国家自然科学基金(39730280)
- 作品数:8 被引量:66H指数:3
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- 相关机构:中国农业大学广东轻工职业技术学院长春师范学院更多>>
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- 从花粉肌动蛋白到作物雄性不育被引量:51
- 1999年
- 肌动蛋白在动植物细胞的生命活动中担负着重要任务 .花粉细胞中含有丰富的肌动蛋白 ,其结构及性质与动物肌动蛋白极其相似 .植物肌动蛋白基因的碱基序列及氨基酸序列与动物的序列亦极为相似 .植物细胞质雄性不育系植株的花粉比其保持系花粉中的肌动蛋白含量低得多 .在植物发育过程中肌动蛋白基因的表达有明显的器官特异性 ,在花粉中的表达量比根、茎、叶中高得多 .构建了肌动蛋白反义基因的表达质粒 ,转移到小麦和番茄原生质体中 ,以抑制花粉中肌动蛋白基因的表达 ,从而获得雄性不育植株 .转基因植株花粉中的肌动蛋白明显减少 ,而雌芯却不受影响 .
- 阎隆飞刘国琴肖兴国
- 关键词:花粉肌动蛋白雄性不育作物生殖过程
- 萱草花粉中微管蛋白生物化学性质被引量:7
- 2006年
- 微管(microtubule)是细胞骨架的重要成份,参与囊泡运输、信息传递等多种生命活动。我们从萱草花粉中纯化了植物微管蛋白,对其生物化学及生物物理学部分性质研究表明,纯化的微管蛋白经超离心法测定沉降系数为6.2S,SDS-PAGE分析α,β微管蛋白分子量为56kD、58kD,凝胶扫描分析纯度为93.7%。等电聚焦电泳测定等电点为pI=5.35。光谱学性质研究结果表明,最大紫外吸收峰为280.8nm,荧光光谱研究表明最大激发波长为282nm;此时的最大发射峰为338nm,圆二色光谱分析二级结构表明α-螺旋占27.24%,β-折叠占24.48%,无规卷曲为48.28%,呈典型球蛋白特征。
- 廖俊杰吴英杰阎隆飞
- 关键词:微管蛋白微管花粉萱草
- 萱草花粉微管蛋白的体外聚合及电镜观察被引量:2
- 2005年
- 微管(microtubule)作为细胞骨架的主要成分,在植物体内,微管除决定细胞的形状外,还参与很多重要的细胞功能。但有关微管蛋白生物化学的研究绝大多数来自动物脑组织材料,对植物微管蛋白的研究除培养细胞外所知甚少,我们纯化了毫克数量的萱草(Hemer-ocallis fulvaL.)花粉微管蛋白,利用紫杉醇作为促进剂,在Mg2+、GTP等存在下体外聚合成功,并观察了其电镜下的形态。
- 廖俊杰廖俊杰吴英杰
- 关键词:萱草微管微管蛋白电镜观察
- 萱草花粉动力蛋白的分离与特性(英文)被引量:2
- 2002年
- 动力蛋白 (dynamin)是一类具有可被微管激活的GTP酶活性的新型马达蛋白 ,被证明在动物细胞受体介导的内吞小泡的形成、突触小泡再循环及高尔基体的囊泡运输中起关键作用。近几年 ,一些植物细胞也被发现有动力蛋白类似物。本研究通过分子量鉴定和免疫印迹法证明萱草 (HemerocallisfulvaL .)花粉中存在动力蛋白 ,其分子量为 1 0 0kD ;经过高度纯化的花粉动力蛋白仍具有GTPase活性 ,且可被牛脑微管激活 1 .6 4倍 ;电子显微镜观察结果表明 。
- 吴英杰曹勤红阎隆飞刘国琴
- 关键词:动力蛋白花粉
- 衣藻肌动蛋白-绿色荧光蛋白的融合基因在烟草悬浮细胞中的表达及融合蛋白的体外聚合被引量:2
- 2001年
- 将衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)肌动蛋白(actin)基因(cDNA)与绿色荧光蛋白(green fluore- scence protein, GFP)基因融合后, 分别构建到原核和植物表达载体中, 并在BL21plus细菌和烟草悬浮细胞(BY-2)中进行表达. 通过荧光显微镜观测到重组后的融合蛋白在菌体和烟草悬浮细胞中得到正确表达. 肌动蛋白-绿色荧光蛋白的融合蛋白主要分布在烟草悬浮细胞细胞膜周围, 参与膜骨架的组成, 另外还大量分布于细胞核周围和细胞板的位置, 同时也在细胞内形成丝状结构, 参与F-actin的组成. 将肌动蛋白-绿色荧光蛋白融合基因的原核表达产物经过硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和疏水柱层析后, 得以纯化, 并在纯化产物中加入肌动蛋白聚合缓冲液, 纯化的肌动蛋白能聚合成为丝状结构即F-actin, 这表明低等藻类的肌动蛋白具有同高等植物和动物相似的性质和功能.
