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国家重点基础研究发展计划(2006CB0F0603)

作品数:5 被引量:18H指数:3
相关作者:关云谦张愚朱宛宛徐艳玲王淑艳更多>>
相关机构:首都医科大学宣武医院教育部首都师范大学更多>>
发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇胚胎
  • 4篇干细胞
  • 3篇胚胎干细胞
  • 3篇细胞
  • 2篇人胚
  • 2篇人胚胎
  • 2篇人胚胎干细胞
  • 2篇细胞分化
  • 2篇分化
  • 2篇干细胞分化
  • 1篇蛋白
  • 1篇型胶原
  • 1篇胰酶
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇原始细胞
  • 1篇神经分化
  • 1篇神经元
  • 1篇时钟基因
  • 1篇鼠胚

机构

  • 4篇首都医科大学...
  • 3篇教育部
  • 1篇首都医科大学
  • 1篇首都师范大学
  • 1篇国家人类基因...

作者

  • 4篇张愚
  • 4篇关云谦
  • 3篇朱宛宛
  • 3篇徐艳玲
  • 2篇王淑艳
  • 2篇吴迪
  • 1篇王芳
  • 1篇谢淑
  • 1篇武文琪
  • 1篇蔡彦宁
  • 1篇朱宝长
  • 1篇陈彪
  • 1篇付琳琳
  • 1篇任萍
  • 1篇杜庆安
  • 1篇李宁

