国家自然科学基金(30870349)
- 作品数：15 被引量：32H指数：3
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- 常氧和低氧条件下介导大鼠神经干细胞分化的信号通路分析被引量：1
- 2013年
- 目的:观察常氧和低氧环境下大鼠大脑皮层神经干细胞(NSCS)体外分化情况,并比较PI3K/Akt、JNK和Notch三条信号通路在不同氧环境下神经干细胞分化时所发挥作用的异同。方法:将体外悬浮培养48 h的神经干细胞转移至4%低氧和常氧中贴壁培养。更换培养基诱导分化,同时加入LY294002(PI3-K/Akt抑制剂)、SP600125(JNK抑制剂)和DAPT(Notch抑制剂),48 h后行β-微管蛋白Ⅲ(β-TubulinIII)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞荧光染色。对神经元和星形胶质细胞进行计数并分别计算各占的比例。结果:(1)低氧对照组神经元所占比例高于常氧对照组,星形胶质细胞低于常氧对照组,均具有统计学差异(P<0.01)。(2)在常氧环境下,LY294002组神经元所占比例显著低于常氧DMSO对照组(P<0.01),星形胶质细胞所占比例显著高于常氧DMSO对照组(P<0.01);和常氧DMSO组相比,SP600125组和DAPT组神经元和星形胶质细胞所占比例均无显著差异。(3)在低氧环境下,和低氧DMSO组比较,LY294002组和SP600125组神经元和星形胶质细胞所占比例均无显著性差异;DAPT组神经元所占比例显著高于常氧DMSO对照组(P<0.01),星形胶质细胞所占比例低于常氧DMSO对照组,无显著性差异。结论:PI3K/Akt介导了常氧条件下神经干细胞向神经元方向的分化;低氧可能通过抑制Notch信号通路促进神经干细胞向神经元方向分化。
- 王世强娄淑杰
- 关键词：低氧分化JNKNOTCH
- 跑台运动及周龄对大鼠海马神经发生的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨运动及其周龄对大鼠海马神经发生的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为7周龄安静对照组、7周龄小强度运动组、9周龄安静对照组和9周龄小强度运动组。腹腔注射BrdU于大鼠,持续注射6d。采用免疫组织荧光染色技术,检测各组大鼠海马齿状回内新生细胞和新生神经元数量。结果各组动物海马齿状回BrdU免疫阳性(BrdU+)细胞数目为:7周龄安静对照组50.66±10.54,7周龄小强度运动组74.21±17.00,9周龄安静对照组37.62±9.02,9周龄小强度运动组46.01±10.82。各组动物海马齿状回BrdU++NeuN+细胞数目为:7周龄安静对照组22.54±6.76,7周龄小强度运动组33.38±8.26,9周龄安静对照组15.26±4.42,9周龄小强度运动组17.61±3.86。结论运动促进海马齿状回神经发生,随着周龄的增长而减弱。
- 刁玮娄淑杰陈佩杰
- 关键词：神经发生海马
- 低氧对大鼠大脑皮层细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:观察不同氧浓度环境下不同时间处理对大鼠大脑皮层细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的影响。方法:原代培养新生SD大鼠大脑皮层细胞,设1%、4%两个低氧浓度和3、6 h两个低氧处理时间,处理结束后收集各组细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-QPCR)方法检测各组细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA情况。结果:与相应的常氧对照组相比,1%和4%氧浓度环境处理细胞3 h和6 h时,IL-1β和TNF-αmRNA表达量均无明显变化(P>0.05);处理细胞3 h时,IL-6 mRNA表达量均无明显变化(P>0.05),但有上升的趋势,处理细胞6 h时IL-6 mRNA表达量均显著升高(P<0.05)。结论:1%和4%氧浓度环境虽均对大脑皮层细胞表达IL-1β和TNF-α mRNA无影响,但可诱导细胞表达IL-6 mRNA,且具有时间依赖性。
- 李华华娄淑杰
- 关键词：低氧大脑皮层细胞IL-1ΒTNF-ΑIL-6MRNA
- 大脑皮层细胞低氧条件液诱导神经干细胞分化及其可能的信号转导通路
- 2013年
