1)。AngⅡ (10nmol·L-1)刺激心肌细胞 2h内 ,CaN活性与对照组无明显差异 (P <0 0 5 ) ;AngⅡ刺激心肌细胞 12h以上 ,CaN活性才明显增高 (P <0 0 5 )。Losartan(5 0 μmol·L-1)、H7(5 0 μmol·L-1)及Fura - 2 /AM(4 μmol·L-1)可明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性 ;而PD980 5 9(5 0 μmol·L-1)对AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性无明显影响。AngⅡ (10 -7mol/L)刺激的大鼠心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入明显高于对照组 (P <0 0 1) ,而CaN特异性抑制剂 -环孢素A(0 5～ 5 μg/mL)可以明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入。结论 :依赖Ca2 +/CaM活化的CaN可能在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用 ;CaN的活化可能有赖于胞内Ca2 +水平的持续升高 ,另外 。
- 符民桂陈亚红李淑莲许松庞永政刘乃奎唐朝枢
- 关键词：心肌肥大钙调神经磷酸酶
- 丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用被引量：11
- 2003年
- 研究丹参提取物单体 (76 4 3)对肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)诱导人血管内皮细胞 (humanvascularendothelialcell,HUVEC)组织因子 (tissuefactor,TF)基因表达的干预作用 ,及其对单个内皮细胞胞内游离钙([Ca2 + ]i)水平的影响 ,以探讨 76 4 3对心血管血栓栓塞性疾病防治的可能机制。进行人脐静脉原代内皮细胞、ECV30 4细胞株的培养。采用限制性内切酶法 ,构建含有人TF基因不同上游调控序列的荧光素酶报告基因质粒 ,经脂质体法转染内皮细胞 ,用TNF α及 76 4 3处理内皮细胞 ,测定细胞裂解物荧光素酶及 β半乳糖苷酶活性。以Fluo 3/AM为荧光指示剂 ,用激光扫描共聚焦显像系统观测 [Ca2 + ]i的改变。结果发现在TF基因上游序列 - 2 4 4 / +12 1bp存在下 ,TNFα可使转染内皮细胞荧光素酶表达量比对照组明显增加 ,76 4 3使这种增加有所降低。而 - 111/+12 1bp存在时 ,TNF α组与对照组荧光素酶表达量无明显差异 ,均比 - 2 4 4 / +12 1bp存在时明显降低 ,此时 ,76 4 3并未引起荧光素酶表达量明显改变。激光扫描共聚焦显像显示 ,TNF α可引起人内皮细胞 [Ca2 + ]i持续缓慢升高 ,加入 76 4 3后 [Ca2 + ]i迅速大幅度降低 ,逐渐恢复到基线水平。提示 76 4 3可抑制TNF
- 孙瑛高咏梅朱广瑾
- 关键词：肿瘤坏死因子内皮细胞肿瘤坏死因子-Α
- Efect of NF-κB on the induction of PDGF-B transcription by angiotensin Ⅱin the ECV304 cell line被引量：2
- 2002年
- 目的 研究血管紧张素Ⅱ对ECV30 4细胞中转录因子NF κB的作用和对PDGF B基因表达的影响。方法 采用电泳迁移率移动分析法 (EMSA)和免疫组化方法 ,包括共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术 ;荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的方法及Northern印迹法研究血管紧张素Ⅱ激活NF κB的信号传递路径和检测了血管紧张素Ⅱ刺激前后PDGF BmRNA的表达水平。结果 血管紧张素Ⅱ刺激后 ,在ECV30 4细胞内有NF κB的激活及核易位过程 ,应用免疫荧光共聚焦显微镜 ,免疫电镜及Northern印迹等方法均可观察到PDGF B或其基因表达增高。变异型激酶质粒IKKα KM ,IKKβ KM及NIK KM可抑制经AngⅡ刺激的转染细胞内与NF κB启动相连的荧光素酶的表达。结论 AngⅡ可激活胞浆内NF κB并出现核易位 ,激酶NIK、IKKα 和IKKβ 参与了此信号传递路径。血管紧张素Ⅱ刺激后PDGF B链mRNA水平增高。
- 李皓尹鸿操张华曹心宜王宗立佘铭鹏
- 关键词：NF-ΚBPDGF-B
- 内源性碱性成纤维细胞生长因子是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子被引量：11
- 2000年
- 目的 :观察内、外源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在大鼠心脏缺血 /再灌注 (I/R)损伤中的作用。方法 :在大鼠离体心脏I/R模型上分别给以bFGF和bFGF抗血清 ,以生理多导仪测定心率、±LVdp/dtmax及左心室终末舒张压 (LVEDP)变化 ,并测定冠脉流量、冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、乳酸盐脱氢酶 (LDH)活性以及心肌组织钙、丙二醛 (MDA)、三磷酸腺苷 (ATP)含量和蛋白激酶 (PKC)、丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性。结果 :I/R组心功能显著低于对照组 ,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、LDH活性及心肌MDA、钙含量显著升高 ,ATP含量显著降低 (均P <0 0 1)。bFGF组±LVdp/dtmax较I/R组分别高 42 8%和 2 5 6 % ,LVEDP低 40 0 % ,再灌末心率 /预灌末心率 (HRr/HRi)及冠脉流量的 (B/A)分别高 42 3 %和 2 0 3% ,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量及LDH活性分别少 2 8 8%、30 2 % (均P <0 0 1)和 32 3% (P <0 0 5 ) ,心肌MDA和钙含量分别少 44 4%和 35 6 % ,ATP含量高 33 8%。心肌PKC、MAPK活性分别高 41 3%和 10 1% (均P <0 0 1) ;bFGF抗血清组±LVdp/dtmax较I/R组分别低 35 1%和 38 1% ,LVEDP高 92 5 % ,HRr/HRi及冠脉流量的B/A分别少 36 0 %和 45 4% ,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白和LDH漏出分别?
