上海市科委重大科技攻关项目(03JC14084)
- 作品数：7 被引量：52H指数：5
- 相关作者：陈楠王伟铭陈晓农张文王朝晖更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所中国科学院更多>>
- 发文基金：上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IgA肾病候选基因单核苷酸多态性的搜寻和确定被引量：11
- 2006年
- 目的通过搜寻IgA肾病(IgAN)候选的megsin和P选择素基因单核苷酸多态性 (SNPs)并分析其特点,为进行IgAN病例-对照相关研究提供重要资料。方法采用PCR产物直接测序法,对中国汉族人24份标本(12例IgAN,12例正常对照者)两个候选基因中所有启动子区、编码区及其部分调控区和外显子-内含子连接区域13 591 bp进行检测,开展SNPs筛查。结果经过对测序结果统计分析,共发现SNPs 27个,其中SERPINB7基因11个,SELP基因16 个;平均分布密度为503 bp／SNP。在我们发现的27个SNPs中,共有10个SNPs在GenBank中尚未报道过,占27个SNPs的37％。结论本检测为进一步行IgAN病例-对照相关研究及建立中国人群基因序列变异的自主知识产权提供了有用信息。
- 王朝晖陈楠王伟铭潘晓霞陈晓农张文陆颖韩斌
- 关键词：疾病遗传易感性P选择素MEGSIN
- BMP-7/GFP融合基因在人肾小管上皮细胞的表达与定位被引量：2
- 2004年
- 目的 构建骨成形蛋白-7(BMP-7)/绿色荧光蛋白(GFP)融合基因,观察其在人肾小管上皮细胞的表达与定位。方法 将小鼠BMP-7全长cDNA与GFP融合,连接进入真核细胞表达质粒pEGFP-C1中,以脂质体介导的方法将重组表达质粒pEGFP-C1-BMP-7转染入人肾小管上皮细胞。采用Western blot方法检测BMP-7在肾小管上皮细胞的表达;激光共聚焦荧光显微镜观察BMP-7在人肾小管上皮细胞中的定位情况。结果 限制性酶切以及DNA测序结果均说明所构建的重组质粒为BMP-7/GFP融合基因表达质粒。瞬时转染人肾小管上皮细胞BMP-7蛋白表达量较空载体转染组明显增加;GFP转染的细胞荧光均匀分布在整个细胞中,而pEGFP-C1-BMP-7转染的细胞荧光主要集中在细胞浆和细胞膜表面。结论 重组BMP-7/GFP融合蛋白具有GFP自发荧光的特性,且不影响BMP-7在细胞内的正确表达。
- 李娅陈楠陈佳韵王伟铭
- 关键词：BMP-7肾小管上皮细胞基因表达绿色荧光蛋白
- 肾脏疾病中的脂质异常及其危险因素分析被引量：5
- 2005年
- 目的回顾性总结肾脏疾病患者脂质水平的变化,分析与其相关的危险因素。方法收集229例各种肾脏疾病住院患者的临床资料,记录一般情况、血脂水平、肾功能、尿蛋白水平等,应用SAS软件进行相关性分析。结果229例肾病患者中61.57%的甘油三酯(TG)、50.21%的总胆固醇(Tch)、27.95%的高密度脂蛋白(HDL)、34.50%的低密度脂蛋白(LDL)、21.40%的载脂蛋白A(apoA)、23.58%的载脂蛋白B(apoB)和41.92%的脂蛋白(α)[Lp(α)]高于正常范围的高限;4.37%的HDL低于正常范围低限。回归分析显示相关关系包括:TG与尿蛋白、体重、尿酸,LDL、Tch、apoB与尿蛋白,HDL与年龄、血清肌酐等,apoA与体重、血清白蛋白与球蛋白比,Lp(α)与血尿素氮、尿蛋白相关。结论在肾脏疾病人群中,异常脂血症表现多样且常见,主要相关危险因素是尿蛋白,也包括肾功能、血清白蛋白、血清白蛋白与球蛋白之比等。
- 王伟铭陈楠王朝晖
- 关键词：肾脏疾病脂质异常载脂蛋白SAS软件脂质水平蛋白水平
- 骨形成蛋白-7基因转染对人肾小管上皮细胞外基质分泌的影响被引量：15
- 2006年
- 目的构建骨形成蛋白-7(BMP-7)全长基因表达质粒,观察BMP-7过表达对转化生长因子(TGF)-β诱导的人肾小管上皮细胞细胞外基质分泌(ECM)的作用。方法将BMP-7全长cDNA连接进入真核细胞表达质粒pcDNA3·1中,以脂质体Superfect介导的方法将重组表达质粒pcDNA3·1-BMP-7转染入人肾小管上皮细胞,挑选阳性克隆,以获得稳定转染的人肾小管上皮细胞株。采用Western印迹方法检测BMP-7在肾小管上皮细胞培养上清液中的表达。给予TGF-β(5ng/ml)进行处理,应用RT-PCR和ELISA的方法,观察BMP-7过表达对纤维粘连蛋白(FN)、胶原Ⅰ、Ⅲ(ColⅠ、Ⅲ)等细胞外基质mRNA和蛋白质表达的作用。结果EcoR I限制性酶切鉴定以及DNA双向测序结果均说明所构建的重组质粒为BMP-7全长基因表达质粒。