- 本研究旨在分析大鼠大脑皮层细胞低氧条件液对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化的影响,并探讨P13-K和JNK两条信号通路在此过程中的作用。原代培养出生后24 h内SD大鼠大脑皮层细胞5 d后,全量换液并分别在4%O_2、1%O_2和常氧浓度环境下继续培养细胞6 h以制备低氧条件液和常氧条件液。用三种条件液及结合使用P13-K、JNK信号通路抑制剂LY294002和SP600125培养NSCs,使用免疫荧光双标法鉴定NSCs后代细胞表型,并计算每种表型细胞在后代细胞中所占比例,以分析不同条件下NSCs的分化情况。结果显示,在三种条件液培养下NSCs分化出神经元的比例均高于星形胶质细胞的比例;与常氧条件液组比较,4%低氧条件液促进了NSCs向神经元方向分化(P<0.01),而1%低氧条件液则抑制了NSCs向神经元方向分化(P<0.01)。在4%低氧条件液中使用LY294002和SP600125均抑制了NSCs向神经元方向分化(P<0.01),且LY294002抑制作用较SP600125大(P<0.01)。以上结果提示,4%低氧条件液能促进大脑皮层NSCs向神经元方向分化,且P13-K信号通路在此过程中发挥主要作用。
- 蔡明陆耀飞娄淑杰
- 关键词：大脑皮层细胞神经干细胞分化PI3-KJNK
- 低氧对大鼠海马神经干细胞增殖的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察和分析不同低氧浓度对海马神经千细胞（NSCs）增殖的影响。方法在体积分数4％O2、1％O2及常氧环境下培养新生SD大鼠海马神经干细胞，观察低氧对神经球数量和直径的影响。结果（1）对海马神经干细胞增殖效率的影响：体积分数1％低氧组神经球数量明显低于常氧对照组，具有显著性差异（P〈0．05）；体积分数4％低氧组神经球数量有高于对照组的趋势，但不具有显著性差异。（2）对海马神经干细胞增殖速度的影响。在培养24h、36h和48h后，体积分数1％低氧组神经球的直径都小于对照组，且在24h和36h时具有显著性差异（P〈0．05），在48h具有极显著性差异（P〈0．01）；在培养24h、36h和48h后，体积分数4％低氧组神经球的直径都大于对照组，在36h时具有显著性差异（P〈0．05），在48h时具有极显著性差异（P〈0．01）。结论体积分数4％低氧浓度环境既提高海马神经干细胞的增殖效率也提高海马神经千细胞的增殖速麾体积分数1％低氧浓度环境则既抑制海马神经干细胞的增殖效率也抑制海马神经干细胞的增殖速度。提示中度低氧有利于海马神经干细胞的增殖：过度低氧不利于海马神经千细胞的增殖。
- 王世强娄淑杰
- 关键词：低氧神经干细胞增殖海马
- 低氧对大鼠大脑皮质细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响
- 2012年
- 目的观察低氧环境对大鼠大脑皮质细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响。方法原代培养新生SD大鼠大脑皮质细胞,设1%、4%两个低氧浓度和3h、6h两个低氧处理时间,处理结束后采用ELISA方法检测各组细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量。结果与相应的常氧(20%氧)对照组相比,1%氧浓度环境处理细胞3h和6h,IL-6含量均下降(P<0.01,P<0.05),IL-1β和TNF-α含量变化无统计学意义(P>0.05)。与相应的常氧(20%氧)对照组相比,4%氧浓度环境处理细胞3h,IL-1β、IL-6和TNF-α含量变化均无统计学意义(P>0.05);处理细胞6h时,IL-1β(P<0.01)和IL-6(P<0.05)均显著下降,TNF-α含量变化无统计学意义(P>0.05)。结论 1%氧浓度环境虽对大脑皮质细胞分泌IL-1β和TNF-α无影响,但可抑制细胞分泌IL-6。4%氧浓度环境虽对细胞分泌TNF-α无影响,但对细胞分泌IL-1β和IL-6具有抑制作用。
- 李华华娄淑杰
- 关键词：细胞低氧大脑皮质白介素1Β白介素6
- 低氧对大鼠大脑皮层神经干细胞增殖和分化的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察和分析不同低氧浓度对大鼠大脑皮层神经干细胞(neural stem cells,NSC S)增殖和分化的影响。方法:在1%O2、4%O2和常氧环境(20%O2)下培养新生SD大鼠神经干细胞,对神经球计数并测量其直径,分析不同低氧对神经干细胞增殖效率和增殖速度的影响;分化48 h后行β微管蛋白Ⅲ(β-tubulin III)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫细胞荧光染色,对神经元和星形胶质细胞进行计数并分别计算各占的比例。结果:(1)低氧对神经干细胞增殖效率和增殖速度的影响:1%低氧组神经球数量明显低于常氧对照组,具有显著性差异(P<0.05);4%低氧组神经球数量高于对照组,具有显著性差异(P<0.05)。在24 h、36 h和48 h,1%低氧组神经球的直径都小于对照组,在24 h和36 h时具有显著性差异(P<0.05),在48 h具有非常显著性差异(P<0.01);在24 h、36 h和48 h,4%低氧组神经球的直径都大于对照组,在36 h时具有显著性差异(P<0.05),在48 h具有非常显著性差异(P<0.01)。