广东省自然科学基金(9151052002000006)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
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- MicroRNA-29a对大鼠心肌细胞Bcl-2和Mcl-1表达的调控作用及其机制
- 目的:探讨microRNA-29a(miR-29a)对大鼠心肌细胞(CM细胞)B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的调控机制。方法:体外培养新生Sprague-Dawley大鼠CM...
- 张振辉尤祥宇刘少军刘连刘世明
- 关键词：细胞凋亡
- 文献传递
- 过表达miR-29a对大鼠心肌细胞凋亡的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨microRNA-29a(miR-29a)对大鼠心肌细胞凋亡的调控作用。方法体外培养新生SD大鼠心肌细胞,合成人miR-29a的拟似物(mimic)。用Lipofectamine RNAiMAX转染miR-29a的mimic进入心肌细胞,转染48 h后用荧光定量PCR方法检测心肌细胞miR-29a的表达变化,流式细胞仪检测细胞凋亡水平变化,Westernblot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9前体的表达变化。结果心肌细胞转染miR-29a的mimic 48 h后,心肌细胞中miR-29a的表达水平较对照组明显升高(P<0.05);心肌细胞的凋亡水平也明显升高,凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9前体的含量则明显下降(P<0.05)。结论在大鼠心肌细胞中过表达miR-29a能促进心肌细胞凋亡,其机制可能是通过Caspase-3和Caspase-9途径起作用。
- 张振辉黎佼刘本荣李爱群刘世明
- 关键词：细胞凋亡半胱氨酸蛋白酶3
- MicroRNA-29a对大鼠心肌细胞Bcl-2和Mcl-1表达的调控作用及其机制被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨microRNA-29a(miR-29a)对大鼠心肌细胞(CM细胞)B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的调控机制。方法:体外培养新生Sprague-Dawley大鼠CM细胞和人胚肾细胞株293T。合成大鼠miR-29a的拟似物(mimic)和抑制剂(inhibitor)。用脂质体Lipofectamine RNAiMAX转染miR-29a mimic进入CM细胞,转染48 h后分别用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2和Mcl-1mRNA和蛋白的表达变化。构建Bcl-2和Mcl-1的萤光素酶报告基因载体(DNA质粒),转染293T细胞(DNA质粒和miRNA共转染)和CM细胞(miRNA和DNA质粒先后转染),双萤光素酶报告基因系统检测萤光素酶的表达变化。结果:CM细胞转染miR-29a mimic 48 h后,Bcl-2和Mcl-1 mRNA和蛋白的水平均下调(P<0.05)。双萤光素酶报告基因系统显示,在293T细胞中,miR-29a可特异抑制带有bcl-2和mcl-1 3’UTR上野生型识别元件的报告基因表达(P<0.05),在CM细胞中,抑制内源性的miR-29a水平能促进bcl-2和mcl-1 3’UTR上野生型识别元件的报告基因表达。结论:抗凋亡基因bcl-2和mcl-1是miR-29a的靶基因。miR-29a可能通过作用于Bcl-2和Mcl-1实现对心肌细胞凋亡的调控作用,具体效应仍待进一步阐明。
- 张振辉尤祥宇刘少军刘连刘世明
- 关键词：细胞凋亡