Western印迹方法检测稳定转染人肾小管上皮细胞蛋白表达量明显高于空载体转染组(P<0·05)。TGF-β处理24、48、72h后,5ng/ml TGF-β处理组、空白质粒转染(pcDNA3·1)+5ng/ml TGF-β组ColⅠ、Ⅲ、FN mRNA的表达量明显高于正常对照组,空白质粒转染组(pcDNA3·1)[ColⅠ(A值):0·897±0·100、1·054±0·090vs0·286±0·010、0·319±0·080;ColⅢ(A值):1·114±0·040、0·961±0·090vs0·354±0·020、0·403±0·040;FN(A值):1·257±0·090、1·188±0·060vs0·413±0·020、0·454±0·060,均P<0·05];Col I、FN mRNA表达量pcDNA3·1-BMP-7转染组+5ng/ml TGF-β组明显低于TGF-β处理组(0·591±0·007、0·687±0·020,P<0·05),ColⅢmRNA表达有降低趋势(0·809±0·090),但差异无统计学意义。细胞培养上清液FN含量5ng/ml TGF-β处理组、空白质粒转染(pcDNA3·1)+5ng/mlTGF-β组明显高于正常对照组(P<0·05),而pcDNA3·1-BMP-7转染组+5ng/ml TGF-β组表达明显低于TGF-β处理组(P<0·05)。结论BMP-7过表达可以显著减少TGF-β所致的人肾小管上皮细胞FN、ColⅠ、ⅢmRNA和细胞培养上清液中的FN的表达。表明BMP-7减少小管间质炎症反应和纤维化的发生,改善�
- 李娅陈楠俞海瑾董晓蓓黄秋花
- 关键词：肾小管骨形态发生蛋白质类转染
- 原发系统性抗中性粒细胞胞质抗体阴性小血管炎的临床病理表现被引量：6
- 2006年
- 目的总结分析原发系统性小血管炎(PSV)抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)阴性小血管炎患者的临床病理特点,并与ANCA阳性患者进行比较,以提高对该类疾病的认识。方法回顾性总结并分析我科近7年来确诊的13例原发系统性ANCA阴性小血管炎的临床病理资料,并与同期30例ANCA阳性原发性小血管炎患者进行比较。结果ANCA阴性小血管炎组患者13例,占同期诊断的原发性小血管炎患者的7.14%。与ANCA阳性组相比,阴性组皮肤和消化道受损比率显著增高,而发热及中重度贫血发生率低于阳性组,阴性组蛋白尿水平高于阳性组,两组血管炎活动积分无差异。阴性组无一例血免疫球蛋白G升高,与阳性组相比差异有统计学意义(0vs50%,P<0.01)。阴性组肾脏新月体形成发生率低于阳性组,坏死和间质小管病变两组差异无统计学意义。两组免疫抑制治疗方案和临床缓解率差异无统计学意义。结论原发性ANCA阴性小血管炎并不罕见,毛细血管襻纤维素样坏死和无免疫球蛋白G升高有助于诊断。
- 王湘玲俞海瑾倪莉燕任红陈晓农张文郝翠兰陈楠
- 关键词：血管炎
- 转化生长因子-β1对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子表达的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子 (CTGF)表达的影响 ,同时观察TGF β1对肾小管上皮细胞合成细胞外基质 (ECM)、组织金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)及α 平滑肌肌动蛋白(α SMA)的影响。 方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,观察TGF β1诱导人近端肾小管上皮细胞系(HK 2 )合成CTGF、ECM、TIMP 1及α SMA的情况。 结果 :在无TGF β1刺激的情况下 ,HK 2细胞中有基础量的CTGFmRNA表达 ,TGF β1以剂量和时间依赖的方式诱导HK 2细胞合成CTGFmRNA ,其表达在 2 4h时达高峰 ,同时TGF β1可使HK 2细胞合成ECM、α SMA增多 ,但在时相上均晚于CTGF。随着TGF β1浓度的增加 ,HK 2细胞合成TIMP 1也随之增加 ,但较大剂量的TGF β1(15ng/ml)方可使TIMP 1mRNA的表达明显增加 (P <0 0 5 )。 结论 :TGF β1可直接诱导体外培养的人近端肾小管上皮细胞表达CTGF ,其表达转录水平要早于ECM、α SMA的表达 ,提示CTGF可能介导了TGF β1的促肾小管上皮细胞ECM合成和转分化的作用。
- 邢静萍王伟铭赵青陈楠
- 关键词：转化生长因子-Β1肾小管上皮细胞结缔组织生长因子