(2)1%低氧组神经元的比例(0.614±0.056)显著高于其对照组(0.471±0.067)(P<0.01);而1%低氧组星形胶质细胞的比例(0.241±0.051)低于其对照组(0.322±0.067)(P<0.05)。4%低氧组神经元的比例(0.625±0.072)显著高于其对照组(0.513±0.032)(P<0.05);而4%低氧组星形胶质细胞的比例(0.237±0.053)显著低于其对照组(0.285±0.042)(P<0.05)。结论:和常氧对照组相比,4%O2促进大鼠大脑皮层神经干细胞的增殖,而1%O2抑制了神经干细胞的增殖;1%O2和4%O2都促进神经干细胞向神经元方向分化,同时抑制向星形胶质细胞分化,1%O2的这种作用更为显著。
- 王世强娄淑杰
- 关键词：低氧神经干细胞增殖分化大脑皮层
- 不同低氧水平暴露对大鼠空间学习记忆、探究能力的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:观察不同低氧水平暴露对大鼠空间学习记忆、自主探究行为和焦虑情绪的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为11%和15%氧浓度组,每组均包括对照组(C11、C15)、4 h组(4H11、4H15)、8 h组(8H11、8H15)和12 h组(12H11、12H15),每组10只。C11和C15组大鼠在常氧条件下饲养7 d,其余各组大鼠接受低氧暴露,持续7 d,结束后分别检测大鼠的空间学习记忆、自主探究行为和焦虑情绪的行为学表现。结果:(1)低氧对大鼠空间学习记忆的影响,与C15相比,8H15大鼠第1 d逃避潜伏期显著延长(P<0.05),其第1 d与第2 d、第1 d与第3 d逃避潜伏期的差值显著增加(P<0.05)。(2)低氧对大鼠自主探究行为和焦虑情绪的影响,与C15相比,4H15大鼠在总运动距离、跨格数、站立次数和进入开放区域次数方面明显减少(P<0.05),12H15大鼠在跨格数、进入开放区域次数和开放区域时间方面均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:11%和15%氧浓度每天分别暴露8 h、4 h、12 h均会减少大鼠的自主探究行为,增加焦虑情绪。
- 仲晓寒高梦雅娄淑杰
- 关键词：低氧暴露学习记忆焦虑情绪
- 低氧环境下运动对大鼠血清睾酮、皮质酮浓度及其比值的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察不同低氧浓度环境训练后大鼠血清睾酮(testosterone,T)、皮质酮(corticosterone,C)的浓度及T/C的变化,为确立适宜的低氧训练模式提供实验依据。方法 SD大鼠60只,随机分为安静对照组(C)、常氧运动组(E)、15%氧浓度对照组(15C)、15%氧浓度运动组(15E)、11%氧浓度对照组(11C)和11%氧浓度运动组(11E),每组10只,运动方式为跑台运动。采用ELISA方法检测大鼠血清中T和C的浓度。结果 (1)11C组T浓度低于C组(P<0.05);11E组T浓度低于E组(P<0.01);(2)E组大鼠血清C浓度高于C组(P<0.05);11E组C浓度低于E组(P<0.01);15E组C浓度低于E组(P<0.05);(3)11C组T/C值低于C组(P<0.05)。结论 11%氧浓度对T/C的平衡可能带来负面影响,但运动可一定程度代偿低氧带来的不利影响;15%氧浓度未对大鼠T/C的平衡产生影响。
- 温鑫菲娄淑杰邹军
- 关键词：低氧训练睾酮皮质酮
- 低氧对大鼠大脑皮层细胞表达血管内皮生长因子的影响被引量：1
- 2013年
- 观察不同氧浓度环境下不同时间处理对大脑皮层细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)及表达VEGF mRNA的影响。方法:原代培养SD大鼠大脑皮层细胞,5 d后将低氧组细胞转移至低氧工作站,在1%和4%氧浓度环境下分别处理3 h和6 h,其相应的常氧对照组细胞则继续放置于CO2孵箱中。采用ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白含量,采用RT-PCR法检测细胞内VEGF mRNA表达水平。结果:与对照组相比,在4%和1%氧浓度环境下3 h组细胞VEGF mRNA及蛋白表达无明显变化(P>0.05),但均有增加趋势,而6 h组引起VEGF mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05),且1%氧浓度6 h组增幅更大(P<0.01)。结论:低氧可诱导大鼠大脑皮层细胞分泌VEGF和表达VEGF mRNA,且皮层细胞的反应性与低氧浓度、低氧刺激时间有关。
- 周跃辉袁海平娄淑杰
- 关键词：低氧皮层细胞血管内皮生长因子RT-PCR