- 姜志胜王晓红符民桂赵文李淑莲唐朝枢
- 关键词：再灌注损伤信号传递心肌缺血
- 同型半胱氨酸对人单核细胞株THP-1表达趋化因子受体CCR1 mRNA的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP 1表达趋化因子受体CCR1mRNA的影响。方法 在THP 1单核细胞培养基中加入不同浓度的同型半胱氨酸 ,孵育 8h ;或加入终浓度 0 1mmol/L的同型半胱氨酸 ,分别孵育 4、8、 16h ,再分别用逆转录多聚酶链反应和原位杂交检测各组THP 1单核细胞CCR1mRNA。结果 对照组THP 1单核细胞表达较低水平的CCR1mRNA ,加同型半胱氨酸后各实验组CCR1mRNA表达随浓度和时间的增加而增强 ,且PCR产物经测序证实。原位杂交显示 ,THP 1单核细胞表达CCR1mRNA为胞质内紫蓝色颗粒。图像分析显示 ,经同型半胱氨酸处理后 ,各组细胞胞质内CCR1mRNA表达明显增加 ,并呈剂量和时间依赖性。方差分析表明 ,组间差异极为显著(P <0 0 1)。结论 同型半胱氨酸能诱导THP 1单核细胞表达CCR1mRNA ,且与同型半胱氨酸的浓度和时间呈正相关 ,并可能通过促进招募单核细胞进入内皮下间隙 。
- 邢玮邓仲端倪娟
- 关键词：同型半胱氨酸单核细胞趋化因子
- 脂多糖刺激人血管内皮细胞分泌内皮素和肾上腺髓质素及其机制研究被引量：8
- 2001年
- 目的 :研究脂多糖 (LPS)刺激人血管内皮细胞 (HVEC)分泌内皮素 - 1(ET - 1)与肾上腺髓质素 (Adm)的机制。方法 :在培养的HVEC上 ,用放射免疫法测定不同浓度LPS刺激HVEC分泌的ET - 1与Adm ,以及不同的细胞信号转导阻断剂对其分泌的影响。结果 :LPS呈时间和浓度依赖性地增加HVEC分泌ET - 1和Adm ,ET - 1/Adm比值与对照组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。在LPS刺激基础上 ,细胞外信号调节激酶 (ERKs)抑制剂PD0 980 59和P38蛋白激酶抑制剂SB2 0 2 190 可明显降低LPS刺激HVEC分泌ET - 1(P <0 0 1) ,仅SB2 0 2 190 显著降低Adm的分泌 (P <0 0 5 ) ,其余PKC抑制剂H7,钙调素 (CaM)抑制剂W7,Ca2 + 阻断剂nicardipine,钙调神经磷酸酶 (CaN)抑制剂环孢霉素 (CsA)对LPS刺激HVEC分泌ET - 1和Adm均无明显影响 (P >0 0 5 )。结论 :LPS刺激HVEC分泌ET - 1可能与ERKs和P38两条途径有关 ,LPS刺激HVEC分泌Adm只与P38信号通路有关 ,两者均不取决于PKC、Ca2 + 、CaM、CaN依赖的信号通路。
- 陈静炯龚永生徐雅琴许松柴三葆庞永正唐朝枢
- 关键词：脂多糖类内皮缩血管肽类肾上腺髓质
- 尾加压素Ⅱ的促丝裂作用被引量：75
- 2001年
- 为研究体内新发现的缩血管活性肽尾加压素Ⅱ对细胞的促丝裂作用 ,在培养的大鼠动脉血管平滑肌细胞和气道平滑肌细胞、心肌成纤维细胞以及肾系膜细胞上 ,采用 3 H -胸腺嘧啶掺入法 ,观察了尾加压素Ⅱ对细胞DNA合成的影响。结果显示尾加压素Ⅱ明显促进细胞 3 H -胸腺嘧啶掺入增加 ,并在一定浓度范围内呈剂量依赖性。但同一剂量的尾加压素Ⅱ在不同细胞产生的作用强弱不同 ,10 -10 mol/L的尾加压素Ⅱ仅对心肌成纤维细胞和气道平滑肌细胞有刺激作用 ,且成纤维细胞 >气道平滑肌细胞 ,10 -9～ 10 -8mol/L尾加压素Ⅱ对诸细胞的效应则为心肌成纤维细胞 >气道平滑肌细胞 >肾系膜细胞 >血管平滑肌细胞 ,而高浓度尾加压素Ⅱ (10 -7mol/L)对心肌成纤维细胞增殖的刺激作用明显减弱。这些结果提示尾加压素Ⅱ是一种新发现的内源性丝裂原 ,其促丝裂效应在疾病发生中的作用值得进一步研究。
