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国家社会公益研究专项计划(2001DIA40036): 作品数：13 被引量：54H指数：6; 相关作者：章金刚吕茂民杨姝熊景峰贾莉玮更多>>; 相关机构：军事医学科学院中国农业大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家社会公益研究专项计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

剖腹产小型猪在隔离器内的生长规律初报被引量：1: 2005年; 通过对23例农大小型猪无菌剖腹产手术共获取健康仔猪153头,称量寄养期间猪只体重和计算奶量。结果表明,农大小型猪的平均初生重0.37 kg;21日龄寄养成活145头,平均体重1.85 kg,21日龄每头猪平均耗奶量11.20 L,寄养成活率达到94.77%。并观察了隔离器中部分仔猪不同日龄的体重,初步探索了小型猪在悉生环境中的生长规律。; 李纪平钱学敏王朝军李明赵继勋; 关键词：畜牧学体重小型猪

用RACE技术快速扩增五指山猪来源的猪内源性反转录病毒3'LTR被引量：1: 2004年; 测定我国小型猪来源的猪内源性反转录病毒(PERV)3'LTR,以便于PERV全基因的克隆和分析。用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,从五指山猪外周血淋巴细胞mRNA中扩增到PERV-3'LTR,并克隆入pGEM-Teasy载体,将阳性克隆进行序列测定和同源性分析。测序结果显示该克隆3'端的尾部有一个由12个A组成的poly(A)信号;其R区与PERV-MSL的R区(约64bp)基本一致,同源性分析表明其与PERV-MSL的3'LTR具有81%的序列同源性。说明成功扩增了我国五指山猪来源的PERV-3'LTR,将有利于PERV全基因的克隆。; 吕茂民谢放吴健敏章金刚; 关键词：五指山猪猪内源性反转录病毒同源性分析

我国小型猪内源性反转录病毒的相关研究: 随着移植医学和免疫学研究的进展,也由于人源供体器官的短缺,猪被选定为最合适的异种移植供体。现今,猪心脏瓣膜已成功地移植入人体内,猪皮肤已作为烧伤病人的暂时覆盖物,猪胰岛细胞已被植入糖尿病人体内,猪→人异种移植已展现出十分...; 马玉媛吕茂民吴建敏丁芳徐述阳玉彪郭艳茹田克恭章金刚; 文献传递

猪内源性反转录病毒感染HEK293细胞模型的建立被引量：10: 2003年; 目的　建立猪内源性反转录病毒感染HEK2 93细胞的模型 ,验证PERV在体外对人源细胞的感染性 ,并进一步研究PERV的生物学特性。方法　将G4 18抗性的HEK2 93细胞与猪源PK 15细胞共培养 ,6周后 ,用含有6 0 0 μg mlG4 18的选择性培养基对共培养细胞进行加压筛选 ,用以除去共培养体系中的PK 15细胞 ;然后应用PCR及RT PCR的方法对所制备的感染细胞模型进行系统鉴定。结果　经 6周共培养及 3周加压筛选后 ,细胞的形态、生长速度及折光性均未见明显变化 ;PCR及RT PCR鉴定表明 ,筛选后的共培养体系中已没有PK 15细胞的存在 ;PERV特异性检测方法检测显示 ,该细胞模型的DNA中已有PERV的整合且有PERV特异性mRNA的表达。结论　本实验成功建立了PERV感染HEK2 93细胞的模型 ,证实了PERV在体外对人源细胞具有感染性 ;; 吕茂民贾莉玮斯日古愣杨文斌杨姝章金刚; 关键词：细胞模型病毒安全性异种移植

尼帕病毒基因结构及其产物被引量：4: 2003年; 尼帕病毒 (nipah virus,NV)是新近发现的一种新的副粘病毒 ,因导致 1998～ 1999年马来西亚、新加坡等东南亚国家流行性脑炎而倍受关注。本文就尼帕病毒的基因组结构、编码蛋白的特征、分子诊断技术及与其它负链 RNA病毒的关系等方面综述了其研究进展。; 杨文斌吕茂民章金刚; 关键词：尼帕病毒基因结构编码蛋白分子诊断

聚合酶链反应检测4种猪源细胞系中的内源性反转录病毒(英文)被引量：10: 2003年; 为了建立检测猪内源性反转录病毒 (porcine endogenous retrovirus,PERV)的特异性方法 ,根据已发表的 PERV的序列 ,设计并合成了针对 PERV核心蛋白 (gag)、多聚酶 (pol)、囊膜蛋白 (env)基因的 3对引物 ,预期扩增片段分别为 36 1、15 0、2 6 5 bp。应用 PCR技术检测了 PERV在 4株猪源细胞中的整合情况。结果表明 ,在所有被检细胞的基因组中均存在有 PERV的前病毒序列 ;应用 RT- PCR检测上述 4株猪源细胞中 PERV特异性 m RNA的表达 ,结果均为阳性。试验还对建立的上述 2种方法的特异性进行了探讨 ,结果表明试验建立的 PERV检测法具有较高的特异性。该方法的建立为进一步研究 PERV奠定了基础 ,还可对异种移植动物模型及异种移植受体进行病原安全性监测。; 吕茂民金红邓瑞春王建国杨姝熊景峰丁壮章金刚; 关键词：聚合酶链反应检测

中国巴马小型猪内源性反转录病毒的检测被引量：8: 2003年; 目的 :对我国特有巴马小型猪内源性反转录病毒 ( porcine endogenous retrovirus,PERV)的存在与 m RNA的表达情况进行检测 ,了解巴马小型猪内源性反转录病毒的携带情况。方法 :根据以往建立的 PCR、RT-PCR检测方法 ,对来自于巴马小型猪外周血淋巴细胞的 DNA和RNA样品进行 PERV核心蛋白基因 ( gag)、多聚酶基因 ( pol)及囊膜基因 ( env)的存在与表达进行检测 ;同时 ,根据目前通用的 env基因分型方法检测 PERV env-A、env-B、env-C的存在与表达。结果 :在 1 2个被检的 DNA样品中均检出了PERV特异性 DNA的存在 ;同样 ,在 1 2个被检的 RNA样品中均有 PERV特异性 RNA的表达 ,且所表达的 PERV均为 A型和 B型 ;其中有9个 DNA样品检测出 PERV-C型的存在 ,所有样品中均未检出 C型 PERV的表达。结论 :检测结果表明 1 2个被检巴马小型猪基因组中存在着内源性反转录病毒序列 ,且能以 m RNA的形式表达 ,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础。; 徐斯日古楞吕茂民吴健敏章金刚; 关键词：巴马小型猪

国家社会公益研究专项计划(2001DIA40036)