- 杨毅刘国琴阎隆飞
- 关键词:绿色荧光蛋白真核表达融合基因真核生物
- 萱草花粉微管蛋白的生物化学性质
- 2005年
- 以萱草花粉为材料,采用丙酮粉法、QAE-Sephadex A50离子交换层析及FPLC技术作为主要分离纯化手段,纯化了毫克数量的萱草花粉微管蛋白,并研究了微管蛋白的生物化学及生物物理学部分性质。试验结果表明:纯化的微管蛋白在20℃时沉降系数为6.2 S;α、β2个亚基的分子量分别为56,58 kD;凝胶扫描分析纯度为93.7%;等电聚焦电泳测定等电点(PI)为5.35。光谱学性质研究表明其最大紫外吸收峰为280.8 nm;荧光光谱研究表明其最大激发波长为282 nm,此时的最大发射峰为338 nm;圆二色光谱分析二级结构是α-螺旋占27.24%、β-折叠占24.48%、无规则卷曲为48.28%,呈典型球蛋白特征。
- 盛艳敏许月吴英杰
- 关键词:萱草花粉微管微管蛋白
- 小麦线粒体肌球蛋白的纯化和特性分析被引量:1
- 2001年
- 通过DE-52离子交换层析和Sephacryl S-300凝胶过滤等方法从小麦线粒体中纯化出了一种脱球蛋白,其重链分子量约为210ku,与骨骼肌肌球蛋白Ⅱ的分子量相近(205ku),并且可以被抗人骨骼肌肌球蛋白多克隆抗体识别.小麦线粒体肌球蛋白的ATP酶活性可以被鸡骨骼肌肌动蛋白丝激活,达到202.5 nmol/min·mg.此外,其ATP酶活性还可以被Ca2+激活,却不被高浓度的Ca2+抑制.结果表明小麦线粒体肌球蛋白与骨骼肌肌球蛋白具有一些相似的生化特性.
- 赵和平刘爱校刘国琴阎隆飞
- 关键词:肌球蛋白线粒体ATP酶活性小麦生化特性
- 百合花粉与花粉管中类高尔基体58K蛋白被引量:3
- 2000年
- 动物细胞中,高尔基体往往位于微管组织中心(MTOC)附近,它们的位置部分地被58K蛋白所决定.通过SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳和免疫印迹方法,我们发现川百合花粉与花粉管内存在类高尔基体58K蛋白,其分子量与动物细胞内58K蛋白类似,约为 60 ku.通过免疫荧光标记方法,在共焦激光扫描显微镜下观察发现,花粉与花粉管内类高尔基体58K蛋白主要存在于一些颗粒状的细胞器上.这些颗粒状细胞器的分布与植物细胞内高尔基体的分布是一致的.进而通过免疫金标和透射电镜观察发现,花粉与花粉管内类58K蛋白主要存在于高尔基体附近的囊泡膜上.
- 李岩阎隆飞
- 关键词:花粉百合
- 全文增补中