- 张勇刚陈亚红马春艳齐永芬庞永正杨军张肇康唐朝枢
- 关键词：尾加压素平滑肌细胞增殖丝裂原
- 培养的钙化大鼠心肌细胞牛磺酸转运障碍被引量：5
- 2002年
- 目的探讨离体培养钙化幼鼠心肌细胞牛磺酸(Tau)跨膜转运功能及牛磺酸转运体(TAUT)和半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)mRNA含量的改变及意义。方法以β-磷酸甘油培养心肌细胞;氨基酸分析仪测定细胞牛磺酸含量;3H标记的牛磺酸测定心肌细胞牛磺酸转运;竞争性定量RT-PCR测定心肌细胞TAUT和CSDmRNA水平。结果与非钙化大鼠心肌细胞相比,钙化心肌细胞牛磺酸含量减少27%(P<0.05),细胞3H-牛磺酸摄入程度降低,最大转运速率(Vmax)减少39%(P<0.01),Km值两组间差异无显著性(P>0.05);钙化心肌细胞TAUTmRNA含量减少45%(P<0.01),而CSDmRNA增加25%(P<0.05)。结论钙化心肌细胞牛磺酸转运功能障碍,TAUT表达减少,而CSD表达增加。
- 石彦荣王述姮卜定芳齐永芬高霖庞永正唐朝枢
- 关键词：牛磺酸转运体MRNA
- 动脉粥样硬化家兔血浆及组织金属硫蛋白含量变化被引量：19
- 2000年
- 目的 :在家兔动脉粥样硬化 (AS)模型上观察肝、主动脉组织及血浆金属硫蛋白 (MT)含量变化 ,认识AS时机体氧化防御系统的改变。方法 :家兔高脂饮食 8周 ,复制高脂血症 -动脉粥样硬化模型 ,分别以[10 9Cd]血红蛋白饱和法和硫代巴比妥酸法测定家兔肝、主动脉组织及血浆MT及丙二醛 (MDA)含量。结果 :AS家兔肝组织和血浆MT水平分别较对照组高 318% (P <0 0 1)和 6 2 % (P <0 0 1) ,而主动脉组织MT含量较对照组低 33 % (P <0 0 1)。肝、主动脉组织及血浆MDA含量分别较对照组高 95 % (P <0 0 1) ,76 % (P <0 0 5 )和 42 % (P <0 0 1) ,肝组织 ,血浆MT变化与MDA变化相关。结论 :AS家兔肝组织和血浆MT产生增多与脂质过氧化损伤有关。
- 李淑莲王晓红薛林林静赵春玉唐朝枢
- 关键词：金属硫蛋白动脉粥样硬化脂蛋白类丙二醛
- 肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞组织因子基因表达及其机制的研究被引量：5
- 2002年
- 目的 :研究肿瘤坏死因子α(TNFα)、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对内皮细胞组织因子 (TF)表达的影响 ,并探讨TF基因 5’上游序列在TNFα、AngⅡ诱导内皮细胞该基因转录中的调控作用。方法 :应用细胞原位杂交技术检测TFmRNA水平。采用基因重组技术构建含有人TF基因不同上游序列荧光素酶报告基因质粒 ,经脂质体法转染内皮细胞 ,检测及分析报告基因活性。结果 :TNFα和AngⅡ均可以诱导内皮细胞TFmRNA表达增强。在TF基因上游序列 - 2 44 /+12 1bp存在时 ,TNFα、AngⅡ均可使转染内皮细胞荧光素酶表达量明显增加 ,而在 - 111/+12 1bp存在时TNFα、AngⅡ组与对照组荧光素酶表达量均无明显差异 ,而且较 - 2 44 /+12 1bp存在时荧光素酶表达量明显降低。结论 :TF基因上游 - 2 44 /- 112bp序列的存在对TNFα、AngⅡ诱导内皮细胞TF基因表达起重要的调节作用。
- 高咏梅朱广瑾
- 关键词：基因表达凝血致活酶血管内皮细胞肿瘤坏死因子血管紧张素
