广东省自然科学基金(9151051501000060)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张振陈宏张桦杨力孙慧琳更多>>
- 相关机构：南方医科大学广东药学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 游离脂肪酸对猴胰岛微血管内皮细胞脂毒性的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)对恒河猴胰岛微血管内皮细胞(islet microvascular endo-thelial cells,IMECs)增殖和凋亡的影响及FFA介导的恒河猴IMECs氧化应激损伤。方法分离纯化恒河猴IMECs,分别用含有FFA(FFA组)和不含有FFA(对照组)的DMEM培养,MTT实验测定细胞增殖率(成活率),流式细胞仪检测细胞凋亡率,活性氧簇(ROS)酶联免疫分析(ELISA)测定IMECs中ROS的浓度。结果经24 h培养后,FFA组IMECs增殖率较对照组显著降低(P<0.01);Annexin V-FITC/PI双染色后FFA组于荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞;与对照组凋亡率比较,1.0 mmol/L FFA作用适当时间可显著升高IMECs凋亡率(P<0.01);FFA组IMECs中ROS水平较对照组显著升高(P<0.01)。结论高水平FFA可显著降低恒河猴IMECs增殖率,促进细胞发生凋亡,其凋亡可能与FFA介导的氧化应激损伤有关。
- 孙慧琳刘海明张振杨力孙嘉陈宏蔡德鸿张桦
- 关键词：游离脂肪酸凋亡
- 恒河猴胰岛的半自动分离和纯化
- 2011年
- 目的探讨恒河猴胰岛分离和纯化的技术方法。方法采用自制的半自动胰腺消化分离装置，对3只成年恒河猴胰腺进行消化分离，用非连续密度梯度高渗枸橼酸盐嘌呤溶液（HCA液）-蔗聚糖液（Ficoll液）纯化恒河猴胰岛，通过双硫腙染色在倒置显微镜计数胰岛的数量和纯度，用胰岛素释放试验检测胰岛的分泌功能。分离和纯化结果采用配对t检验进行统计分析。结果消化后平均每个胰腺可获得（101420±12054）胰岛当量（IEQ），纯化后平均每个胰腺可获得（71480±8054）IEQ，平均每克恒河猴胰腺组织可获得（2310±252）IEQ，纯化后胰岛平均纯度为（89．8±8．7）％，活率为（93．1±2．8）％。纯化后的胰岛对葡萄糖刺激反应良好，高糖（16．7mmol／L）时胰岛素的释放量为低糖（3．3mmol／L）时的5．9倍（t=45．2，P〈0．01）。分离胰岛在移植到糖尿病大鼠肾包膜下后能够影响降低血糖至支持水平。结论通过采用半自动胰腺消化分离装置，胶原酶P灌注消化及非连续密度梯度法纯化，能获取较高纯度及生物活性良好的恒河猴胰岛。
- 孙慧琳刘海明张振杨力孙嘉杨锐陈容平陈宏孙尔维蔡德鸿张桦
- 关键词：胰岛细胞分离恒河猴