传媒

  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇基础医学与临...
  • 1篇首都医科大学...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 2篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
小鼠胚胎干细胞分化扩增期连续低密度传代对原始细胞中Oct-4阳性细胞比例及神经分化能力的影响被引量:2
2009年
目的:探讨在分化扩增期采用连续低密度传代的方法是否能降低小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的前体细胞中Oct-4阳性细胞的比例,以及对神经分化能力的影响。方法:采用"五步法"将小鼠胚胎干细胞向神经元分化,进入扩增期后采用连续低密度传代的方法连续传10代。然后应用细胞免疫组化鉴定Oct-4阳性细胞、神经元与胶质细胞、流式细胞仪检测Oct-4阳性细胞比例、凋亡试剂盒测定细胞凋亡。结果:流式细胞仪检测出扩增期连续低密度传代得到的前体细胞中Oct-4阳性细胞的比例由16.17±4.8%降至4.33±1.63%,扩增期低密度传代细胞和正常高密度传代细胞的细胞凋亡率鉴定分别为15.16±3.64%和11.88±2.63%,步骤5诱导分化后的细胞GFAP和Tuj-1免疫组化染色呈阴性。结论:低密度传代培养可以减少分化后Oct-4阳性细胞的比例,且该比例下降不是由Oct-4阳性细胞的凋亡引起的。同时可能是因为低密度传代培养和高密度相比引起了细胞的质变、或者改变了前体细胞向神经元分化的某种微环境,导致了前体细胞不能分化为神经细胞。提示高密度培养在前体细胞向神经元分化过程中具有重要作用,高密度和低密度培养的比较,提供了研究ES细胞向神经元分化机制的新平台和研究方向。
王芳杜庆安朱宛宛吴迪徐艳玲关云谦张愚
关键词:神经分化
时钟基因在胚胎干细胞分化为神经元过程中的表达特征被引量:2
2007年
目的检测小鼠胚胎干细胞(ES)体外向神经元诱导分化过程中,7种重要时钟基因的表达情况。方法小鼠胚胎十细胞(ES),经过5个阶段诱导分化为神经元。各阶段细胞的总 RNA反转录为 cDNA,利用7种时钟基因的特异引物进行 PCR 反应,以明确其随分化表达的情况。结果各个时钟基因无非特异扩增,BMAL1、CLOCK、CRY1和 CRY2、PER1、PER3基因在各个分化阶段中都表达,而 PER2基因只在终末阶段被检测到。结论时钟基因的转录在 ES 细胞向神经元分化的过程中并不一致,提示在成体动物存在的时钟基因环路,在 ES 细胞向神经元分化过程中还没有建立。PER2 仅在分化终末期——大量停止分裂的神经元和胶质细胞出现的时期才转录,提示其可能在细胞增殖过程中发挥某种作用。
谢淑蔡彦宁关云谦武文琪徐艳玲张愚陈彪
关键词:胚胎干细胞细胞分化神经元节律基因
慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞及其培养被引量:7
2008年
目的稳定培养人胚胎干细胞,并通过慢病毒载体对其进行绿色荧光蛋白标记。方法利用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层或Matrigel作为基质培养人胚胎干细胞,包装带有GFP序列的慢病毒转染人胚胎干细胞。对转染前后的人胚胎干细胞进行了碱性磷酸酶和SSEA-3免疫组化鉴定。结果在MEF饲养层和Matrigel上均可培养出呈克隆样生长,表达标志抗原的人胚胎干细胞,经慢病毒转染及抗生素筛选后仍可稳定表达GFP。结论成功地培养了人胚胎干细胞系,并进行了GFP标记。
李宁朱宝长朱宛宛王淑艳任萍关云谦张愚
关键词:人胚胎干细胞绿色荧光蛋白慢病毒
Cells therapy for Parkinson's disease-so close and so far away被引量:4
2009年
One of the strategies of treating Parkinson's disease(PD) is the replacement of lost neurons in the substantia nigra with healthy dapamingergic cells.Potential sources for cells range from autologous grafts of dopamine secreting cells,fetal ventral mesencephalon tissue,to various stem cell types.Over the past quarter century,many experimental replacement therapies have been tried on PD animal models as well as human patients,yet none resulted in satisfactory outcomes that warrant wide applications.Recent progress in stem cell biology has shown that nuclear transfer embryonic stem cells(ntES) or induced pluripotent stem cells(iPS) derived cells can be used to successfully treat rodent PD models,thus solving the problem of immunorejection and paving the way for future autologous transplantations for treating PD.Meanwhile,however,post mortem analysis of patients who received fetal brain cell transplantation revealed that implanted cells are prone to degeneration just like endogenous neurons in the same pathological area,indicating long-term efficacy of cell therapy of PD needs to overcome the degenerating environment in the brain.A better understanding of neurodegeneration in the midbrain appeared to be a necessary step in developing new cell therapies in Parkinson's disease.It is likely that future cell replacement will focus on not only ameliorating symptoms of the disease but also trying to slow the progression of the disease by either neuroprotection or restoring the micro-environment in the midbrain.
REN ZhenHua & ZHANG Yu Cell Therapy Center,Xuanwu Hospital,Capital Medical University and Key Laboratory of Neurodegeneration,Ministry of Education,Beijing 100053,China
关键词:CELLSTEMCELLMESENCEPHALONEMBRYONICSTEMCELLSEMBRYONICSTEMCELLSSTEMCELLS
胰酶和Ⅳ型胶原酶在人胚胎干细胞传代中的作用特点被引量:3
2008年
目的对比人胚胎干细胞(hESC)培养过程中不同的酶消化细胞的特点,探讨适合hESC长期体外培养的消化传代方法。方法将正常生长在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)滋养层上的hESC分别用0.05%胰酶-EDTA和Ⅳ型胶原酶消化,重新接种,了解两种酶消化后的细胞存活率、克隆形成数量、细胞产量、冻存-复苏后细胞的存活率以及长期传代后细胞核型情况。结果用0.05%胰酶-EDTA消化传代后形成的克隆大小均一,每代第3d可获得碱性磷酸酶(AP)阳性克隆数(21.2±3.5)个/10倍视野,每次传代时hES细胞产量可达(4.56±1.29)×105/cm2,传代时细胞存活率高达95.60%,经冻存-复苏后也有81.20%细胞存活率。用Ⅳ型胶原酶消化组每代仅可获得低浓度胰酶消化组AP阳性克隆数的一半,克隆大小不均,细胞产量也比低浓度胰酶消化组少,传代时细胞存活率和复苏后细胞存活率和低浓度胰酶组相似。分别用两种酶处理传代十余代,核型均无异常。结论两种酶消化均适用于hESC培养,二者作用特点不完全相同,分别适用于不同的实验需要。
朱宛宛王淑艳吴迪徐艳玲付琳琳关云谦张愚
关键词:人胚胎干细胞细胞培养胰酶
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